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Elisa選擇應(yīng)從多方面評價應(yīng)用

來源:上海恒遠生物科技有限公司   2015年12月16日 10:39  

Elisa試驗是一種敏感性高,特異性強,重復(fù)性好的實驗診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便,結(jié)果判斷較客觀等因素,已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗的各領(lǐng)域中。

本章恒遠就Elisa該從哪些方面選擇,應(yīng)從靈敏度、特異性、精密度、穩(wěn)定性、簡便性、安全性及經(jīng)濟性全面評價

◎靈敏度:有二層含義,1)為試劑檢出被檢物質(zhì)的zui低量的能力;2)為試劑對人群或大量樣品中陽性檢出的能力(假陰性越少越好) ,取決于包被物的全面性。
◎特異性:指試劑正確檢定不存在的被檢物質(zhì)的能力(無假陽性),取決于包被抗原(體)及標(biāo)記抗原(體)
的純度及特異性。
◎精密度:ELISA 試劑一般指其批內(nèi)CV,其值應(yīng)小于15%;定量試劑應(yīng)同時考察線性范圍試劑盒選擇
◎穩(wěn)定性:試劑在規(guī)定條件下能儲存的時間,一般采用破壞性試驗即將試劑存放于37℃保存,定期測定其靈敏度,特異性和精密度等指標(biāo),直到其質(zhì)量指標(biāo)開始下降為止,通常認為 37℃每穩(wěn)定一天相當(dāng)于4-10
℃保存一個半月。
◎簡便性:指在不影響試劑的前三項指標(biāo)的前題下,實驗和測定步驟越少越好,在定性試驗中結(jié)果判斷簡單明了,)定量試驗結(jié)果計算也應(yīng)簡單。
◎安全性:指試劑對操作者和環(huán)境安全無害無傳染性。
◎經(jīng)濟性:試劑在同等質(zhì)量條件下通過大規(guī)模生產(chǎn)或技術(shù)進步降低成本而市場價格比較合理。
試劑盒評價
◎試劑評價需要有的血清考核盤( Panel)進行檢測,一般實驗室不易從生檢所或臨檢中心取得,每進一次試劑評價一次也很麻煩。可以通過間接的信息對試劑進行選擇。
◎根據(jù)該試劑生檢所批批檢定報告,了解其質(zhì)量水平,按照質(zhì)量計劃選擇靈敏度高的或特異性高的試劑;
◎通過詢問試劑包被物的組成,如原料來源(基因工程或合成多肽),片段的組合(按比例混合或化學(xué)合成),片段的長短等判斷試劑的優(yōu)劣;
◎參考室間質(zhì)評評價報告中對試劑的評價結(jié)果,這比較客觀公正,因為統(tǒng)計數(shù)字均來自各參評醫(yī)院,反映了試劑在某一地區(qū)的使用情況;
◎根據(jù)部門發(fā)布的試劑評價結(jié)果,了解市場上試劑的質(zhì)量優(yōu)劣。
儀器質(zhì)控
為使儀器保持*工作狀態(tài)應(yīng)建立維護和校正儀器的標(biāo)準操作程序(SOP),所要控制的儀器包括移液器(加樣槍),水浴箱(溫箱),洗板機和酶標(biāo)儀。
◎移液器:ELISA 加樣量小(5-100ul),其準確性直接影響實驗結(jié)果,利用稱重法檢查:吸取刻度指示量的水,萬分之一天平稱重后計算吸量是否準確,一般應(yīng)在±10%以內(nèi);
◎水浴箱 經(jīng)常檢查水浴箱溫度計所示的溫度和水中(或溫箱內(nèi))實測溫度是否一致,允許有±1℃的誤差;
◎洗板機 每個廠家設(shè)置洗板后的殘留液有各自的規(guī)定一般不超過2ul ,人工扣板時,墊紙不濕,定期檢查管孔是否堵塞;
◎酶標(biāo)儀 經(jīng)常維護其光學(xué)部分,防止濾光片霉變,定期檢測校正,使其保持良好的工作性能。

上海恒遠生物承諾:

檢測用所有試劑全部都為美國進口試劑,適合檢測包括血清、血漿、尿液、胸腹水、灌洗液、腦脊液、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標(biāo)本,靈敏度*,多年專業(yè)酶免服務(wù),我們保證對所售任何產(chǎn)品一概負責(zé)到底,每一份實驗結(jié)果都真實可靠!

 

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