上海奧陸科技為更好的服務(wù)各科研單位,對(duì)細(xì)胞產(chǎn)品收貨之后出現(xiàn)的異常情況進(jìn)行了整理,給廣大科研工作者能做出處理參考,有任何問(wèn)題歡迎隨時(shí)致電本公司!
注:細(xì)胞經(jīng)路途運(yùn)輸,出現(xiàn)問(wèn)題無(wú)法避免,無(wú)法*確??蛻?hù)在收到細(xì)胞株時(shí)的狀態(tài)是無(wú)異常,希望廣大科研老師理解!
以下是客戶(hù)收到細(xì)胞株之后的問(wèn)題反饋與解答:
客戶(hù)問(wèn)題1:
剛剛收到細(xì)胞,貼壁少,密度低,狀態(tài)不好
回答1:
因?yàn)檫\(yùn)輸過(guò)程的影響,細(xì)胞出現(xiàn)貼壁松動(dòng)、脫落,是正常的。處理建議:把細(xì)胞放回培養(yǎng)箱培養(yǎng),更換15%血清,脫落下來(lái)的細(xì)胞離心后種在新的培養(yǎng)瓶里面,也是用15%血清,一般養(yǎng)3-4天左右,傳1-2代后,細(xì)胞即可逐漸恢復(fù)。
客戶(hù)問(wèn)題2:
消化傳代后,細(xì)胞死亡多,不貼壁
回答2:
這種情況,基本上是客戶(hù)在消化的時(shí)候,胰酶消化過(guò)度,造成細(xì)胞較嚴(yán)重的損傷。處理建議:根據(jù)胰酶實(shí)際使用效果,摸索一個(gè)*消化時(shí)間,嚴(yán)控消化過(guò)度;如果已經(jīng)操作造成消化過(guò)度,把血清調(diào)高到15%,讓存留的貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)起來(lái),期間不要頻繁換液,維持在3-4天更換一次培養(yǎng)基即可,等細(xì)胞密度超過(guò)50%以后,再隔天換液
客戶(hù)問(wèn)題3:
細(xì)胞培養(yǎng)中有黑點(diǎn)或者亮圓點(diǎn)
回答3:
要客戶(hù)首先排除是否污染,如果這些黑點(diǎn)或者亮點(diǎn)是污染物,那么培養(yǎng)基會(huì)在1-2天內(nèi)變渾濁,同時(shí)鏡下可觀(guān)察到這些黑點(diǎn)或者亮點(diǎn)呈爆發(fā)式生長(zhǎng)。如果培養(yǎng)基不會(huì)渾濁排除污染,這些黑點(diǎn)就是細(xì)胞死亡后的碎片殘?jiān)?,用PBS可以把大部分清洗掉。如果PBS清洗后還是有較多附著在瓶底的碎片殘?jiān)?,建議客戶(hù)消化細(xì)胞轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)瓶培養(yǎng)
客戶(hù)問(wèn)題4:
細(xì)胞生長(zhǎng)緩慢,增殖生長(zhǎng)的同時(shí),有較多漂浮死亡的細(xì)胞
回答4:
此情況常見(jiàn)于客戶(hù)對(duì)該株細(xì)胞的整個(gè)培養(yǎng)體系不是*所致,要客戶(hù)檢查培養(yǎng)基成分,血清(是否為GIBCO進(jìn)口胎牛血清,濃度調(diào)高到15%),培養(yǎng)箱的二氧化碳濃度,同時(shí)要客戶(hù)檢測(cè)下培養(yǎng)基的PH值是否出現(xiàn)了較大的偏離(PH值的偏離zui不容易察覺(jué),但是對(duì)細(xì)胞的影響很大)
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