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農(nóng)藥殘留檢測(cè)方法

來(lái)源:上海標(biāo)卓科學(xué)儀器有限公司   2014年08月13日 15:19  

1. 農(nóng)殘?jiān)噭┡渲?/span>

緩沖溶液:取一包緩沖劑,加入500ml蒸餾水,溶解攪拌均勻,密閉、避光、陰涼處保存。

顯色劑:取顯色劑一瓶,加入15ml緩沖溶液溶解,4℃冰箱中保存。

底物:取底物一瓶,加入15ml蒸餾水溶解,4℃冰箱中保存。

乙酰膽堿酯酶:取乙酰膽堿酯酶一瓶,用3ml緩沖溶液溶解, 4℃冰箱中保存。

注:因農(nóng)殘?jiān)噭┥a(chǎn)廠家眾多,使用時(shí)請(qǐng)以試劑說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)!

2. 樣品處理

選取有代表性的蔬菜樣品,擦掉樣品表面泥土,剪成1cm見(jiàn)方碎片,取樣品1g,放入燒杯或提取瓶中,加入5ml緩沖溶液,振蕩1min~2min,倒出提取液,靜置3min~5min,待用。

注意:樣品不可用水沖洗,應(yīng)擦去表面泥土等雜物后取樣。為了保證取樣具有代表性,葉菜一般取來(lái)自不同植株葉片的葉尖部樣本,果菜從不同個(gè)體的表皮處取樣。

3. 對(duì)照溶液測(cè)試

在提取瓶中加入2.5ml緩沖溶液,再加入100ul酶液、100ul顯色劑,搖勻后于37℃放置15分鐘(每批樣品的控制時(shí)間必須一致)。15分鐘后再加入100μL底物搖勻,此時(shí)檢液開(kāi)始顯色反應(yīng),應(yīng)立即倒入1cm比色皿,放入儀器比色池中,將儀器調(diào)到測(cè)量界面,按操作指示面板按鍵區(qū)的“對(duì)照”按鈕,儀器開(kāi)始做對(duì)照。3分鐘后儀器自動(dòng)對(duì)照完成,對(duì)照完成后將對(duì)照樣取出,保持儀器界面不變。

注意:對(duì)照測(cè)試必須在*通道進(jìn)行,對(duì)照測(cè)試△A應(yīng)>0.3,若對(duì)照測(cè)試的結(jié)果小于以上數(shù)值時(shí),儀器會(huì)自動(dòng)提示“對(duì)照錯(cuò)誤”,須重新做對(duì)照,以保證測(cè)量結(jié)果的準(zhǔn)確性。(對(duì)照測(cè)試△A<0.3的原因:一是酶的活性不夠,二是反應(yīng)溫度太低。)

4. 樣品溶液測(cè)試

另取干凈的提取瓶,放入2.5ml樣品提取液,加入100ul酶液、100ul顯色劑,搖勻后于37℃放置15分鐘(放置的時(shí)間與對(duì)照液放置的時(shí)間必須一致)。15分鐘后再加入100μL底物搖勻,此時(shí)檢液開(kāi)始顯色反應(yīng),應(yīng)立即倒入1cm比色皿,放入儀器比色池中,按操作指示面板按鍵區(qū)的“測(cè)量”按鈕開(kāi)始測(cè)量,3分鐘后儀器測(cè)量完成,顯示測(cè)量結(jié)果。結(jié)果以酶被抑制的程度(抑制率)表示,當(dāng)蔬菜樣品提取液對(duì)酶的抑制率≥50%時(shí),表示蔬菜中有高劑量有機(jī)磷或氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥存在,樣品為陽(yáng)性結(jié)果,陽(yáng)性結(jié)果的樣品需要重復(fù)檢驗(yàn)2次以上。

對(duì)陽(yáng)性結(jié)果的樣品,可用其它方法進(jìn)一步確定具體農(nóng)藥品種和含量。

5. 說(shuō)明

蔥、蒜、蘿卜、韭菜、芹菜、香菜、茭白、蘑菇及番茄汁液中,含有對(duì)酶有影響的植物次生物質(zhì),容易產(chǎn)生假陽(yáng)性。處理這類(lèi)樣品時(shí),可采取整株(體)蔬菜浸提。對(duì)一些含葉綠素較高的蔬菜,也可采取整株(體)蔬菜浸提的方法,減少色素的干擾。

