細(xì)胞常規(guī)培養(yǎng)傳代流程

來源：上海極威生物科技有限公司 2015年11月04日 20:45

（請(qǐng)嚴(yán)格遵照無菌操作）

1．吸出原培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基，PBS緩沖液潤(rùn)洗細(xì)胞兩次，加2~3

ml0.25%胰酶進(jìn)行消化細(xì)胞（注意把握消化時(shí)間，通?？刂圃?/SPAN>

1-2min）

2．鏡下觀察消化情況，在細(xì)胞邊緣縮小，貼壁松動(dòng)時(shí)（不建議消

化到細(xì)胞漂?。┤サ粢让?，加6~8ml *培養(yǎng)基，輕輕吹打細(xì)胞

層，盡量把細(xì)胞層吹落，吹散
3．取部分細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移到新的培養(yǎng)皿/瓶中，添加適當(dāng)?shù)?培

養(yǎng)基，把細(xì)胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)

4．注意培養(yǎng)基PH值變化情況，定期換液（每周2-3次），待細(xì)胞

密度達(dá)到80%以后重復(fù)1項(xiàng)操作或者凍存

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