在農(nóng)藥殘留測試儀測試的幾個(gè)系統(tǒng)都是基于酶抑制,利用生物傳感器的原理有一些缺陷,環(huán)境和其他因素會導(dǎo)致酶活性的損失,造成假陽性的結(jié)果。其不可逆性也造成了生物傳感器無法多次使用,而使用有機(jī)磷水解酶制備的生物傳感器可以克服上述缺點(diǎn)。
有機(jī)磷水解酶能催化水解有機(jī)磷農(nóng)藥。其反應(yīng)機(jī)理如下:X 代表氧原子或硫原子,R 是烷氧基,R‘是烷氧基或苯基,Z 是苯氧基,巰基,氰基或鹵素原子。根據(jù)上面原理可以分別設(shè)計(jì)成電位型或電流型傳感器。有機(jī)磷農(nóng)藥在有機(jī)磷水解酶的作用下生成了酚和酸,酸又會電離產(chǎn)生氫離子,產(chǎn)生氫離子的濃度和有機(jī)磷農(nóng)藥的濃度具有相關(guān)性,這構(gòu)成了制作電位型酶電極的基礎(chǔ)。將含有機(jī)磷水解酶的牛血清白蛋白與戊二醛混合溶液鋪展在 pH 電極表面,干燥形成交聯(lián)的酶層,用滲析膜包裹住酶層形成酶電極,測定對氧磷、對硫磷的檢出限為 2 μmol/L.這類有機(jī)磷水解酶電位型生物傳感器制備簡單快速,選擇性好,是在線檢測和解毒過程控制的理想分析工具。如果產(chǎn)生的酚具有電化學(xué)活性,則可以設(shè)計(jì)成為電流型酶電極。
該反應(yīng)能夠檢測到 0.2μmol/L 對硝基磷酯,1μmol/L 甲基對硫磷。這種方法利用了酶的催化作用,而不是利用酶的抑制作用,簡單快速,適合在線檢測。酶抑制技術(shù)較為初應(yīng)用于臨床醫(yī)學(xué)分析,該技術(shù)用于農(nóng)藥殘留檢測始于 20 世紀(jì) 50 年代。酶抑制法是模擬生物的中毒機(jī)理,利用有機(jī)磷、氨基甲酸酯類農(nóng)藥專一性地抑制生物中樞和周圍神經(jīng)系統(tǒng)中膽堿酯酶活性其反應(yīng)原理為:
酶酶抑制法雖然有在室溫下穩(wěn)定不容易保存,不要具體農(nóng)藥定量技術(shù)問題,但對有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥的大多數(shù)操作簡單、快速檢測,靈敏度高,還需要**的儀器和設(shè)備,干擾因素少,穩(wěn)定的測定方法很容易掌握,結(jié)果優(yōu)勢越來越多的關(guān)注,該方法特別適于現(xiàn)場檢測及大量樣品篩選,克服了色譜法分析時(shí)間長的缺點(diǎn),具有較好的應(yīng)用前景。
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