甲醛檢測(cè)方法

1. 試劑配置

甲醛試劑(一)

甲醛試劑(二): 將甲醛試劑(二)加少量熱水溶解,再加入甲醛試劑(二),冷卻后定容于50ml容量瓶

注意:所有試劑均需避光、低溫(冰箱4℃)保存!甲醛試劑(一)有腐蝕性;配制好的甲醛試劑(二)可使用一個(gè)月。

2. 樣品處理

準(zhǔn)確稱(chēng)取0.2g樣品放入哈希管中,加入5滴甲醛試劑(一)和10ml蒸餾水,混勻后蓋緊瓶蓋,放入沸水中加熱5min,取出冷卻至室溫,用0.45μm微孔濾膜過(guò)濾,以除去懸浮顆粒,此為待測(cè)溶液。

3. 空白

取蒸餾水10ml于10ml比色管中,加入甲醛試劑(二)1 ml,混合均勻,放入恒溫水浴鍋中50℃加熱15分鐘,取出冷卻至室溫,移入1cm比色皿中,放入儀器相應(yīng)比色池中,按操作指示面板區(qū)的“對(duì)照”鍵進(jìn)行對(duì)照,對(duì)照完成后,儀器會(huì)自動(dòng)記錄對(duì)照結(jié)果,并在顯示屏下方顯示為“對(duì)照測(cè)量完成”。

 

4. 測(cè)量

移取處理好的樣品溶液5ml于10ml比色管中,加入蒸餾水定容至10ml,然后再加入甲醛試劑(二)1 ml,混合均勻,放入恒溫水浴鍋中50℃加熱15分鐘,取出冷卻至室溫,移入1 cm比色皿中,放入已經(jīng)做過(guò)對(duì)照的儀器通道中按操作提示面板區(qū)的“測(cè)量”鍵進(jìn)行測(cè)量,測(cè)量完成后,儀器自動(dòng)顯示樣品中甲醛濃度值X(mg/kg

吊白塊檢測(cè)方法

1. 試劑配置

吊白塊試劑(一)

吊白塊試劑(二):將吊白塊試劑(二)加少量熱水溶解,再加入吊白塊試劑(二),冷卻后定容于50ml容量瓶

注意:所有試劑均需避光、低溫(冰箱4℃)保存!吊白塊試劑(一)有腐蝕性;配制好的吊白塊試劑(二)可使用一個(gè)月。

2. 樣品處理

準(zhǔn)確稱(chēng)取0.2g樣品放入哈希管中,加入5滴吊白塊試劑(一)和10ml蒸餾水,混勻后蓋緊瓶蓋,放入沸水中加熱5min,取出冷卻至室溫,用0.45μm微孔濾膜過(guò)濾,以除去懸浮顆粒,此為待測(cè)溶液。

3. 空白

取10ml蒸餾水于10ml比色管中,加入吊白塊試劑(二)1 ml,混合均勻,放入恒溫水浴鍋中50℃加熱15分鐘,取出冷卻至室溫,移入1cm比色皿中,放入儀器相應(yīng)比色池中,按操作指示面板區(qū)的“對(duì)照”鍵進(jìn)行對(duì)照,對(duì)照完成后,儀器會(huì)自動(dòng)記錄對(duì)照結(jié)果,并在顯示屏下方顯示為“對(duì)照測(cè)量完成”。

4. 測(cè)量

移取處理好的樣品溶液5ml于10ml比色管中,加入蒸餾水定容至10ml,然后再加入吊白塊試劑(二)1 ml,混勻后放入恒溫水浴鍋中50℃加熱15分鐘,取出冷卻至室溫,移入1 cm比色皿中,放入已經(jīng)做過(guò)對(duì)照的儀器通道中按操作提示面板區(qū)的“測(cè)量”鍵進(jìn)行測(cè)量,測(cè)量完成后,儀器自動(dòng)顯示樣品中吊白塊濃度值X(mg/kg

