從實驗操作者的經(jīng)驗來看,客戶們的問題也會不同。剛開始接觸實驗的老師在使用試劑的方面不知該如何選擇,明天就是立秋了,做實驗的時候準備一份*手冊吧!下面來看上海滬鼎生物今天帶您的資訊內(nèi)容,夏尾分析-ELISA*手冊之血清的稀釋。
在進入重點內(nèi)容之前,上海滬鼎先問大家一個問題,您知道為什么elisa試劑盒實驗血清要稀釋嗎?其中有何原因?
針對這一問題,有著兩個主要原因:
1. 血清中含有的性腺激素比較低,應該濃縮才對;
2. 競爭抑制比較明顯,應稀釋競爭物。
ELISA實驗稀釋血清步驟具體分析:
1. 先把蛋白稀釋一定的倍數(shù);
2. 將抗原進行一系列稀釋包被微量反應板;
2. 用一定稀釋度的陽性參考血清和陰性參考血清進行孵育后洗滌;
2. 加酶結(jié)合物進行反應;
2. 經(jīng)孵育洗滌后,加底物溶液顯色,終止反應后分別測定O.D值,選擇O.D值≥1.0的那個抗原稀釋度為zui適包被濃度;
2. 一般總是要選擇那個O.D值稍大于1.0,而不選擇小于1.0的抗原濃度。陰性參考血清O.D值要求<0.1-0.2。也就是要求陽性參考血清和陰性參考血清的O.D值有明顯差別。
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