紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)操作步驟及注意事項(xiàng)簡(jiǎn)介
操作步驟
操作之前
1.1開(kāi)啟電源進(jìn)行初始化開(kāi)啟主機(jī)電源,分光光度計(jì)將按屏幕所顯示的項(xiàng)目進(jìn)行自檢和初始化,如下圖所示。所有項(xiàng)目檢測(cè)完畢,初始化結(jié)束,整個(gè)過(guò)程大約需要4min(若使用多池檢測(cè)需5min)。每個(gè)項(xiàng)目進(jìn)行初始化操作時(shí)將被加亮顯示,當(dāng)初始化完成后,該項(xiàng)右邊的星標(biāo)也將加亮顯示。但是,如果檢測(cè)到任何異常,初始化過(guò)程將立即中止,星標(biāo)也不會(huì)加亮顯示。
1.2屏幕顯示和觸摸鍵盤UV-1700的觸摸鍵盤圖可用數(shù)字鍵0~9和功能鍵F1~F4選擇不同屏幕中的模式和設(shè)置。選擇時(shí),按下相應(yīng)的數(shù)字鍵或功能鍵即可,無(wú)需按ENTER鍵確認(rèn)。此外,輸入數(shù)值時(shí),如
波長(zhǎng)設(shè)置或顯示模式等,必須按ENTER鍵確認(rèn)輸入值。
下面介紹每個(gè)鍵的基本功能,在不同屏幕下有一些鍵可能被賦予特殊的功能。
①START/STOP鍵一旦參數(shù)設(shè)置完成,可用該鍵開(kāi)始和停止測(cè)量過(guò)程。
②AUTO ZERO鍵按該鍵,當(dāng)前波長(zhǎng)的吸光度自動(dòng)調(diào)整為0(100%T)。測(cè)量前,必須確保在樣品側(cè)和參比側(cè)中都放有盛有空白的比色池。
③GOTOWL鍵該鍵可用來(lái)改變當(dāng)前的波長(zhǎng)。
④ENTER鍵輸入數(shù)值后,按該鍵確認(rèn)。
⑤Cursor光標(biāo)鍵(<(-),>)這組鍵可控制液晶顯示屏幕中光標(biāo)的左右移動(dòng)。輸入數(shù)值時(shí),左光標(biāo)鍵還可以用來(lái)輸入負(fù)值(-)。
⑥Function功能鍵(F1~F4)這組鍵的功能與液晶顯示屏幕下方所顯示的功能相對(duì)應(yīng)。
⑦RETURN鍵按下該鍵可返回當(dāng)前屏幕的前一屏。
⑧MODE鍵用該鍵可從每種測(cè)量模式的參數(shù)設(shè)置屏返回到主模式屏。
⑨Print打印鍵用該鍵可輸出當(dāng)前屏幕顯示的硬拷貝。
⑩Numeric數(shù)字鍵用該鍵可輸入數(shù)值?CE鍵用該鍵可清除數(shù)值輸入錯(cuò)誤。按該鍵,已輸入的數(shù)值將被清除,可重新輸入正確的數(shù)值。模式選擇和共享操作初始化完成后即顯示模式選擇屏幕
各種模式概述:
在模式選擇屏幕下選擇各種測(cè)量模式,即顯示各自的參數(shù)配置屏幕。
①光度模式在固定波長(zhǎng)下測(cè)量樣品的吸光度或%透光率。
②光譜模式掃描波長(zhǎng)范圍以測(cè)量隨波長(zhǎng)變化的樣品的吸光度和%透光率。也可進(jìn)行單光束能量測(cè)量。對(duì)測(cè)得光譜可進(jìn)行數(shù)據(jù)處理,如峰檢出、平滑處理和數(shù)學(xué)計(jì)算等。
③定量模式用標(biāo)準(zhǔn)樣品建立校正曲線,并對(duì)未知樣品進(jìn)行定量測(cè)量。
測(cè)量方法有:
1、波長(zhǎng)法;
2、波長(zhǎng)法;
3、波長(zhǎng)法;
4、微分定量法。另外,可用下列方法建
立校正曲線:K-系數(shù)法、單點(diǎn)校正曲線法、多點(diǎn)校正曲線法。
④動(dòng)力學(xué)模式由吸光度隨時(shí)間的變化計(jì)算酶的活性。若使用多池支架(可選配),zui多可測(cè)量
16個(gè)樣品。以下是可供選用的測(cè)量方法:
1、波長(zhǎng)動(dòng)力學(xué)測(cè)量;
2、波長(zhǎng)動(dòng)力學(xué)測(cè)量;
3、多池動(dòng)力學(xué)測(cè)量;
4、速率測(cè)量。
⑤時(shí)間掃描模式該功能用于測(cè)量固定波長(zhǎng)下吸光度、透光率或能量隨時(shí)間的變化。使用多池支架(可選配)
zui多可測(cè)量
16個(gè)樣品,還可以對(duì)測(cè)得數(shù)據(jù)進(jìn)行數(shù)學(xué)計(jì)算等數(shù)據(jù)處理。