雙氧水檢測(cè)方法

1. 試劑配置

     雙氧水試劑(一)

     雙氧水試劑(二)

注意:所有試劑均需避光、低溫(冰箱4℃)保存!雙氧水試劑(一)有腐蝕性,雙氧水試劑(二)有毒。

2. 樣品處理

準(zhǔn)確稱(chēng)取1.0g樣品放入哈希管中,加2ml雙氧水試劑(一)和6ml蒸餾水,混勻后蓋緊瓶蓋,放入恒溫水浴鍋50℃下加熱10min取出冷卻至室溫,用0.45μm 微孔濾膜過(guò)濾,濾液移入10ml比色管中,加0.2ml雙氧水試劑(二),再加蒸餾水至10ml刻度,此為待測(cè)溶液。

3. 空白

向比色管中加入2ml雙氧水試劑(一)和0.2ml雙氧水試劑(二),再加蒸餾水至10ml刻度,混勻,轉(zhuǎn)入1cm比色皿,放入儀器相應(yīng)比色池中,按操作指示面板區(qū)的“對(duì)照”鍵進(jìn)行對(duì)照,對(duì)照完成后,儀器會(huì)自動(dòng)記錄對(duì)照結(jié)果,并在顯示屏下方顯示為“對(duì)照測(cè)量完成”。

4. 測(cè)量

 向待測(cè)液中加入2ml雙氧水試劑(一)和0.2ml雙氧水試劑(二),再加蒸餾水至10ml刻度,搖勻,轉(zhuǎn)入1cm比色皿中,放入儀器比色池中進(jìn)行測(cè)量,測(cè)量完成后,儀器會(huì)自動(dòng)顯示樣品濃度結(jié)果X(mg/kg

亞硝酸鹽檢測(cè)方法

1.試劑配置

亞硝酸鹽試劑(一):加少量熱蒸餾水溶解,冷卻后定容于50mL容量瓶。

亞硝酸鹽試劑(二):加蒸餾水溶解,定容于50mL容量瓶。

亞硝酸鹽試劑(三): 將兩種亞硝酸鹽試劑(三)溶于少量熱水中,冷卻后定容于50ml容量瓶。

亞硝酸鹽試劑(四):將亞硝酸鹽試劑(四)①加亞硝酸試劑(四)②定容于100mL棕色容量瓶,避光保存。

亞硝酸鹽試劑(五):加蒸餾水溶解,定容于100mL棕色容量瓶,避光保存。

注意:除試劑(一)需常溫保存外所有試劑均需避光、低溫(冰箱4℃)保存!亞硝酸鹽試劑(一)容易析出,請(qǐng)用50℃左右水浴加熱1分鐘后使用。配制好的亞硝酸鹽試劑(五)有腐蝕性,可放置一個(gè)月左右,溶液變綠后不能使用。

2.樣品處理

準(zhǔn)確稱(chēng)取0.1g經(jīng)攪碎混勻的試樣,置于哈希管中,加入1mL亞硝酸鹽試劑(一)和5mL的蒸餾水,密閉后于沸水浴中加熱15min,取出后冷卻至室溫,然后一面轉(zhuǎn)動(dòng)一面加入1mL亞硝酸鹽試劑(二),搖勻,再加入1mL亞硝酸鹽試劑(三),以沉淀蛋白質(zhì)。加水至10ml刻度,搖勻,放置0.5小時(shí),除去上層脂肪,余液用0.45μm微孔濾膜過(guò)濾,濾液備用。

3.對(duì)照測(cè)試

取5ml蒸餾水于10ml比色管中,加入0.1mL亞硝酸鹽試劑(四),混勻,放置5min后加入0.2ml試劑(五),混勻,靜置15分鐘,轉(zhuǎn)入1cm比色皿,放入儀器相應(yīng)比色池中,按操作指示面板區(qū)的“對(duì)照”鍵進(jìn)行對(duì)照,對(duì)照完成后,儀器會(huì)自動(dòng)記錄對(duì)照結(jié)果,并在顯示屏下方顯示為“對(duì)照測(cè)量完成”。

