手機版
化工儀器網(wǎng)手機版
化工儀器網(wǎng)小程序
官方微信
公眾號：chem17
掃碼關(guān)注視頻號
純化抗體通常用于直接檢測抗原。此時抗體標記有一個易于鑒定的標記物，用于結(jié)合和檢測所研究的抗原。在間接檢測抗原方法中，一抗不被標記，而是用標記的二抗（一種抗免疫球蛋白抗體）來檢測。一般而言，建議使用間接法。因為許多商家能夠提供可靠的標記二抗，用間接法不僅省力，結(jié)果同樣可靠。
盡管如此，有幾種方法需要標記的一級抗體。例如，在免疫染色試驗中，需要研究2個或2個以上抗原的相對位置時，常需要純化抗體并用不同標記物標記，這樣能比較它們的相對位置。此時使用間接法不合適。因為間接法是用標記二抗來給未標記的一抗定位。又如，有時一抗需要標記，而該樣本中又有大量無關(guān)抗體，它們能干擾對一抗的檢測，此時用間接法也不合適。用鼠源性單抗對鼠組織抗原進行定位時，也會出現(xiàn)這種情況。此時需要純化一抗，并直接按下述方法進行標記。
免疫親和純化是另一種可能需要純化抗體的技術(shù)。在這一技術(shù)中，抗體共價交聯(lián)到一固相基質(zhì)上，如交連的瓊脂糖或聚丙烯酰胺微球。常用的方法是，先將抗體純化，然后連接到通過化學方法激活而具有結(jié)合位點的微球上。此時，抗體的純化對實驗的成功至關(guān)重要。
還有一種需要純化抗體的試驗，是從多克隆抗血清中分離抗原特異性抗體。多克隆血清中含有復(fù)雜多樣的抗體，它不僅含有針對免疫原產(chǎn)生的抗體，還有血清的全部抗體。出于特定目的的需要，必須將抗原的特異性抗體分離出來。例如使用抗肽抗體時，需要分離出特異性識別肽段的抗體。通過純化能獲得特異性很高的抗體。純化抗體的另一用途是降低本底。幾乎在所有技術(shù)中，使用純化抗體都能降低非特異性本底。產(chǎn)生這種效果主要是因為一方面能去除引起實驗誤差的污染蛋白，另一方面能控制實驗中產(chǎn)生陽性信號的抗體量。使用純化抗體不會使本底增加，因此純化抗體可以作為所有免疫化學實驗中降低本底的基本手段。
抗體的純化通常是濃縮抗體的zui簡單方法。任何來源的抗體可以用蛋白A或蛋白G的純化方法來濃縮。
盡管純化抗體的方法較多，建議用蛋白A或蛋白G微球純化法作為zui常用的方法。這種方法效率高，能為常用的實驗方法提供足夠純化的抗體，而且隨著商品化的蛋白A和蛋白G基質(zhì)的出現(xiàn)，能將任何來源的抗體純化?？贵w的純化也可采用傳統(tǒng)的色譜法，在某些情況下非常有用。這些方法包括DEAE離子交換色譜法、硫酸銨沉淀法及其他方法。但是用蛋白G或蛋白A親和柱法純化較其他方法簡單，并且純化效果是其他方法的數(shù)倍。因此在所有方法中，我們推薦這種方法。
有一種情況不適于應(yīng)用蛋白G或蛋白A親和柱純化抗體，即多克隆抗體需要進一步分離，且針對某種特異性抗原的組分需要分離。此時可用抗原結(jié)合的親和柱純化抗原特異性抗體。這一特殊的純化方法，將在后面討論。
（抗體純化）——上海地區(qū)總代理 恒遠生物作為國內(nèi)幾大酶免代理商/供應(yīng)商之一，為打造國內(nèi)*品牌ELISA試劑盒和動物疫病診斷試劑盒而不懈努力。
相關(guān)產(chǎn)品
免責聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來源：化工儀器網(wǎng)”的所有作品，均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品，未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的，應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用，并注明“來源：化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者，本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責任。
- 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來源（非化工儀器網(wǎng)）的作品，目的在于傳遞更多信息，并不代表本網(wǎng)贊同其觀點和對其真實性負責，不承擔此類作品侵權(quán)行為的直接責任及連帶責任。其他媒體、網(wǎng)站或個人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時，必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源，并自負版權(quán)等法律責任。
- 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問題，請在作品發(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系，否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。
采購中心