實(shí)驗(yàn)原理
在細(xì)胞核中,DNA是環(huán)狀附著在核基質(zhì)上,細(xì)胞裂解過程中,核基質(zhì)被溶解、抽提,DNA的結(jié)構(gòu)則未發(fā)生變化。如果DNA鏈上存在缺口,則使DNA超螺旋變的松弛,DNA環(huán)向外展,同時(shí)由于暴露了陰電荷,在電場(chǎng)力的作用下,松動(dòng)的DNA環(huán)向陽極遷移,但是由于這種松動(dòng)的DNA環(huán)一端仍附著于核DNA,其遷移距離受到限制,因此尾長并不總是真實(shí)反映鏈缺口的多少。實(shí)際應(yīng)當(dāng)依靠尾長與尾部的熒光強(qiáng)度同時(shí)來進(jìn)行分析。
鏡檢和分析:
1) 在熒光顯微鏡下觀察,綠光激發(fā)吸收濾片590nm。必要時(shí)照相記錄。
2) 記數(shù)觀察的細(xì)胞,記錄彗星細(xì)胞出現(xiàn)的頻率,用目鏡測(cè)微尺測(cè)頭長與全長,計(jì)算核DNA遷移距離。
使用兩層凝膠法,經(jīng)裂解、DNA解旋、電泳和中和得到濕瓊脂糖凝膠片。將濕瓊脂糖凝膠片置于冰冷無水乙醇中脫水10分鐘,后置于空氣中自發(fā)干燥。全部操作在采血后8小時(shí)內(nèi)完成,操作過程中注意避光。使用50μl 30μM的溴乙錠溶液染色、照相。使用單細(xì)胞凝膠電泳軟件分析所有照片,隨機(jī)測(cè)量100個(gè)以上細(xì)胞的尾長和olive尾矩,以尾長和olive尾矩的算術(shù)均數(shù)代表個(gè)體DNA損傷情況。
英文名稱 Homo sapiens (Human) 囊泡乙酰膽堿轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(VAChT)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48T/96T
英文名稱 Homo sapiens (Human) 囊泡單胺轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2(VMAT2)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48T/96T
英文名稱 Homo sapiens (Human) 耐氧化性能蛋白1(OXR1)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48T/96T
英文名稱 Homo sapiens (Human) 耐扭蛋白3A(TOR3A)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48T/96T
細(xì)胞英文名稱 Homo sapiens (Human) 耐扭蛋白2A(TOR2A)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48T/96T
英文名稱 Homo sapiens (Human) 耐扭蛋白1B(TOR1B)檢測(cè)試劑盒(酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)法) 規(guī)格: 48T/96T
相關(guān)產(chǎn)品
免責(zé)聲明
- 凡本網(wǎng)注明“來源:化工儀器網(wǎng)”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品,未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的,應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用,并注明“來源:化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者,本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任。
- 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來源(非化工儀器網(wǎng))的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網(wǎng)贊同其觀點(diǎn)和對(duì)其真實(shí)性負(fù)責(zé),不承擔(dān)此類作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體、網(wǎng)站或個(gè)人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時(shí),必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源,并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任。
- 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問題,請(qǐng)?jiān)谧髌钒l(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系,否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。