4.樣品測(cè)定

取5ml待測(cè)溶液于10ml比色管中,加入0.1亞硝酸鹽試劑(四)混勻,放置5min后加入0.2ml試劑(五),混勻,靜置15分鐘,轉(zhuǎn)入1cm比色皿,放入已經(jīng)做過(guò)對(duì)照的儀器通道中按操作提示面板區(qū)的“測(cè)量”鍵進(jìn)行測(cè)量,測(cè)量完成后,儀器自動(dòng)顯示樣品中亞硝酸鹽濃度值X(mg/kg。

六價(jià)鉻檢測(cè)方法

1.試劑配置

    六價(jià)鉻試劑(一):加蒸餾水稀釋?zhuān)ㄈ萦?00mL容量瓶

    六價(jià)鉻試劑(二):加蒸餾水稀釋?zhuān)ㄈ萦?00mL容量瓶 

六價(jià)鉻試劑(三):加蒸餾水稀釋?zhuān)ㄈ萦?00mL容量瓶

六價(jià)鉻試劑(四):加蒸餾水稀釋?zhuān)ㄈ萦?00mL容量瓶

六價(jià)鉻試劑(五):將六價(jià)鉻試劑(五)①溶解于六價(jià)鉻試劑(五)②中,加水稀釋至100ml,儲(chǔ)存于棕色瓶中置冰箱內(nèi)保存。

注意:所有試劑均需避光、低溫(冰箱4℃)保存!六價(jià)鉻試劑(一)、六價(jià)鉻試劑(二)、六價(jià)鉻試劑(三)、六價(jià)鉻試劑(四)有腐蝕性;當(dāng)配制好的六價(jià)鉻試劑(五)溶液色變深后不能使用。

2.樣品處理

操作步驟

① 將待測(cè)的糧食、蔬菜、水果類(lèi)樣品洗凈晾干,碾碎,混勻備用。禽蛋、水產(chǎn)等洗凈、晾干,取可食部分,混勻備用。

② 取經(jīng)過(guò)預(yù)處理的均勻樣品1.000g于哈希管中(敞開(kāi)),加入2.0mL試劑(一)純硝酸,4.0mL試劑(二)過(guò)氧化氫溶液,輕輕搖勻,放入亞臨界水萃取儀中,從溫度升到140℃時(shí)開(kāi)始計(jì)時(shí),保持恒溫lh,同時(shí)做試劑空白,取出哈希管待自然冷卻后,將消解液移入l0mL比色管中,將哈希管用水洗凈,合并洗液于比色管中,用水稀釋至10ml刻度,混勻、待測(cè)。

3.對(duì)照測(cè)試

取10ml蒸餾水于10ml比色管中,向比色管內(nèi)加入0.1ml六價(jià)鉻試劑(三)和六價(jià)鉻試劑(四),混勻,再加入0.4ml試劑(五)搖勻,放置10min后,轉(zhuǎn)入1cm比色皿,放入儀器相應(yīng)比色池中,按操作指示面板區(qū)的“對(duì)照”鍵進(jìn)行對(duì)照,對(duì)照完成后,儀器會(huì)自動(dòng)記錄對(duì)照結(jié)果,并在顯示屏下方顯示為“對(duì)照測(cè)量完成”。

4.樣品測(cè)定

取待測(cè)溶液,加蒸餾水稀釋至刻度,再向比色管內(nèi)加入0.1ml六價(jià)鉻試劑(三)和六價(jià)鉻試劑(四),混勻,再加入0.4ml試劑(五)搖勻,放置10min后,轉(zhuǎn)入1cm比色皿,放入已經(jīng)做過(guò)對(duì)照的儀器通道中按操作提示面板區(qū)的“測(cè)量”鍵進(jìn)行測(cè)量,測(cè)量完成后,儀器自動(dòng)顯示樣品中六價(jià)鉻濃度值X(mg/kg。

重金屬檢測(cè)方法

1.試劑配置

    重金屬試劑(一)

