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免疫組化染色問題解決方案

來源:上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司   2012年10月25日 10:07  

  染色過強(qiáng)原因 解決方法  
a 抗體濃度過高或孵育時間過長 降低抗體滴度、抗體孵育時間:室溫1小時或4度過夜 
b 孵育溫度過高超過37度 一般在室溫20-28   
c DAB顯色時間過長或濃度過高 顯色時間不超過5-12分鐘,以顯微鏡下觀察為準(zhǔn)  
2、非特異性背景染色  
原因 解決方法  
a 操作過程中沖洗不充分 每步?jīng)_洗3次每次5分鐘  
b 組織中含過氧化物酶未阻斷 可再配置新鮮3%H2O2封閉孵育時間延長  
c 組織中含內(nèi)原性生物素 正常非免疫動物血清再封閉  
d 血清蛋白封閉不充分 延長血清蛋白封閉時間  
3、染色弱  
原因 解決方法  
a 抗體濃度過低、孵育時間過短 提高抗體濃度、孵育時間不能少 于60分鐘 
b 試劑超過有效使用時間 應(yīng)更換試劑  
c 操作中添加試劑時緩沖液未瀝干 每步滴加試劑前瀝干切片中多余的緩沖液  使試劑稀釋 (應(yīng)防止切片干燥)  
d 室溫太低 低于15度 要改放在37度孵育箱孵育30-60分鐘或4 度冰箱過夜 
e 蛋白封閉過度 封閉不要超過12分鐘  
4、染色陰性  
原因 解決方法  
a 操作步驟錯誤 應(yīng)重試 設(shè)陽性對照  
b 組織中無抗原 設(shè)陽性對照以驗證試驗結(jié)果  
c 一抗與二抗種屬連接錯誤 仔細(xì)確定一抗二抗種屬無誤

上海恒遠(yuǎn)ELISA試劑盒供應(yīng)商是大的科研試劑供應(yīng)商,不管在質(zhì)量控制體系還是服務(wù)方面都占有的優(yōu)勢,我公司主營產(chǎn)品:人ELISA試劑盒,大鼠ELISA試劑盒,小鼠ELISA試劑盒,微生物培養(yǎng)基,進(jìn)口抗體,我公司試劑盒產(chǎn)品免費(fèi)代測,送貨上門。我公司是一家技術(shù)服務(wù)型渠道企業(yè),在行業(yè)發(fā)展中所承擔(dān)的角色是一種溝通產(chǎn)出方和需求方(科研和市場)的媒介,我們致力為行業(yè)人才提供了包括科研在內(nèi)的更多出口,為科研提供了有力的硬件支持,有效地促進(jìn)科研和市場需求結(jié)合,提高了科研成果的轉(zhuǎn)化效率,使得科研更具活力。我們將以高度的責(zé)任感和出色的產(chǎn)品質(zhì)量為客戶提供高品質(zhì)的產(chǎn)品和實驗技術(shù)解決方案。豐富的經(jīng)驗、優(yōu)良的品質(zhì)、充足的庫存、準(zhǔn)確的交貨時間、競爭力的價格,所有這些都保證了我們向您提供的是*zui的服務(wù)!

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