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色譜柱孔徑選擇小知識

來源:RESTEK 瑞思泰康科技(北京)有限公司   2015年12月22日 11:42  

1.測量法和表示

  孔徑分布和比表面積可以通過相同的方法來測量,如:氮吸附法和汞空隙率測定計(jì)平均孔徑也能通過逆向分子排阻法來測量,但真正的孔徑分布不能用個方法來測量。不過,因其它方法存在一些問題,高聚物填料仍然要采用逆向分子排阻法??讖接胣m或埃做單位??讖椒植嫉闹凳菢?biāo)稱的,而且不同生產(chǎn)商有不同的方法。所以,某生產(chǎn)商標(biāo)稱10nm的可能與另一生產(chǎn)商標(biāo)稱8nm或12nm的相同。

 

2.孔徑與保留

  孔徑是填料物理性質(zhì)的一個基本因子,并決定顆粒相比率(phase ratio)。進(jìn)一步?jīng)Q定了填料的保留性質(zhì)和載樣量。

 

3.孔徑和分子量

  被分析物分子小隨分子量增加而增大。如果其分子量大小約為孔徑的三分之一或大,則傳質(zhì)會嚴(yán)重受阻并造成低效能和峰展寬。這樣的情況下,要用更大孔徑的填料。對所有標(biāo)準(zhǔn)分析問題,通常用孔徑在大概6nm到13nm之間的填料。更大孔徑的填料也可以用在肽類分離上。分子量比肽更大的,如蛋白質(zhì),用30nm孔徑的填料更加合適。但這樣的填料與小分子作用的不好,因?yàn)楸缺砻娣e減少了。對被分析物分子量小于3000的,應(yīng)用孔徑小些的。被分析物分子量大于10000的,應(yīng)用孔徑30nm的填料。分子量介于3000到10000的,大的小的都可以得到滿意結(jié)果。

 

4.孔徑分布

  大HPLC填料的孔徑分布跨度有一個數(shù)量級。這樣的分布對大多數(shù)實(shí)用目的已經(jīng)足夠的窄了。然而,微孔的減少時填料的性能提高了。這可能是有窄孔徑分布的填料如Waters Spherisorb的一個優(yōu)勢。

 

5.非孔填料

  非孔填料能用于高分子量的、在大孔徑填料中表現(xiàn)出擴(kuò)散受限制的被分析物。但是,只能得到有限的比表面積。

 

6.選擇正確的孔徑

  被分析物的分子量            推薦使用的填料孔徑

  <3000                          6到13nm

  3000到10000                    10nm

  >10000(例如蛋白質(zhì))          30到100nm

 

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