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迪馬科技水中抗生素檢測解決方案

來源:北京迪科馬科技有限公司(迪馬科技)   2015年06月30日 15:26  
 據(jù)*,全國主要河流,黃浦江、長江入??凇⒅榻榷急粰z出了抗生素。其中,珠江廣州段受抗生素污染非常嚴(yán)重,脫水紅霉素、磺胺嘧啶、磺胺二甲基嘧啶的含量分別為460納克/升、209納克/升和184納克/升,遠(yuǎn)遠(yuǎn)高出了歐美發(fā)達(dá)國家河流中100納克/升以下的含量。此外,南京、安慶、銅陵、阜陽、蚌埠等部分地區(qū)的居民自來水中也被檢出抗生素。

據(jù)專家解釋,目前,國家對自來水內(nèi)的抗生素含量并無專業(yè)手段進(jìn)行檢測,現(xiàn)行國家頒布的生活飲用水水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)106項(xiàng)指標(biāo)中也無抗生素指標(biāo)檢測標(biāo)準(zhǔn),該項(xiàng)指標(biāo)的檢測較為困難。

迪馬科技一直致力于為水質(zhì)檢測工作保駕護(hù)航,對于地表水及生活飲用水檢測可提供全面詳盡的解決方案。對于水中抗生素的檢測,迪馬科技推出多種抗生素檢測方案,詳細(xì)信息如下:

一、      水中磺胺類藥物的檢測(SPE-HPLC方法)

二、      水中氯霉素的檢測(SPE-HPLC方法)

三、      水中喹諾酮類藥物的檢測(SPE-HPLC方法)

四、      水中氯霉素、磺胺類、四環(huán)素類、脫水紅霉素以及喹諾酮類等14種抗生素的測定(SPE-UHPLC/MS/MS方法)

水中磺胺類藥物的檢測

1、適用范圍

本方案適用于水中磺胺嘧啶、磺胺甲基嘧啶、磺胺吡啶、磺胺二甲嘧啶和磺胺甲氧噠嗪的檢測,方法檢出限是0.5 μg /L。

2、提取

(1) 水樣以0.45 μm濾膜除去懸浮物。

(2) 取200 mL水樣和100 mL Mcllvaine緩沖液*,混勻,準(zhǔn)備凈化。

*Mcllvaine緩沖液(pH 4.0):稱取磷酸氫二鈉(Na2HPO4·12H2O)27.6 g、檸檬酸(C6H8O7·H2O)12.9 g、乙二胺四乙酸二鈉鹽37.2 g,用水溶解后稀釋并定容至1000 mL。

3、凈化——ProElut PLS 150 mg/6 mL(Cat.# 68004)

a活  化:

依次加入5 mL甲醇、5 mL水,流出液棄去;

b上  樣:

加入待凈化液,流出液棄去;

c淋  洗:

加入10 mL 水,流出液棄去,推干小柱;

d洗  脫:

加入5 mL甲醇,收集流出液;

e重新溶解:

將流出液在35 ℃下減壓蒸至近干,用流動相定容至1 mL,供HPLC分析。

4、色譜條件

色譜柱:Diamonsil C18(2), 250 mm × 4.6 mm, 5 μm(Cat.# 99603)

流  速:1.0 mL/min    

進(jìn)樣量:20 μL  

柱  溫:35 ℃

檢測器:UV 270 nm

流動相: A:乙腈, B: 2%乙酸水溶液

梯度程序

t/min

0

17

18

25

A/%

12

19

12

12

B/%

88

81

88

88

5、添加回收結(jié)果

水樣中磺胺類藥物的HPLC檢測添加回收結(jié)果

化合物

添加水平(μg/L)

回收率(%)

磺胺嘧啶

2.0

87.46

磺胺吡啶

2.0

80.42

磺胺甲基嘧啶

2.0

80.03

磺胺二甲基嘧啶

2.0

70.52

磺胺甲氧噠嗪

2.0

75.70

1.jpg

2.jpg

3.jpg

水中氯霉素的檢測

1、適用范圍

本方案適用于水中氯霉素的檢測,方法檢出限是1.0 μg /L。

2、提取

(1) 水樣以0.45 μm濾膜除去懸浮物。

(2) 取200 mL水樣和100 mL Mcllvaine緩沖液*,混勻,準(zhǔn)備凈化。

*Mcllvaine緩沖液(pH 4.0):稱取磷酸氫二鈉(Na2HPO4·12H2O)27.6 g、檸檬酸(C6H8O7·H2O)12.9 g、乙二胺四乙酸二鈉鹽37.2 g,用水溶解后稀釋并定容至1000 mL。

