固相萃取與液相色譜分析的結(jié)合

萬海濱 加拿大博朗科技有限公司

將樣品前處理和儀器分析結(jié)合,  有助于改進分析結(jié)果的重復(fù)性和提高樣品處理的效率。

通過樣品前處理的自動化,  還可以減少操作人員的勞動強度和對有害溶劑的接觸。加拿 大博朗科技為將樣品前處理和色譜分析結(jié)合提供兩種解決方案。

方案一: SPE-04 離線/在線兩用固相萃取儀

SPE-04既可以進行離線的固相萃取又可以進行在線的樣品凈化和色譜進樣。  此外,  還可 以在控溫條件下進行衍生化。

注射泵

加熱環(huán)

應(yīng)用實例:  血漿中雌激素的分析

1.血漿樣品經(jīng)離心去蛋白后取0.5毫升,  用水稀釋至4毫升,  用SPE柱萃取

2.用2毫升水清洗SPE柱,  然后用0.5毫升甲醇洗脫/收集

3.與丹磺酰氯和堿性緩沖液進行衍生化

4.液相色譜進樣

5.  觸發(fā)液相色譜分析.

60 oC/pH10

+

Estrone Dansyl chloride

SPE-04的特點

1.  離線固相萃取

多功能樣品處理儀可以作為普通的自動固相萃取儀器使用。  操控也不需腦,  只用7 個按鍵便可以完成全部操作。

2.在線固相萃取

當(dāng)使用在線模式時,  凈化后的組份直接進入液相色譜儀,  不需要濃縮和樣品轉(zhuǎn)移等 步驟,  既可以提高效率和重復(fù)性,  又可以減輕操作人員的勞動強度。儀器控制軟件 和大多數(shù)HPLC軟件相容,  安裝和使用都非常方便。

3.  在線衍生的功能。目標化合物經(jīng)SPE凈化后,  可以自動和一或二種衍生化試劑混 合。  在控溫的條件下（30~80oC）反應(yīng)后,  引入HPLC。雖然一些的HPLC自動進樣

器也有柱前衍生的功能, 但是只能在室溫下進行,  既限制了衍生化試劑的選擇范圍,

又有可能因為溫度波動或凈化不好增加誤差。

4.  直接進樣 多功能樣品處理儀可以直接用做HPLC自動進樣器。因此用于在線固相萃取的HPLC當(dāng)

做普通HPLC使用時不需要另外配置進樣器。

方案二:  LC-03  在線固相萃取儀用于液體樣品的直接分析

LC-03在線固相萃取儀將萃取凈化和HPLC分析結(jié)合進行,  可用于水樣的直接分析。它和多 功能樣品處理儀的一個主要不同在于多功能樣品處理儀可以每個樣品換一個SPE柱,  而在 線固相萃取儀是數(shù)十個樣品共用一個SPE柱。

如果采用離線萃取,  樣品只有約1%可以注入 HPLC。而采用在線萃取,  樣品是全部注入 HPLC。因此在線萃取使用20毫升樣品就可以 達到離線萃取2000毫升同樣的靈敏度。

LC-03的工作原理:

1. 注射泵抽取樣品 2. 注射泵由反方向?qū)悠?/span>注入SPE柱

3. 清洗SPE柱 4. 將富集的目標分析物轉(zhuǎn)入 HPLC 柱

自來水中菲的直接分析.  SPE  柱,  TrapN;  色譜分析柱  PromSil  C18;  上樣體積,  40  mL;  檢測波長,  252  nm。

LC-3的特點

1.  注射泵可以從兩個方向淋洗SPE柱

采用反方向上樣,  正方向清洗和洗脫,  可以防止樣品中的顆粒進入分析柱,  并有效防止色 譜峰的擴散.

2.  操作不用電腦

通過儀器的操作面板就可以完全操控儀器.  不會干擾分析儀器的運行,

兩種方案的比較:

使用高效SPE柱以提高SPE-04的分析靈敏度

博朗科技根據(jù)自動固相萃取儀較高的輸液壓力,  開發(fā)了固相萃取柱。該產(chǎn)品使用 HPLC級的高純度硅膠,  采用*的鍵合和表面處理工藝,  使得萃取效率大為提高,  填料 的用量也相應(yīng)大幅度減少。如下圖所示,  50毫克高效固相萃取柱的效果和500毫克普通 SPE柱的效果相當(dāng)。由于填料用量大幅度減少和添料表面不可逆吸附點的有效消除,  使 得洗脫更為容易。  使用0.5-2毫升淋洗液就可以把目標組份*洗脫。

1.100毫克/6毫升  SPE  C18柱,

流速  20毫升/分;

2.  50毫克/3毫升  SPE  C18柱,

1 2 3 4 5 流速  10毫升/分;

3.100毫克/3毫升  SPE  C18柱, 流速  5毫升/分;

4.  500毫克/3毫升  常規(guī)SPE  C18柱

（品牌1）,  流速  5毫升/分;

5.  500毫克/3毫升  常規(guī)SPE  C18柱

（品牌2）,  流速  5毫升/分。

使用0.4毫升丙 酮的洗脫效果

藍色染料水溶液的萃取結(jié)果比較

較小的洗脫體積,  有利于樣品的富集。以SPE-04為例,  如果上樣5毫升,  用0.5毫升溶

劑洗脫收集,  便可以達到10倍的富集效果。