ELISA測定模式包括以下幾種:雙抗體夾心法、間接法、雙抗原夾心法、IgM抗體捕捉法、競爭抑制法,其中競爭抑制法(HBeAb,HBcAb等采用)因受操作時(shí)差所引起的不公平競爭等因素的影響,結(jié)果重復(fù)性較差,質(zhì)量較難控制。不同批次的ELISA試劑在制作過程中很難保證質(zhì)量*一致,即使是通過批批檢的項(xiàng)目其檢測結(jié)果也存在差異,因此必須選擇和訂購長批號(hào)的試劑,并保證保存條件。嚴(yán)格執(zhí)行這一標(biāo)準(zhǔn)可以避免因試劑批號(hào)改變而重新建立質(zhì)控體系及重新評(píng)估試劑的復(fù)雜過程,并且能夠保證結(jié)果的穩(wěn)定性;對(duì)于效期短、使用率低的試劑,應(yīng)當(dāng)小量分裝,每次使用則取分裝部分即可,避免反復(fù)凍融造成試劑的失效。下面上海勁馬生物就根據(jù)Elisa試劑盒的三種常見檢測方法分析?下具體原理。歡迎參考學(xué)習(xí)。
問:什么是競爭性ELISA?
答:競爭ELISA基于競爭結(jié)合技術(shù),即樣本中的待測分子與固定量的標(biāo)記的同樣分子(我們一般用堿性磷酸酶作為標(biāo)記)同時(shí)與固定在孔板上的抗體的同一結(jié)合位點(diǎn)進(jìn)行競爭,參照標(biāo)準(zhǔn)曲線,試驗(yàn)數(shù)據(jù)值是定量的。
問:什么是夾心ELISA?
答:夾層ELISA采用對(duì)樣本中分析物的特異的抗體作為固定化的捕獲抗體,然后用第二個(gè)帶標(biāo)記的抗體作檢測,檢測抗體對(duì)分析物也是專一的。當(dāng)參照標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí),試驗(yàn)數(shù)據(jù)值是定量的。
問:什么是直接ELISA?
答:直接ELISA是將被測的分析物直接包膜在微孔板表面,然后用測試抗體來證實(shí)被測分析物的存在。當(dāng)與重組蛋白(標(biāo)準(zhǔn)曲線)進(jìn)行參照時(shí),試驗(yàn)數(shù)據(jù)值是半定量的。
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