3、凈化——ProElut PLS 150 mg/6 mL(Cat.# 68004)

a活    化:

依次加入5 mL甲醇、5 mL水,流出液棄去;

b上    樣:

加入待凈化液,流出液棄去;

c淋    洗:

加入10 mL 水,流出液棄去,推干小柱;

d洗    脫:

加入5 mL甲醇,收集流出液;

e重新溶解:

將流出液在35 ℃下減壓蒸至近干,用流動相定容至1 mL,供HPLC分析。

4、色譜條件

色譜柱:Diamonsil C18(2), 250 mm × 4.6 mm, 5 μm(Cat.# 99603)

流  速:1.0 mL/min   

進(jìn)樣量:20 μL  

柱  溫:30 ℃

檢測器:UV 280 nm

流動相:甲醇:水=40:60

5、添加回收結(jié)果

水樣中氯霉素的HPLC檢測添加回收結(jié)果

化合物

添加水平(μg/L)

回收率(%)

氯霉素

2.5

91.43

4.jpg

5.jpg

水中喹諾酮類藥物的測定

1、適用范圍

本方案適用于水中馬波沙星、恩諾沙星、雙氟沙星和沙拉沙星的檢測,方法檢出限是0.5 μg /L。

2、提取

(1) 水樣以0.45 μm濾膜除去懸浮物。

(2) 取200 mL水樣和100 mL Mcllvaine緩沖液*,混勻,準(zhǔn)備凈化。

*Mcllvaine緩沖液(pH 4.0):稱取磷酸氫二鈉(Na2HPO4·12H2O)27.6 g、檸檬酸(C6H8O7·H2O)12.9 g、乙二胺四乙酸二鈉鹽37.2 g,用水溶解后稀釋并定容至1000 mL。

3、凈化——ProElut PLS 150 mg/6 mL(Cat.# 68004)

a活    化:

依次加入5 mL甲醇、5 mL水,流出液棄去;

b上    樣:

加入待凈化液,流出液棄去;

c淋    洗:

加入10 mL 水,流出液棄去,推干小柱;

d洗    脫:

加入5 mL甲醇,收集流出液;

e重新溶解:

將流出液在35 ℃下減壓蒸至近干,用流動相定容至1 mL,供HPLC分析。

4、色譜條件

色譜柱:Diamonsil C18(2), 250 mm × 4.6 mm, 5 μm(Cat.# 99603)

流  速:1.0 mL/min   

進(jìn)樣量:20 μL  

柱  溫:35 ℃

檢測器:UV 300 nm

流動相:A.0.2%磷酸水溶液,B.甲醇; A:B=70:30

5、添加回收結(jié)果

水樣中喹諾酮類藥物的HPLC檢測添加回收結(jié)果

化合物

添加水平(μg/L)

回收率(%)

馬波沙星

5.0

86.80

恩諾沙星

5.0

86.73

雙氟沙星

5.0

90.13

沙拉沙星

5.0

80.10

6.jpg

7.jpg

8.jpg

水中氯霉素、磺胺類、四環(huán)素類、脫水紅霉素以及喹諾酮類等14種抗生素的測定

1、適用范圍

適用于水中氯霉素、磺胺類、四環(huán)素類、脫水紅霉素以及喹諾酮類等抗生素檢測,氯霉素的檢出限是0.1 ng /L,磺胺嘧啶的檢出限是0.8 ng /L,磺胺甲基嘧啶的檢出限是1.2ng /L,磺胺吡啶的檢出限是0.9 ng /L,磺胺二甲嘧啶的檢出限是2.3 ng /L,磺胺甲氧噠嗪的檢出限是0.6 ng /L,土霉素的檢出限是29 ng /L,金霉素的檢出限是35 ng /L,四環(huán)素的檢出限是20 ng /L,脫水紅霉素的檢出限是1.1 ng /L,馬波沙星的檢出限是14.2 ng /L,沙拉沙星的檢出限是13.0 ng /L,恩諾沙星的檢出限是4.8 ng /L,雙氟沙星的檢出限是8.8 ng /L。

