同類(lèi)產(chǎn)品
總黃銅的提取和測(cè)定
總黃銅的提取和測(cè)定目的要求
學(xué)習(xí)黃銅類(lèi)化合物的測(cè)定原理和方法
總黃銅的提取和測(cè)定實(shí)驗(yàn)原理
黃銅類(lèi)化合物是植物的重要次生代謝產(chǎn)物,也是一些保健品和中藥材的有效成分之一。黃銅類(lèi)化合物的定量方法常用的有HPLC法和分光光度法。在實(shí)際生產(chǎn)和科研過(guò)程中,對(duì)于黃銅單體的定量常采用HPLC法,而對(duì)總黃銅的測(cè)定,考慮到方法的簡(jiǎn)便、快捷以及可行性,多采用在堿性介質(zhì)中加鋁鹽顯色的分光光度法。在堿性條件下黃銅類(lèi)化合物與鋁鹽形成配位化合物、在500nm波長(zhǎng)有zui大吸收峰。標(biāo)準(zhǔn)品選用蘆丁。
試劑和器材
1)、試劑
蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品
5%NaNO2;10%Al(NO3)3;5%NaOH;70%乙醇。
2、材料
新鮮銀杏葉
3)、器材
容量瓶10mL(×7),25mL(×1),100mL(×2);吸管0.2mL(×2),1mL(×2),2mL(×
- ,5mL(×1);分光光度計(jì)。
操作方法
1)、制作標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)
稱(chēng)取蘆丁標(biāo)準(zhǔn)品5mg;用70%乙醇溶解,定溶于25mL容量瓶,搖勻,得0.2mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液。
吸取標(biāo)準(zhǔn)溶液0.0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2mL,分別置于10mL容量瓶中,加入5%NaNO2 0.4mL,搖勻,放置6min;加入10%Al(NO3)3 0.4mL,搖勻,放置6min;加入5%NaOH4.0mL,搖勻,放置15min。以試劑空白作為參比溶液。用1cm比色皿,在500nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度,繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。
2)、總黃銅的提取
把新鮮的銀杏葉低溫烘干,使水分小于8%,制成干粉。稱(chēng)取干粉1.0g,置于100mL容量瓶中,加入70%乙醇30mL,浸泡24h。超聲波提取30min,過(guò)濾用70%乙醇定溶于100mL容量瓶中,得到黃銅提取液,代用。
3)、測(cè)定
吸取黃銅提取液1.00mL,置于10mL容量瓶中,加入5%NaNO3 0.4mL,搖勻,放置6min;加入10%Al(NO3)3 0.4mL,搖勻,放置6min;加入5%NaOH 4.0mL,再加水至刻度,搖勻,放置15min。以試劑空白作為參比溶液。用1cm比色皿,在500nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸光度,由標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)法計(jì)算總黃銅含量。
注意事項(xiàng)
對(duì)于某些熱敏成分的提取,采用超聲波破碎法效果較為理想。由于此過(guò)程是一個(gè)物理過(guò)程,浸提過(guò)程中無(wú)化學(xué)反應(yīng),被浸提的生物活性物質(zhì)在一定時(shí)間內(nèi)保持不變。
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