EGFR抗體介導結腸癌細胞免疫性凋亡

過去二十年來，針對惡性結腸癌（mCRC）患者的治療有了突飛猛進的發(fā)展。患者的存活時間從12個月延長到30個月。這要歸功于化療與靶向療法，其中包括cetuximab這一單抗藥物。Cetuximab是一類嵌合單克隆抗體，它能夠特異性識別EGFR并有效治療mCRC。Cetuximab能夠阻斷EGFR與其配體的識別，進而影響RAS的信號通路以及ERK的激活。Panitumumab也是一類EGFR的中和抗體，它與Cetuximab具有相似的功能，然而，該抗體并不能引起T細胞毒性反應。因此，這類型抗體治療癌癥的主要機制是通過抑制EGFR信號通路。另外，由于攜帶KRAS突變的癌癥患者接受Cetuximab治療后也產(chǎn)生一定的療效，說明該抗體可能還通過別的機制介導抗癌效應。

大部分抗癌藥物都可以不通過免疫系統(tǒng)發(fā)揮作用，但一些特定的藥物能夠通過將癌細胞暴露在免疫系統(tǒng)面前從而使得免疫系統(tǒng)對其進行殺傷。zui近，來自意大利歐洲癌癥研究所的Maria Rescigno課題組發(fā)現(xiàn)Cetuximab與另外一種叫做FOLFIRI的標準化療藥物聯(lián)合使用能夠引發(fā)免疫原性腫瘤細胞凋亡（ICD）。相關結果發(fā)表在zui近一期的《nature medicine》雜志上。

首先，作者利用一種叫做DiFi的結腸癌細胞系進行研究，該細胞系對Cetuximab十分敏感，這一株細胞系的KRAS、NRAS、BRAF以及PIK3CA蛋白都屬于沒有突變，因此能夠正常感受抗EGFR治療。作者對這一細胞系進行Cetuximab、FOLFIRI或者聯(lián)合治療。通過檢測calreticulin（CRT）的上膜現(xiàn)象（細胞凋亡的現(xiàn)象之一），作者發(fā)現(xiàn)經(jīng)過Cetuximab或者Cetuximab+FOLFIRI聯(lián)合治療后的細胞發(fā)生了顯著的凋亡效應。

CRT的上膜對于腫瘤細胞來講相當于釋放了一個“eat me”信號，巨噬細胞或樹突狀細胞在收到這一信號的時候會對快死的腫瘤細胞進行吞噬作用。作者通過將藥物處理后的DiFi與DC進行共同孵育，熒光成像結果顯示：經(jīng)過上述兩種處理的腫瘤細胞與DC的相互作用效應明顯增強，另外，共同孵育后的DC吞噬能力得到了上升。另一方面，作者排除了這一效應是由抗體的Fc片段與其受體作用產(chǎn)生相關信號的可能。

為了研究該處理的生理功能，作者構建了表達人源化EGFR的小鼠結腸癌細胞系，并將其接種入小鼠體內，之后，作者給予接種后小鼠Cetuximab或聯(lián)合處理。結果顯示，經(jīng)過Cetuximab治療的小鼠體內腫瘤的生長受到了明顯的抑制。為了研究該效應是否依賴CD8 T細胞的激活，作者將上述經(jīng)過接種以及藥物治療后存活下來的小鼠中的CD8 T細胞取出，并且將其打入另外未經(jīng)過任何處理的小鼠體內。結果顯示，這部分小鼠在接種了癌細胞之后受到了有效的保護，而且癌細胞也出現(xiàn)了凋亡的現(xiàn)象。

為了檢驗該療法的廣譜性，作者對11種人源化結腸癌細胞系進行了檢測。結果顯示，癌細胞系對上述療法的敏感程度受到其內部KRAS的突變程度的影響。而攜帶BRAF突變的癌細胞系則不會受到該療法的任何影響。

綜上，作者證明Cetuximab與FOLFIRI聯(lián)合治療是一種有效的抗癌免疫療法。