2、提取

(1) 水樣以0.45 μm濾膜除去懸浮物。

(2) 取200 mL水樣和100 mL Mcllvaine緩沖液*,混勻,準(zhǔn)備凈化。

*Mcllvaine緩沖液(pH 4.0):稱取磷酸氫二鈉(Na2HPO4·12H2O)27.6 g、檸檬酸(C6H8O7·H2O)12.9 g、乙二胺四乙酸二鈉鹽37.2 g,用水溶解后稀釋并定容至1000 mL。

3、凈化——ProElut PLS 150 mg/6 mL(Cat.# 68004)

a活    化:

依次加入5 mL甲醇、5 mL水,流出液棄去;

b上    樣:

加入待凈化液,流出液棄去;

c淋    洗:

加入10 mL 水,流出液棄去,推干小柱;

d洗    脫:

加入5 mL甲醇,收集流出液;

e重新溶解:

將流出液在35 ℃下減壓蒸至近干,用水定容至1 mL,供HPLC分析。

4、色譜條件

4.1 液相條件

4.1.1 氯霉素液相條件

色譜柱:Endeavorsil C18, 100 mm × 2.1 mm, 1.8 μm(Cat.# 87003)

流  速:0.2 mL/min   

進(jìn)樣量:5 μL  

柱  溫:40 ℃

流動相:A:10 mmol/L乙酸銨溶液,B:乙腈

梯度設(shè)置

時間/Min.

0

4

4.5

6

6.5

12

A(%)

20

50

90

90

20

20

B(%)

80

50

10

10

80

80

4.1.2  其它抗生素液相條件

色譜柱:Endeavorsil C18, 100 mm × 2.1 mm, 1.8 μm(Cat.# 87003)

流  速:0.2 mL/min   

進(jìn)樣量:5 μL  

柱  溫:35 ℃

流動相:A:0.4%甲酸水,B:甲醇-乙腈-甲酸(40:60:0.4)

梯度設(shè)置

時間/Min.

0

4.5

5.5

7.5

8

15

A(%)

80

80

0

0

80

80

B(%)

20

20

100

100

20

20

4.2 質(zhì)譜條件

4.2.1 氯霉素質(zhì)譜條件

電離模式:

ESI

掃描方式:

負(fù)離子掃描

檢測方式:

多反應(yīng)監(jiān)測

電噴霧電壓:

-4500 V

霧化氣壓力:

50 psi

輔助氣壓力:

50 psi

氣簾氣壓力:

20 psi

離子源溫度:

500 ℃

定性離子對、定量離子對、碰撞氣能量及去簇電壓見下表

藥物名稱

定性離子對

(m/z)

(母離子/子離子)

定量離子對

(m/z)

(母離子/子離子)

碰撞氣能量/ V

去簇電壓/ V

氯霉素

321.0/151.8

321.0/151.8

-24

-80

321.0/256.9

-15

4.2.2 其它抗生素質(zhì)譜條件

電離模式:

ESI

掃描方式:

正離子掃描

檢測方式:

多反應(yīng)監(jiān)測

電噴霧電壓:

5500 V

霧化氣壓力:

50 psi

輔助氣壓力:

50 psi

氣簾氣壓力:

20 psi

離子源溫度:

500 ℃

定性離子對、定量離子對、碰撞氣能量及去簇電壓見下表

藥物名稱

定性離子對

定量離子對

碰撞氣能量/ V

去簇電壓/ V

(m/z)

(m/z)

(母離子/子離子)

(母離子/子離子)

馬波沙星

363.2/320.2

363.2/320.2

24

82

363.2/277.4

24

沙拉沙星

386.2/342.2

386.2/342.2

24

92

386.2/299.2

35

雙氟沙星

400.2/356.2

400.2/356.2

27

100

400.2/299.3

37

恩諾沙星

360.3/316.1

360.3/316.1

26

80

360.3/245.2

34

磺胺嘧啶

251.1/156.0

251.1/156.0

21

60

251.1/184.9

28

磺胺甲基嘧啶

265.1/156.0

265.1/156.0

22

82

265.1/172.1

22

磺胺吡啶

250.2/156.1

250.2/156.1

20

53

250.2/184.0

21

磺胺二甲嘧啶

279.1/186.1

279.1/186.1

23

54

279.1/156.1

22

磺胺甲氧噠嗪

281.0/156.1

281.0/156.1

22

65

281.0/215.1

22

四環(huán)素

445.2/410.1

445.2/410.1

23

80

445.2/154.0

36

金霉素

479.2/444.4

479.2/444.4

29

97

479.2/462.4

22

土霉素

461.2/425.9

461.2/425.9

25

80

461.2/443.3

16

脫水紅霉素

716.5/558.4

716.5/558.4

19

80

716.5/158.3

40

5、添加回收結(jié)果

水中14種抗生素的LC-MS/MS檢測添加回收結(jié)果

藥物名稱

添加水平(ng/L)

