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分光光度計出現(xiàn)波動如何解決

來源:上海萊??茖W(xué)儀器有限公司   2015年12月29日 14:31  

分光光度分析中經(jīng)常出現(xiàn)波動的問題,吸光度無法穩(wěn)定在一個恒定的數(shù)值上。這種情況常見于老式的721,722,7230等機型上,近幾年出的島津2550 系列,瓦里安的Carry系列,普析的1901系列等的新式儀器,儀器的波動一般比較小。如果出現(xiàn)這種情況,一般采用下面方式處理:

 

1.  先確定待測溶液的穩(wěn)定性


     之前就有版友出現(xiàn)過這種情況,說吸光度波動很大,隨時間的增加,吸光值減小/增大等的問題,先別懷疑儀器,假設(shè)儀器是穩(wěn)定的,驗證待測溶液是否穩(wěn)定。如 果溶液不穩(wěn)定,那就需要靜置一段時間,等穩(wěn)定了再測。這里我可以建議一點,就是做個簡單的試驗設(shè)計,以時間為橫坐標(biāo),以吸光度為縱坐標(biāo),看看吸光度隨時間 的變化曲線如何,等到穩(wěn)定以后,下次記住這個時間,以后就直接靜置這么長時間,直接測定了。
     簡單做了一個圖,看看吸光度隨時間的變化曲線,由圖1可以看出,在0-11分鐘,顯色劑和組分還在反應(yīng),如果在這個時間段檢測,吸光度肯定不穩(wěn)定;在 11-13分鐘時,吸光值基本穩(wěn)定,可以上機檢測;在13分鐘以后,開始有點褪色了。所以,下次直接靜置11-分鐘后開始上機測定就可以了。

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  還有一點很重要,就是這種不穩(wěn)定的情況能不能重復(fù),即有沒有重現(xiàn)性,如果沒有重現(xiàn)性,那只能說明是偶然誤差,可能由于電壓不穩(wěn)啊,震動等原因造成的??芍匦聹y定一次或多次取平均值即可。


2.  檢查是否操作不當(dāng)
   經(jīng)常做試驗的時候,有時候發(fā)現(xiàn)自己的數(shù)據(jù)不平行,俺就會反過來重頭檢查一下。先檢測比色皿在上機的時候是否擦拭干凈。這個很重要,有時擦拭不干凈,會 造成0.010左右的吸光值的偏差,即使是同一溶液上兩次儀器,也會出現(xiàn)這種誤差,主要是由于比色皿沒有擦拭干凈的原因。至于比色皿需要配對使用(對于老 儀器),或采用扣除池空白的方式(對于有此功能的新儀器),俺就不在此啰嗦了。
  

    對于拉桿式的儀器,要將拉桿復(fù)位。俺就鬧過一個笑話,印象很深刻的。一個顏色特別深的時候,上機發(fā)現(xiàn)吸光值為零。俺還檢查了很多方面,看前處理是否出了問 題,看波長是否在zui大吸收處,是不是儀器不穩(wěn)定,檢查了一大圈,都沒有問題啊,而且目視顏色很深啊。查來查去發(fā)現(xiàn),儀器光路對準(zhǔn)第二個比色皿位置,而俺的 樣品溶液在*個比色皿位置上。哎,大家別笑話,真人真事,讓大家見笑了。這里就要建議大家養(yǎng)成良好的習(xí)慣,使用完畢后一定要將拉桿復(fù)位,如果儀器不是一 個人使用,別人可能習(xí)慣不好,自己在試驗的過程中一定要親自檢查一下。

 


3 .  電壓不穩(wěn)或光源不穩(wěn)


  上面兩個方面都沒 有涉及儀器本身的問題,下面說說儀器方面。若果1.1.1和1.1.2您都做的很好,那有可能出現(xiàn)以下問題。如果您所在實驗室電壓不穩(wěn),也有可能造成儀器 不穩(wěn)定。據(jù)俺了解,儀器里面好像內(nèi)置了穩(wěn)壓系統(tǒng)。如果檢查出來是由于電壓不穩(wěn)定造成的,建議安裝穩(wěn)壓電源等裝置。這種情況好像比較少見啊。
   光源問題是大家容易忽略的問題,先看看氘燈和鎢燈的能量圖,如下:

2.jpg

 

              圖2 氘燈和鎢燈的能量圖

 建議大家新儀器備份一個能量圖,如果發(fā)現(xiàn)儀器不穩(wěn)定的話,可以做一個能量圖,和原來的能量圖比較,看看能量是否下降的很厲害,如果下降的很厲害,可能是光 源出問題了,建議更換光源燈。尤其是氘燈,壽命一般比鎢燈短,所以使用時更要注意,如只使用可見光區(qū),等儀器自檢完畢后,可利用軟件關(guān)閉氘燈,這樣可以節(jié) 省氘燈。如果在紫外區(qū),且長時間不用的話,也可以暫時關(guān)閉氘燈。對于721等老儀器,沒有氘燈使用計時等功能和能量掃描功能的儀器,可以自己設(shè)計一個氘燈 使用記錄,每次記錄氘燈使用的時間,等過了半衰期及時更換。
    在更換光源的時候,先建議讓儀器廠家的人來更管。如果條件不許的話,自己更換,一定要帶手套,裝上以后要對燈的位置進(jìn)行調(diào)節(jié)。


4.  檢測器問題
    還有可能是檢測器的問題,老儀器一般都用光電管作為檢測器,新儀器一般都使用光電倍增管。無論那種,對檢測器的保護,對儀器的保養(yǎng)一定要做好。之前由一個 版友儀器壞了,就是由于長時間不用,里面電子元件受潮老化導(dǎo)致。所以,要定期的對儀器進(jìn)行維護,及時更換干燥劑,保持儀器干燥。長時間不用,可定期開機, 這樣里面的電子元件本身會發(fā)熱,驅(qū)除潮氣。如果檢測器壞了,就要請廠家的專業(yè)人員來更換了。

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