    重金屬試劑(二)

重金屬試劑(三):加少量蒸餾水溶解,定容于100ml容量瓶

重金屬試劑(四):加少量蒸餾水溶解,定容于100ml容量瓶

注意:所有試劑均需避光、低溫(冰箱4℃)保存!重金屬試劑(一)、 重金屬試劑(二)有腐蝕性。

 

2.樣品處理

操作步驟

③ 將待測(cè)的糧食、蔬菜、水果類(lèi)樣品洗凈晾干,碾碎,混勻備用。禽蛋、水產(chǎn)等洗凈、晾干,取可食部分,混勻備用。

④ 取經(jīng)過(guò)預(yù)處理的均勻樣品1.0g于哈希管中,加入2mL重金屬試劑(一),2mL重金屬試劑(二),4ml蒸餾水,輕輕搖勻,蓋緊上蓋,放入超聲波提取儀中提取10分鐘,取出哈希管待自然冷卻后,打開(kāi)上蓋,過(guò)濾將溶液移入10ml比色管中,加重金屬試劑(四)調(diào)節(jié)溶液PH=9,加水至刻度,此為待測(cè)溶液。

3.對(duì)照測(cè)試

取10ml蒸餾水于比色管內(nèi),加入1ml重金屬試劑(三),混勻,放置10min后,轉(zhuǎn)入1cm比色皿,放入儀器相應(yīng)比色池中,按操作指示面板區(qū)的“對(duì)照”鍵進(jìn)行對(duì)照,對(duì)照完成后,儀器會(huì)自動(dòng)記錄對(duì)照結(jié)果,并在顯示屏下方顯示為“對(duì)照測(cè)量完成”。

4.樣品測(cè)定

取待測(cè)溶液,加蒸餾水稀釋至刻度,再向比色管內(nèi)中加入1ml重金屬試劑(三),混勻,放置10min后,轉(zhuǎn)入1cm比色皿,放入已經(jīng)做過(guò)對(duì)照的儀器通道中按操作提示面板區(qū)的“測(cè)量”鍵進(jìn)行測(cè)量,測(cè)量完成后,儀器自動(dòng)顯示樣品中重金屬濃度值X(mg/kg

二氧化硫檢測(cè)方法

1. 試劑配置

     二氧化硫試劑(一):加蒸餾水溶解,定容于500ml容量瓶

     二氧化硫試劑(二):加蒸餾水溶解,定容于50ml容量瓶

     二氧化硫試劑(三)

     二氧化硫試劑(四):加蒸餾水溶解,定容于50ml容量瓶

     二氧化硫試劑(五):將兩種二氧化硫試劑(五)混合,用熱水溶解,冷卻后定容于50ml容量瓶

     二氧化硫試劑(六):將二氧化硫試劑(六)溶解定容于50ml容量瓶中,取出20ml于100ml容量瓶中,滴加二氧化硫試劑(六)混勻使溶液由紅變黃,加水至刻度

     二氧化硫試劑(七):加蒸餾水溶解,定容于50ml容量瓶

     二氧化硫試劑(八)

注意:所有試劑均需避光、低溫(冰箱4℃)保存!二氧化硫試劑(一)有毒,二氧化硫試劑(七)、二氧化硫試劑(八)有腐蝕性。

2. 樣品處理

2.1  水溶性固體樣如白砂糖稱(chēng)取1.0g,用少量水溶解,置于10ml比色管中,加入0.4ml二氧化硫試劑(七),5分鐘后加入0.4ml二氧化硫試劑(八),然后加入2ml二氧化硫試劑(一),加水至刻度,混勻,此為待測(cè)溶液。

2.2  其他固體樣如餅干、粉絲稱(chēng)取1.0g研磨均勻的試樣,以少量水潤(rùn)濕并移入10ml比色管中,加入2ml二氧化硫試劑(一),浸泡4小時(shí)以上,若上層溶液不澄清可加入二氧化硫試劑(四)及二氧化硫試劑(五)各0.25ml,混勻,過(guò)濾,加水至刻度,此為待測(cè)溶液。

