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為什么提取DNA過程中要用冷凍離心機

來源:上海博翎儀器設(shè)備有限公司   2014年05月12日 17:13  

DNA的分離和提取中一般要用到離心機三次:

*次離心是在細胞破碎后,目的是除去溶液中的固體雜質(zhì)。

第二次離心是在*次離心的上清中加入苯酚/氯仿/異戊醇溶液以后,目的是將DNA和蛋白質(zhì)等雜質(zhì)分離。

第三次離心是在第二次離心的上清中加入氯仿/異戊醇溶液之后,目的是進一步純化DNA、并除去上一步中引入的苯酚。 

    為什么要要冷凍的離心機呢,雖然冷凍或低溫會對細胞造成DNA損傷,影響結(jié)果。但冷凍條件下能夠很好地把核酸DNA沉淀下來,若采用室溫離心,必需要提高轉(zhuǎn)數(shù)才能在相同時間內(nèi)獲得相當?shù)某恋砹?。溫度不合適情況下的離心分離會加速DNA降解或者斷裂。

 

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