⑥多組分測(cè)量模式可定量分析zui多8種組分的樣品。使用每種組分的純品作標(biāo)準(zhǔn)樣品,制作校正曲線,進(jìn)行定量測(cè)量。
⑦光度測(cè)量(多波長(zhǎng))zui多可8個(gè)任意波長(zhǎng),然后分別測(cè)量每個(gè)波長(zhǎng)處的吸光度和透光率。測(cè)得吸光度后,可選擇三個(gè)計(jì)算式中的一個(gè),對(duì)zui多為四個(gè)波長(zhǎng)下的測(cè)得數(shù)據(jù)進(jìn)行計(jì)算,并輸出測(cè)量結(jié)果。
·
2波長(zhǎng)處測(cè)得值間的比值/差值和
3波長(zhǎng)測(cè)量值的計(jì)算·用四數(shù)據(jù)計(jì)算式進(jìn)行計(jì)算:(K1A1+K2A2+K3A3+K4A4)×K5 ·用四數(shù)據(jù)計(jì)算式進(jìn)行計(jì)算:K5×(K1A1+K2A2)/(K3A3+K4A4) Kn:相關(guān)系數(shù);An:吸光度。
⑧可選配程序包使用可選配程序包時(shí)選用此模式??蛇x配DNA/蛋白質(zhì)程序包。
⑨公用模式在該模式下可設(shè)置和改變儀器的基本操作參數(shù)。
光度測(cè)量操作步驟如下:
1、在模式選擇屏幕中選擇<1. Photometric光度>選項(xiàng),將顯示參數(shù)配置屏幕。
2、用GOTOWL鍵設(shè)定測(cè)量波長(zhǎng)。
3、按F2鍵設(shè)定進(jìn)樣控制。
4、按START/STOP鍵時(shí),測(cè)量開(kāi)始,顯示測(cè)量屏幕。
5、如需做空白校正,應(yīng)在測(cè)量前先設(shè)置空白樣品,然后按AUTOZERO鍵,將測(cè)量值置為0ABS(100%)。
注意事項(xiàng)
1、比色皿使用時(shí)注意不要沾污或?qū)⒈壬蟮耐腹饷婺p,應(yīng)手持比色皿的毛面。
2、待測(cè)液制備好后應(yīng)盡快測(cè)量,避免有色物質(zhì)分解,影響測(cè)量結(jié)果。
3、測(cè)得的吸光度A控制在0.2~0.8之間,超過(guò)1.0時(shí)要做適當(dāng)稀釋。
4、開(kāi)關(guān)試樣室蓋時(shí)動(dòng)作要輕緩。
5、不要在儀器上方傾倒測(cè)試樣品,以免樣品污染儀器表面,損壞儀器。
6、比色皿在盛裝樣品前,應(yīng)用所盛裝樣品沖洗兩次,測(cè)量結(jié)束后比色皿應(yīng)用蒸餾水清洗干凈后倒置晾干。若比色皿內(nèi)有顏色掛壁,可用無(wú)水乙醇浸泡清洗。
7、向比色皿中加樣時(shí),若樣品流到比色皿外壁時(shí),應(yīng)以濾紙點(diǎn)干,鏡頭紙擦凈后測(cè)量,切忌用濾紙擦拭,以免比色皿出現(xiàn)劃痕。
8、測(cè)定紫外波長(zhǎng)時(shí),需選用石英比色皿。
9、測(cè)量過(guò)程中不可打開(kāi)測(cè)量室的窗門,否則會(huì)影響測(cè)量結(jié)果的準(zhǔn)確性。
維護(hù)和保養(yǎng)
1、儀器使用一定周期后內(nèi)部會(huì)積累一定量的塵埃由維修工程師或工程師指導(dǎo)下定期開(kāi)啟儀器外罩對(duì)內(nèi)部進(jìn)行除塵工作同時(shí)將各發(fā)熱元件的散熱器重新緊固
對(duì)光學(xué)盒的密封窗口進(jìn)行清潔必要時(shí)對(duì)光路進(jìn)行校準(zhǔn)對(duì)機(jī)械部分進(jìn)行清潔和必要的潤(rùn)滑zui后恢復(fù)原狀再進(jìn)行一些必要的檢測(cè)、調(diào)校與記錄
2、環(huán)境中的塵埃和腐蝕性氣體亦可以影響機(jī)械系統(tǒng)的靈活性、降低各種限位開(kāi)關(guān)、按鍵、光電偶合器的可靠性,也是造成必須學(xué)部件鋁膜銹蝕的原因之一因此必須定期清潔保障環(huán)境和儀器室內(nèi)衛(wèi)生條件防塵
3、溫度和濕度是影響儀器性能的重要因素他們可以引起機(jī)械部件的銹蝕使金屬鏡面的光潔度下降引起儀器機(jī)械部分的誤差或性能下降造成光學(xué)
部件如光柵、反射鏡、聚焦鏡等的鋁膜銹蝕產(chǎn)生光能不足、雜散光、噪聲等甚至儀器停止工作從而影響儀器壽命維護(hù)保養(yǎng)時(shí)應(yīng)定期加以校正應(yīng)具備四季恒濕的儀器室配置恒溫設(shè)備特別是地處南方地區(qū)的實(shí)驗(yàn)室
相關(guān)產(chǎn)品
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