培養(yǎng)細(xì)菌需要培養(yǎng)基（culture medium），M9和LB培養(yǎng)基是兩種典型的細(xì)菌培養(yǎng)基。

      M9是一種確定成分培養(yǎng)基（defined medium），其中的所有成分是可知的。這種培養(yǎng)基包含的無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)成分（inorganic nutrients)的混合物為細(xì)菌的生長(zhǎng)提供基本元素，如氮，鎂和鈣，葡萄糖(glucose)提供碳源和能量。在實(shí)際應(yīng)用中，還必須向M9中添加額外的生長(zhǎng)因子，如微量元素和維生素。需要添加何種成分要視情況而定。
      Luria-Bertani（LB）培養(yǎng)基是一種不確定成分培養(yǎng)基(undefined medium)，胰蛋白胨(tryptone)負(fù)責(zé)提供氨基酸以及小的肽段，酵母提取物(yeast extract)負(fù)責(zé)提供氮源、糖以及其他有機(jī)和無(wú)機(jī)營(yíng)養(yǎng)。類似LB的混合培養(yǎng)基不需要補(bǔ)充其他的營(yíng)養(yǎng)成分，并且能夠維持種類更多的細(xì)菌的生長(zhǎng)。

      當(dāng)細(xì)菌培養(yǎng)物需要在嚴(yán)格準(zhǔn)確的條件下進(jìn)行生長(zhǎng)時(shí)，必須使用確定成分培養(yǎng)基。然而，當(dāng)培養(yǎng)物僅僅作為一種DNA的來(lái)源時(shí)，就沒(méi)有必要用確定成分培養(yǎng)基，利用不確定成分培養(yǎng)基就更加合適。
      利用LB培養(yǎng)基，在37 ℃、150～250 r/min的條件下，培養(yǎng)大腸桿菌細(xì)胞，大約每20 min分裂一次，直到培養(yǎng)基中的細(xì)胞達(dá)到2×109～3×109個(gè)/mL的zui大密度。培養(yǎng)物的生長(zhǎng)狀況可以通過(guò)讀取600 nm可見(jiàn)分光光度值（OD值）來(lái)監(jiān)測(cè)，在該波長(zhǎng)下，每個(gè)單位的OD值相當(dāng)于0.8×109 個(gè)/mL。
      通過(guò)離心可以收集細(xì)胞。相對(duì)較低的轉(zhuǎn)速就能夠使細(xì)菌在離心管（centrifuge tube）的底部聚集，這樣一來(lái)上層的培養(yǎng)基就能夠很容易到出。