牛β乳球蛋白(β-Lg)ELISA試劑盒　　

尊敬的客戶，感謝你選用本公司的產品。本產品適用于體外定量檢測牛血清、血漿或細胞培養(yǎng)上清液、組織等中天然和重組的β-Lg濃度。檢測其他特殊樣本請咨詢本公司。試劑盒僅供科研使用。 使用前請仔細閱讀說明書并檢查試劑盒組分。 如有疑問，請武漢新啟迪生物科技有限公司。 您將得到我們的服務。

本試劑盒采用雙抗體夾心法，雙抗體夾心原理，是基于要測試的抗原具有二價以上的特性，能識別包被抗體，同時能識別檢測抗體，具體過程如下：

1. 將特異性抗體與固相載體連接，形成固相抗體，洗滌除去未結合的抗體及雜質，并用無關蛋白封閉空余結合位點。
2. 加受檢標本使之與固相抗體接觸反應一段時間，讓標本中的抗原與固相載體上的抗體結合，形成固相抗原復合物。洗滌除去其他未結合的物質。
3. 加生物素標記抗體，使固相免疫復合物上的抗原與生物素標記抗體結合。*洗滌未結合的生物素標記抗體。此時固相載體上帶有的酶量與標本中受檢物質的量正相關。
4. 加辣根過氧化物酶標記親和素，使生物素標記抗體與辣根過氧化物酶標記的親和素結合。*洗滌未結合的酶標記物。此時固相載體上帶有的酶量與標本中受檢物質的量正相關。
5. 加入底物顯色，即可計算標本濃度。
6. 注：一個抗體分子上可以標記上若干個生物素分子，一個生物素分子可以結合一個辣根過氧化物酶標記的親和素，從而帶來了大量的辣根過氧化物酶結合到抗體上，比傳統(tǒng)的直接辣根過氧化物酶標記抗體具有更高的敏感性和放大效應。

【牛β-Lg酶聯(lián)免疫試劑盒檢測原理】

本實驗采用雙抗體夾心ELISA法。所提供的ELISA Kit是典型的夾心法酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒（ELISA）。預先包被的抗體為抗牛β-Lg單克隆抗體。檢測相抗體為多克隆抗體，經生物素（biotin）標記。樣品和生物素標記抗體先后加入酶標板孔反應后，PBS或TBS洗滌。隨后加入過氧化物酶標記的親和素反應；經過PBS或TBS的*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉化成藍色，并在酸的作用下轉化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的待測因子呈正相關。

【牛β-Lg酶聯(lián)免疫試劑盒檢測原理示意圖】

 *步            第二部

第三步            第四步

【試劑盒組成】

名稱                             96 Tests            48 Tests                     保存條件

1．牛β-Lg抗體包被板條                  8×12                  8×6                            4/-20℃

2．牛β-Lg標準品                             2 支（凍干）     1 支（凍干）            4/-20℃

3．濃縮生物素化牛β-Lg抗體           1支                     1 支                          4/-20℃

4．濃縮酶結合物(ABC)                     1支                     1 支                        4/-20℃

5. 酶結合物(ABC)稀釋液           1瓶             1瓶               4/-20℃

6．抗體稀釋液                    1瓶                     1 瓶                          4/-20℃

7．標準品稀釋液                  1瓶                     1 瓶                          4/-20℃

8．樣品稀釋液　                  1瓶                     1 瓶                          4/-20℃

9．濃縮洗滌液                                  1 瓶（25×）       1 瓶（25×）              4/-20℃

10．顯色劑A                                   1 瓶                   1 瓶 (避光)               4/-20℃

11．顯色劑B                                   1 瓶            1 瓶                    4/-20℃

12．終止液                                      1 瓶            1 瓶                          4/-20℃

13．說明書                                     1 份            1 份                          室溫

【試驗所需自備試驗設備和器材】

1. 酶標儀(450nm檢測波長濾光片，570nm或630nm校正波長濾光片) 。
2. 洗板機（可調注液量，保證每孔350μl洗液而不溢出）。
3. 超凈工作臺，生物安全柜，通風柜。
4. 高精度單道加液器（量程為0.5-10μl, 2-20μl,20-200μl,200-1000μl).
5. 高精度多道加液器（8道或12道，量程為50-300μl).
6. 37℃恒溫箱。
7. 低溫離心機。
8. 電冰箱（4℃,-20℃,-86℃）.
9. 分析天平。
10. 剪刀，鑷子，鉗子等。
11. 漩渦混合儀，低頻振蕩器等。

【試驗所需自備試驗耗材及試劑】

1. 離心管（容量為1.5ml，5ml等）。
2. 一次性吸頭（量程為0.5-10μl, 2-20μl,20-200μl,200-1000μl）.
3. 純凈水或蒸餾水。
4. 坐標紙。
5. 吸水紙。
6. EDTA，枸櫞酸鈉，肝素

【標本收集注意事項】

1. 收集血液的試管應為一次性的無熱原，無內毒素試管。
2. 血清和血漿避免使用溶血，高血脂標本。
3. 標本應清澈透明，懸浮物應離心去除。
4. 標本收集后若不及時檢測，需按一次使用量分裝，凍存于-20℃，-80℃電冰箱內，避免反復凍融。 
5. 可根據(jù)標本的實際情況，做適當倍數(shù)稀釋(建議做預實驗，以確定稀釋倍數(shù)) 。
6. 收集標本，盡量做到雙份的用量，避免一次實驗失敗，重復實驗時標本缺失，從而耽誤實驗進程。
7. 收集標本時，應該做好防護措施（比如戴手套，口罩，護目鏡等），認為所有標本都具有一定的潛在危險性。
8. 樣本處理應該在生物安全柜里面，并且正確使用生物安全柜。