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　　乙肝核心抗原(HBcAg)酶聯(lián)免疫試劑盒操作步驟：

　　1.平衡：將試劑盒各組分從盒中取出，平衡至室溫(18℃-25℃)，微孔板開封后，余者即時以自封袋封存。

　　2.配液：濃縮洗滌液配制前充分搖勻(如有晶體應(yīng)充分溶解)，濃縮洗滌液和蒸餾水或去離子水按1：19稀釋后使用。

　　3.編號：將微孔條固定于支架，按序編號。

　　4.稀釋：將待測血清樣品1：1000稀釋。

　　5.加樣：按順序分別在相應(yīng)孔加入100μl已稀釋的待測血清樣品或陰、陽性對照血清。

　　6.溫育.置37℃溫育20分鐘。

　　7.洗滌：用洗滌液充分洗滌5次，洗滌完后扣干(每次均應(yīng)保持30-60秒的浸泡時間)。

　　8.加抗原、酶：每孔中加入抗原(HBcAg)、酶標記抗體各50μl;輕拍混勻。

　　9.溫育：置37℃溫育40分鐘。

　　10.洗滌：用洗滌液充分洗滌5次，洗滌完后扣干(每次均應(yīng)保持30-60秒的浸泡時間)。

　　11.顯色：每孔加底物A、B各50μl，輕拍混勻，室溫暗置15分鐘。

　　12.終止：每孔加終止液50μl，混勻。

　　13.測定：用酶標儀單波長450nm或雙波長450nm/630nm測定各孔OD值(用單波長測定時需設(shè)空白對照一孔，30分鐘內(nèi)完成測定，并記錄結(jié)果)。

　　乙肝核心抗原(HBcAg)酶聯(lián)免疫試劑盒注意事項：

　　1.血清的稀釋請使用10mmol/LPBS或生理鹽水。不宜用蒸餾水稀釋。

　　2.每板建議設(shè)陰、陽性對照血清各兩孔，設(shè)空白對照時，不加樣品、抗原及酶標記抗體，其余各步相同。

　　3.洗滌時各孔均須加滿，防止孔口內(nèi)有游離酶未能洗凈。

　　4.加試劑前應(yīng)將試劑瓶翻轉(zhuǎn)數(shù)次，使液體混勻。如果滴加，滴加前應(yīng)棄去1-2滴。滴加時瓶身應(yīng)保持垂直，以使滴量準確。注意勿將試劑滴在孔壁上。

　　5.所有樣品都應(yīng)按傳染源處理。

　　6.封口膜使用說明。

　　(1)微孔板拆封后，在取出當天所需的微孔條后，其余微孔條可以封口膜封存以避免受潮。在封存時，注意勿把封口膜粘貼到微孔條底部，以免影響其透光性。

　　(2)微孔板溫育時，以封口膜覆蓋孔口，可避免其它因素對實驗帶來的非預(yù)期的影響。

　　7.不同品名、不同批號的試劑不可混用，以免產(chǎn)生錯誤結(jié)果。

　　8.使用EDTA、枸櫞酸鈉、肝素鈉作為抗凝劑不影響實驗結(jié)果。

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