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總黃銅的提取和測定

來源:青島捷世康生物科技有限公司   2016年06月30日 08:46  

總黃銅的提取和測定

 

總黃銅的提取和測定目的要求

     學習黃銅類化合物的測定原理和方法

總黃銅的提取和測定實驗原理

    黃銅類化合物是植物的重要次生代謝產(chǎn)物,也是一些保健品和中藥材的有效成分之一。黃銅類化合物的定量方法常用的有HPLC法和分光光度法。在實際生產(chǎn)和科研過程中,對于黃銅單體的定量常采用HPLC法,而對總黃銅的測定,考慮到方法的簡便、快捷以及可行性,多采用在堿性介質(zhì)中加鋁鹽顯色的分光光度法。在堿性條件下黃銅類化合物與鋁鹽形成配位化合物、在500nm波長有zui大吸收峰。標準品選用蘆丁。

試劑和器材

1)、試劑

蘆丁標準品

5%NaNO2;10%Al(NO3)3;5%NaOH;70%乙醇。

2、材料

新鮮銀杏葉

3)、器材

容量瓶10mL(×7),25mL(×1),100mL(×2);吸管0.2mL(×2),1mL(×2),2mL(×

  1. ,5mL(×1);分光光度計。

操作方法

1)、制作標準曲線

    稱取蘆丁標準品5mg;用70%乙醇溶解,定溶于25mL容量瓶,搖勻,得0.2mg/mL的標準溶液。

    吸取標準溶液0.0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.2mL,分別置于10mL容量瓶中,加入5%NaNO2 0.4mL,搖勻,放置6min;加入10%Al(NO3)3  0.4mL,搖勻,放置6min;加入5%NaOH4.0mL,搖勻,放置15min。以試劑空白作為參比溶液。用1cm比色皿,在500nm波長處測定吸光度,繪制標準曲線。

2)、總黃銅的提取

    把新鮮的銀杏葉低溫烘干,使水分小于8%,制成干粉。稱取干粉1.0g,置于100mL容量瓶中,加入70%乙醇30mL,浸泡24h。超聲波提取30min,過濾用70%乙醇定溶于100mL容量瓶中,得到黃銅提取液,代用。

3)、測定

    吸取黃銅提取液1.00mL,置于10mL容量瓶中,加入5%NaNO3  0.4mL,搖勻,放置6min;加入10%Al(NO3)3  0.4mL,搖勻,放置6min;加入5%NaOH  4.0mL,再加水至刻度,搖勻,放置15min。以試劑空白作為參比溶液。用1cm比色皿,在500nm波長處測定吸光度,由標準曲線法計算總黃銅含量。

注意事項

     對于某些熱敏成分的提取,采用超聲波破碎法效果較為理想。由于此過程是一個物理過程,浸提過程中無化學反應,被浸提的生物活性物質(zhì)在一定時間內(nèi)保持不變。

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