血清免疫球蛋白的分離制備操作:

（1）在1支離心管中加入5ml血清和5ml 0.01mol/L，PH7.0 磷酸鹽緩沖液，混勻。用皮頭滴管吸取飽和硫酸銨溶液，邊滴加邊攪拌于血漿溶液中，使溶液的zui終飽和度為20%（應(yīng)加入飽和硫酸銨溶液多少毫升？），用滴管邊加邊攪拌，是為防止飽和硫酸銨1次性加入或攪拌不均勻造成局部過(guò)飽和的現(xiàn)象，使鹽析達(dá)不到預(yù)期的飽和度，得不到目的蛋白質(zhì)。攪拌時(shí)不要過(guò)急以免產(chǎn)生過(guò)多泡沫，致使蛋白質(zhì)變性。加完后應(yīng)在4℃放置15min，使之充分鹽析。然后以3000r/min離心10min。棄去沉淀（沉淀為纖維蛋白原），在上清液中為清蛋白、球蛋白。

（2）量取上清液的體積，置于另一離心管中，用滴管繼續(xù)在上清液中滴加飽和硫酸銨溶液，使溶液的飽和度達(dá)到50%（應(yīng)加飽和硫酸銨溶液多少毫升？）。加完后在4℃放15min，以3000r/min離心10min，清蛋白在上清液中，沉淀為球蛋白。棄去上清液，留下沉淀部分。

（3）將所得的沉淀再溶于5ml0.01mol/L，PH7.0磷酸鹽緩沖液中。滴加飽和硫酸銨溶液，使溶液的飽和度達(dá)35%（應(yīng)加入飽和硫酸銨溶液多少毫升？）。加完后4℃放置20min，以3000r/min離心15min，a，b球蛋白在上清液中，沉淀為IgG。棄去上清液，即獲得粗制的IgG沉淀。

為了進(jìn)一步化，操作（3）可得1~2次。將獲得的粗IgG沉淀溶解于2ml0.0175mol/L，PH6.7磷酸鹽緩沖液中備用。