做全血DNA提取實(shí)驗(yàn)時(shí)應(yīng)該怎樣選擇抗凝劑
在醫(yī)學(xué)實(shí)驗(yàn)中常需動(dòng)物的全身抗凝,采出的全血或血漿有的也需加入適當(dāng)?shù)目鼓齽┛鼓?。?duì)抗凝劑的要求是:用量少、溶解度大、不帶進(jìn)干擾實(shí)驗(yàn)的雜質(zhì)。
1.從全血中制備基因組DNA,ACD做為抗凝劑要優(yōu)于EDTA,因?yàn)樗幽鼙4娓叻肿淤|(zhì)量的DNA,然而,血樣常常被收集于用定量EDTA作為抗凝劑的小管中。
2.在大多數(shù)美國的醫(yī)院中,收集血樣的小管均用顏色標(biāo)明是否含有抗凝劑,紫色頂管蓋的小管一般含有抗凝劑,通常是EDTA的干粉。黃色頂蓋的小管不含抗凝劑。
3.在分子克隆實(shí)驗(yàn)中,前者一般用于收集血樣用于制備基因組的DNA,后者用于收集血樣作為用EB病毒的永生化淋巴細(xì)胞的來源。這些永生化的細(xì)胞可以作為可更新的來源來制備大量的DNA以備后用,如進(jìn)行遺傳學(xué)的研究等等!
注意事項(xiàng):血液可以在0度條件下保存一周左右,或者是零下70度條件下無限期保存!做全血DNA提取的時(shí)候抗凝劑不能采用肝素!因?yàn)楦嗡厥蔷酆厦告準(zhǔn)椒磻?yīng)的抑制劑!
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