2.3  液體試樣如葡萄酒可直接吸取1mL,置于10ml比色管中,用少量水稀釋?zhuān)尤?ml二氧化硫試劑(一),搖勻,zui后加水至刻度,混勻,此為待測(cè)溶液。

3. 空白

取一支干凈的10mL比色管,準(zhǔn)確加入二氧化硫試劑(一)10ml, 1ml二氧化硫試劑(二),1ml二氧化硫試劑(三)及1ml二氧化硫試劑(六),混勻,放置20分鐘后,轉(zhuǎn)入1cm比色皿,放入儀器相應(yīng)比色池中,按操作指示面板區(qū)的“對(duì)照”鍵進(jìn)行對(duì)照,對(duì)照完成后,儀器會(huì)自動(dòng)記錄對(duì)照結(jié)果,并在顯示屏下方顯示為“對(duì)照測(cè)量完成”。

4. 測(cè)量

取待測(cè)溶液5ml于10mL比色管中,加入二氧化硫試劑(一)至10ml刻度,再加入1ml二氧化硫試劑(二),1ml二氧化硫試劑(三)及1ml二氧化硫試劑(六),混勻,放置20分鐘后,轉(zhuǎn)入1cm比色皿,放入已經(jīng)做過(guò)對(duì)照的儀器通道中按操作提示面板區(qū)的“測(cè)量”鍵進(jìn)行測(cè)量,測(cè)量完成后,儀器自動(dòng)顯示樣品中二氧化硫濃度值X(mg/kg。

備注:本儀器在室溫20°左右測(cè)量zui準(zhǔn)確。

 


附錄1  常見(jiàn)故障及原因

如果操作不當(dāng),相應(yīng)的會(huì)出現(xiàn)下列出錯(cuò)提示信息。都可按

取消返回。

下表中若未說(shuō)明生產(chǎn)問(wèn)題的原因,則與錯(cuò)誤提示信息相同。

 

錯(cuò)誤提示信息

產(chǎn)生問(wèn)題原因

對(duì)照測(cè)試錯(cuò)誤

酶的活性不高;溫度太低

查詢(xún)單號(hào)輸入錯(cuò)誤

查詢(xún)單號(hào)輸入的數(shù)據(jù)大于總數(shù)據(jù)量

 

附錄2  各物質(zhì)*

檢測(cè)指標(biāo)

品名

*mg/kg

農(nóng)藥殘留

蔬菜、水果

≤50%

甲醛

水發(fā)產(chǎn)品

≤10

水產(chǎn)品

不得檢出

零食

不得添加

大麥粉

≤24

小麥粉

≤14

綠豆粉

≤2

棉白糖

≤7

白砂糖

≤4

紅糖

≤3

腐竹

≤6

粉絲

≤1

鱈魚(yú)肉

≤48

吊白塊

面粉、米粉、豆制品

不得檢出

雙氧水

水發(fā)品、肉制品、干果、椰果

不得檢出

亞硝酸鹽

食鹽、牛乳粉

≤2

鮮肉、鮮魚(yú)、糧食

≤3

蔬菜

≤4

鮮蛋類(lèi)

≤5

香腸、臘腸、香肚、腌菜、火腿

≤20

肉制品、火腿腸、灌腸

≤30

肉罐頭

≤50

西式火腿、罐頭

≤70

六價(jià)鉻

糧食、蔬菜、水果、皮蛋、鹽蛋

不得檢出

重金屬

糧食、蔬菜、水果、皮蛋、鹽蛋

不得檢出

二氧化硫

銀耳、蓮子、龍眼、荔枝、蝦仁、米粉、豆芽、生姜

不得檢出

白糖

≤50

竹筍、蘑菇及罐頭

≤50

薯類(lèi)淀粉

≤30

葡萄、黑加侖濃縮汁

≤50

果汁濃漿

≤15

食糖、餅干、粉絲

≤100

發(fā)酵酒、葡萄酒、果酒

≤50

嬰幼兒鐵強(qiáng)化糖果

≤50

蜜餞、果脯

≤500

 

 

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