紫外檢測器在液相色譜儀檢測中的應(yīng)用

    紫外檢測器是液相色譜儀中應(yīng)用zui廣泛的檢測器，當(dāng)檢測波長范圍包括可見光時(shí)，又稱為紫外-可見檢測器。紫外吸收檢測器不僅靈敏度高、噪音低、線性范圍寬、有較好的選擇性，而且對(duì)環(huán)境溫度、流動(dòng)相組成變化和流速波動(dòng)不太敏感，因此可用于對(duì)光吸收小、消光系數(shù)低的物質(zhì)進(jìn)行微量分析。既可用于等度洗脫，也可用于梯度洗脫。紫外檢測器對(duì)流速和溫度均不敏感，可于制備色譜。其中要注意流動(dòng)相中各種溶劑的紫外吸收截止波長，如果溶劑中含有吸光雜質(zhì)，則會(huì)提高背景噪音，降低靈敏度。此外，梯度洗脫時(shí)，還會(huì)產(chǎn)生漂移。

    紫外檢測器的工作原理是：當(dāng)一束單色光透過流動(dòng)池時(shí)，若流動(dòng)相不吸收光，則吸收度A與吸光組分的濃度C和流動(dòng)池的光徑長度L成正比?？捎霉奖硎緸椋?/span>A＝lg＝lg＝ECL（式中I0為入射光強(qiáng)度，I為透射光強(qiáng)度，T為透光率，E為吸收系數(shù)）。其依據(jù)是光吸收定律，從光源發(fā)出的光經(jīng)狹縫、濾光片、樣品池到光電培增管上，使束由于樣品濃度不同所引起光強(qiáng)的變化轉(zhuǎn)換成光電流的變化，此光電流經(jīng)放大器輸入到對(duì)數(shù)轉(zhuǎn)換器，使透光率T轉(zhuǎn)成A輸出。根據(jù)上式就知測出了A，就知樣品濃度C。若從放大器直接輸入記錄儀，繪出的是樣品透光率T變化的圖譜，若從對(duì)數(shù)轉(zhuǎn)換器輸入到記錄儀繪出的是樣品光密度A變化的圖譜。

    紫外檢測器分為固定波長檢測器、可變波長檢測器和光電二極管陣列檢測器。按光路系統(tǒng)來分，紫外檢測器可分為單光路和雙光路兩種。可變波長檢測器又可分單波長（單通道）檢測器和雙波長（雙通道）檢測器。PDAD是80年代出現(xiàn)的一種光學(xué)多通道檢測器，它可以對(duì)每個(gè)洗脫組分進(jìn)行光譜掃描，經(jīng)計(jì)算機(jī)處理后，得到光譜和色譜結(jié)合的三維圖譜。其中吸收光譜用于定性（確證是否是單一純物質(zhì)），色譜用于定量。常用于復(fù)雜樣品（如生物樣品、中草藥）的定性定量分析。

    在使用紫外檢測器分析檢測注意事項(xiàng)以下以保證檢測器的靈敏度。

   1. 氘燈的光強(qiáng)受溫度和電壓影響較大，建議在恒溫室內(nèi)工作或者在冰庫里工作；

   2. T調(diào)零生產(chǎn)時(shí)機(jī)內(nèi)已校準(zhǔn)，當(dāng)更換光電培增管后，需重新校準(zhǔn)；

   3. 氘燈壽命可達(dá)數(shù)千小時(shí)，若發(fā)現(xiàn)記錄儀不能調(diào)到10mV，且基線一直往小的方向漂移要考慮換燈。如氘燈不亮可再按一次電源開關(guān)，氘燈就會(huì)即亮，光電培增管壽命在數(shù)千小時(shí)以上。注意開機(jī)工作時(shí)不得拿出樣品池架，以免強(qiáng)光照射光電培增管造成損壞。氘燈發(fā)光區(qū)域和光電培增管光陰極窗口沾污時(shí)，可用干凈棉芯酒精擦拭干凈。

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