分子診斷,核酸污染,DNA,RNA,PCR,DNA測(cè)序,原位雜交,SNP,基因芯片,核酸污染預(yù)防,核酸污染清除,假陽性,DNase,核酸污染清除試劑,分子生物
分子診斷是指利用分子生物學(xué)方法來檢測(cè)樣品中遺傳物質(zhì)的結(jié)構(gòu)或表達(dá)水平的變化從而做出相應(yīng)診斷的技術(shù)。由于分子生物技術(shù)的發(fā)展,人們生活水平不斷提高記憶對(duì)健康問題更為重視,分子診斷得以迅猛發(fā)展,*快速提高。我國分子診斷產(chǎn)業(yè)雖然起步較晚,但現(xiàn)已與歐美,日本,新加坡等起步較早的國家之間的的差距也越來越小。
分子診斷所應(yīng)用到的分子生物學(xué)技術(shù)主要包括,聚合鏈?zhǔn)椒磻?yīng)(PCR),熒光定量PCR(qPCR),DNA測(cè)序(DNA Sequencing),熒光原位雜交(FISH),DNA印記技術(shù)(DNA Blotting),單核酸多態(tài)性(SNP)和基因芯片(Gene Chip)等技術(shù)。這些技術(shù)的操作都離不開一個(gè)重要的物質(zhì) – 核酸(DNA和RNA)。而由于日常檢測(cè)中要處理大量的不同來源的核酸以及核酸本身難以降解的特性,核酸污染是困擾絕大多實(shí)驗(yàn)室的一個(gè)難題。微量的核酸污染會(huì)產(chǎn)生假陽性的檢測(cè)結(jié)果,這樣會(huì)對(duì)病人造成誤診,耽誤病情。如任由此情況發(fā)展,會(huì)形成氣溶膠污染而擴(kuò)散,zui終導(dǎo)致整個(gè)實(shí)驗(yàn)室的污染,嚴(yán)重的會(huì)關(guān)閉實(shí)驗(yàn)室,如無備用實(shí)驗(yàn)室,會(huì)造成更大的損失。
在與核酸污染長期抗?fàn)幹?,人們也總結(jié)出了一些預(yù)防和清除核酸污染的方法。對(duì)于預(yù)防,實(shí)驗(yàn)人員一定要不斷改進(jìn)并嚴(yán)格遵循實(shí)驗(yàn)室操作流程,對(duì)實(shí)驗(yàn)室不同操作進(jìn)行區(qū)域劃分,分裝試劑,定期對(duì)實(shí)驗(yàn)儀器進(jìn)行滅菌,實(shí)驗(yàn)室適當(dāng)通風(fēng),養(yǎng)成實(shí)驗(yàn)中進(jìn)行陰陽對(duì)照的好習(xí)慣。當(dāng)污染已經(jīng)出現(xiàn),傳統(tǒng)的清除方法包括對(duì)可疑器用稀酸進(jìn)行擦拭或浸泡,紫外線照射,對(duì)反應(yīng)液用DNaseⅠ或內(nèi)切酶進(jìn)行處理等方法。這些方法對(duì)一些微量污染會(huì)有一定效果,但對(duì)污染效果不是很理想,而且紫外線照射會(huì)對(duì)人體造成一定的危害。近些年來,一些生物試劑公司專門開發(fā)研制出一些檢測(cè)清除核酸污染的試劑,這些試劑具有對(duì)人體無害,操作簡(jiǎn)單,省時(shí)等特點(diǎn),其中一些試劑只需噴灑在污染去經(jīng)過一段時(shí)間的反應(yīng),擦除后便可清除污染。但這些產(chǎn)品還是相對(duì)傳統(tǒng)方法花費(fèi)略高。
總之,對(duì)于核酸污染大家一定要給予足夠的重視,提前預(yù)防,不要等到污染已經(jīng)出現(xiàn)才想辦法清除,經(jīng)常在實(shí)驗(yàn)室中配備清除污染的試劑,發(fā)現(xiàn)污染可馬上進(jìn)行處理,相信這樣核酸污染將不再是讓眾多實(shí)驗(yàn)人員頭疼的問題。
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