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薄層層析可以對物質(zhì)成分進(jìn)行定性和定量測定。
定性分析——根據(jù)日光或紫外光，不同成分的不同顯色，判定物質(zhì)的組成成分。
定量分析——洗脫法測定成分含量或薄層掃描法測定含量。
一、薄層層析定性檢測
1）物理方法：主要紫外燈下檢測，利用物質(zhì)在254、365nm這兩個單色光下產(chǎn)生不同顏色不同強(qiáng)度熒光來檢測或利用在該光下不產(chǎn)生熒光而在熒光板上成為暗斑的方式檢測。
2）化學(xué)方法：主要指顯色劑顯色法：顯色劑分通用型和專屬型。通用型能廣泛的與不同類型化合物反應(yīng)。專屬型對某類化合物，共有某種功能基化合物起反應(yīng)。常見通用型顯色劑有碳化試劑（含不同濃度的酸）、磷鉬酸、三氯化銻、還有水。專屬型顯色劑，較多、復(fù)雜、具體物質(zhì)可照藥典操作及查閱有關(guān)文獻(xiàn)資料。
3）生物方式：將某些特定細(xì)菌的凝膠混懸液倒在展開后的薄層板上，用適當(dāng)溫度培養(yǎng)一段時間，以此檢測某些具有抑菌或殺菌的活性物質(zhì)。
二、薄層層析定量測定
1）斑點刮取定量：
刮取隨行對照品同位置供試品的斑點，用適當(dāng)溶媒提取后，用紫外分光法、氣相法、原子吸收分光光度等色譜手段測定。
2）直接定量：
a比斑點面積：用每格1mm2透明格紙蓋在薄層板上測量斑點所占面積mm2與對照品相互比較，定量誤差在10-20之間。
b薄層掃描法：實際工作原則是：用一束長寬可以調(diào)節(jié)的一定波長一定強(qiáng)度的光，照射在薄層板斑點上，進(jìn)行掃描，用儀器測量通過斑點的光束強(qiáng)度的變化，從而達(dá)到定量的目的。
測定方式分類：反射法：測量反射光的強(qiáng)度。
透射法：測量透射光的強(qiáng)度。
掃描方式分類：單波長法、單光束法；單波長、雙光束法；雙波長法。
薄層掃描儀的組成：光源、單色器、薄層板臺架及驅(qū)動裝置、檢測器、數(shù)據(jù)處理儀。操作方法步驟有供試品前處理、點樣、展開、上機(jī)掃描、數(shù)據(jù)處理。
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