在現(xiàn)代顯微鏡的應(yīng)用中,已不僅需要顯微照相和顯微描繪,在很多情況下,更需要對(duì)顯微鏡標(biāo)本進(jìn)行定量測(cè)定。同時(shí),除了線性大小這個(gè)早已被測(cè)定的參數(shù)外,對(duì)于一個(gè)物體的面積、休積及標(biāo)本中某些特異物質(zhì)的光譜吸收特性等參數(shù),都需要被測(cè)定。
通常用于測(cè)量一個(gè)物體幾何量度的方法被稱(chēng)為形態(tài)度量分析,同時(shí),這種測(cè)量更可以用很簡(jiǎn)單的裝置和方法進(jìn)行,但是現(xiàn)在已制造出專(zhuān)門(mén)的精密儀器,顯微鏡測(cè)量技術(shù)的應(yīng)用可對(duì)這些形態(tài)度量參數(shù)進(jìn)行自動(dòng)或半自動(dòng)的分析。
在聚焦平面上的長(zhǎng)度側(cè)量
運(yùn)用目鏡測(cè)微尺和物臺(tái)測(cè)微尺。通常在物體平面上長(zhǎng)度的測(cè)量是運(yùn)用目鏡測(cè)微尺和物臺(tái)測(cè)微尺進(jìn)行的。目鏡測(cè)微尺是放在目鏡中間像平面上刻有精細(xì)刻度的玻璃圓片,圓片中間有一條直線,一般被劃分為100個(gè)小格。利用它在測(cè)量標(biāo)本中聚焦平面上的某段距離時(shí),例如一個(gè)細(xì)胞核的直徑,把這個(gè)細(xì)胞核的一端對(duì)準(zhǔn)測(cè)微尺的一個(gè)格線,就可以測(cè)量出細(xì)胞核兩端刻度之間的距離。同時(shí),在使用一般的高倍物鏡測(cè)量時(shí),由于物鏡的性能和目鏡的場(chǎng)曲率的限制,應(yīng)只使用測(cè)微尺的中間部分。如所測(cè)得的細(xì)胞核長(zhǎng)直徑為8.5個(gè)刻度,這也只是一個(gè)相對(duì)單位,它并不能表示準(zhǔn)確的長(zhǎng)度,所以,這里就必須借助于一個(gè)物臺(tái)測(cè)微尺來(lái)確定目鏡測(cè)微尺每個(gè)小格所代表的長(zhǎng)度值。測(cè)定的方法通常是把物臺(tái)測(cè)微尺放在物臺(tái)上,用測(cè)定物體所使用的同鏡測(cè)量時(shí),由于測(cè)量顯微鏡的性能和目鏡的場(chǎng)曲率的限制,應(yīng)只使用測(cè)微尺的中間部分。
同時(shí)用測(cè)定物體所使用的同樣放大倍數(shù)的物鏡聚焦,使兩個(gè)測(cè)微尺的刻度都較為清晰,再通過(guò)移動(dòng)機(jī)械物臺(tái)和轉(zhuǎn)動(dòng)目鏡使兩者移至平行靠攏并且對(duì)齊焦點(diǎn)。
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