回收率(%)

馬波沙星

50.0

80.6

沙拉沙星

50.0

73.0

雙氟沙星

50.0

75.6

恩諾沙星

50.0

87.9

磺胺嘧啶

50.0

78.4

磺胺甲基嘧啶

50.0

80.6

磺胺吡啶

50.0

74.9

磺胺二甲嘧啶

50.0

92.5

磺胺甲氧噠嗪

50.0

70.4

四環(huán)素

50.0

86.7

金霉素

50.0

72.6

土霉素

50.0

95.0

脫水紅霉素

50.0

93.0

氯霉素

50.0

87.9

9.jpg

10.jpg

4-3.jpg

11.jpg

12.jpg

13.jpg

14.jpg

15.jpg

4-9.jpg

16.jpg

17.jpg

18.jpg

19.jpg

20.jpg

水中抗生素藥物檢測相關(guān)產(chǎn)品信息

貨號

名稱

規(guī)格

樣品前處理

68004

親水親酯平衡萃取柱 ProElut PLS

150 mg/6 mL, 30/pkg

244358

12管防交叉污染真空SPE萃取裝置

12位

99017

大容量采樣管

(含1,3,6mL柱管通用連接器)

4/pk

4812

60 mL 空柱管

100/pk

4803

1,3,6 mL柱管通用連接器

15/pk

4806

考克(控制流量)

15/pk

99011

真空/正壓兩用泵,無油

1/pk

99013

抽濾瓶套裝

(包括硅橡膠管2米,2L抽濾瓶及橡膠塞)

1/pk

30039

FitMax針頭式過濾器 Nylon

13 mm,0.22 μm 100/pk

30040

FitMax針頭式過濾器 Nylon

13 mm,0.45 μm 100/pk

色譜柱及保護(hù)柱

87003

UHPLC柱 Endeavorsil C18

100 × 2.1 mm, 1.8 μm

99603

反相液相色譜柱Diamonsil C18(2)

250 × 4.6 mm ID, 5 μm

6201

EasyGuard C18 保護(hù)柱套裝

10 × 4.0 mm

2個柱芯+1個柱套

標(biāo)準(zhǔn)品

12-N-13250-250MG

磺胺吡啶[144-83-2]

250 mg

56-35033-100MG

磺胺嘧啶[68-35-9]

100 mg

12-N-13244-250MG

磺胺甲基嘧啶[127-79-7]

250 mg

12-N-13245-250MG

磺胺二甲基嘧啶[57-68-1]

250 mg

56-46858-250MG-R

磺胺甲氧噠嗪[80-35-3]

250 mg

56-31667-250MG

氯霉素[56-75-7]

250 mg

55-34039-100MG

馬波沙星[115550-35-1]

100 mg

56-17849-5G-F

恩諾沙星[93106-60-6]

5 g

56-33984-100MG-R

雙氟沙星鹽酸鹽[91296-86-5]

100 mg

50D-405234-10MG

沙拉沙星[98105-99-8]

10 mg

55-31741-250MG

四環(huán)素鹽酸鹽[64-75-5]

250 mg

56-PHR1520-500MG

金霉素鹽酸鹽[64-72-2]

500 mg

46359

土霉素鹽酸鹽[2058-46-0]

100 mg

56-19448-2MG

脫水紅霉素A[23893-13-2]

2 mg

HPLC溶劑Ÿ緩沖鹽Ÿ離子對試劑

50102

甲醇 HPLC級

4 L

50101

乙腈 HPLC級

4 L

50144

甲酸 HPLC級

50 mL

50132

乙酸 HPLC級

50 mL

50133

磷酸 HPLC級

50 mL

50138

乙酸銨 HPLC級

100 g

50158

磷酸氫二鈉 無水 HPLC級

100 g

通用色譜產(chǎn)品

52401A

瓶架/白色

50 孔

52401B

瓶架/藍(lán)色

50 孔

1034

樣品瓶(棕色/螺紋)

2 mL, 100/pk

1035

樣品瓶蓋/含墊(已經(jīng)組裝)

100/pk

H80465

HPLC 進(jìn)樣針

25 μL

紅色產(chǎn)品貨號#30039、#30040、#1034、#1035*

 

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