国产精品视频一区二区三区四,亚洲av美洲av综合av,99国内精品久久久久久久,欧美电影一区二区三区电影

產(chǎn)品推薦:氣相|液相|光譜|質(zhì)譜|電化學(xué)|元素分析|水分測(cè)定儀|樣品前處理|試驗(yàn)機(jī)|培養(yǎng)箱


化工儀器網(wǎng)>技術(shù)中心>儀器文獻(xiàn)>正文

歡迎聯(lián)系我

有什么可以幫您? 在線咨詢

細(xì)菌蛋白提取與純化的實(shí)驗(yàn)手冊(cè)

來源:上海嘉鵬   2016年07月27日 09:57  

不同的蛋白質(zhì)分離純化的方法不同,但蛋白質(zhì)分離純化的操作步驟基本類似,那么如何進(jìn)行細(xì)菌蛋白的提取呢?這里總結(jié)細(xì)菌蛋白的提取的實(shí)驗(yàn)試劑、操作步驟以及一些注意事項(xiàng)。
實(shí)驗(yàn)試劑
采用T7• Tag Affinity Purification Kit
T7•Tag抗體瓊脂。B/W緩沖液:4.29mM Na2HPO4,1.47 mM KH2PO4,2.7 mM KCl, 0.137mM NaCl,1%吐溫-20,pH7.3 洗脫緩沖液: 0.1M檸檬酸,pH2.2. 中和緩沖液:2M Tris,pH10.4。 PEG 20000。

實(shí)驗(yàn)步驟
1.100ml 含重組表達(dá)質(zhì)粒的菌體誘導(dǎo)后,離心5000g×5min,棄上清,收獲菌體,用10ml預(yù)冷的B/W緩沖液重懸。
2. 重懸液于冰上超聲處理,直至樣品不再粘稠,4℃離心 14000g×30min,取上清液,0.45μm膜抽濾后作為樣品液。
3. 將結(jié)合T7•Tag抗體的瓊脂充分懸起,平衡至室溫,裝入層析柱中。
4. B/W緩沖液平衡后樣品液過柱。
5. 10ml B/W緩沖液過柱,洗去未結(jié)合蛋白。
6. 用5ml洗脫緩沖液過柱,每次1ml,洗脫液用含150μl中和緩沖液的離心管收集,混勻后置于冰上,直接SDS-PAGE分析。
7. 將洗脫下來的蛋白放入透析袋中,雙蒸水透析24hr,中間換液數(shù)次。
8. 用PEG 20000濃縮蛋白。
注意事項(xiàng)
蛋白在過層析柱前,要0.45μm膜抽濾,否則幾次純化后,柱子中會(huì)有不溶物。

上海嘉鵬科技有限公司專業(yè)生產(chǎn):紫外分析儀、三用紫外分析儀、暗箱式紫外分析儀、暗箱三用紫外分析儀、暗箱紫外分析儀、手提式紫外分析儀、三用紫外分析儀暗箱式、紫外檢測(cè)儀、部分收集器、恒流泵、蠕動(dòng)泵、凝膠成像系統(tǒng)、凝膠成像分析系統(tǒng)、化學(xué)發(fā)光成像分析系統(tǒng)、光化學(xué)反應(yīng)儀、旋渦混合器、漩渦混合器、玻璃層析柱、梯度混合器、梯度混合儀、核酸蛋白檢測(cè)儀、玻璃層析柱、熒光增白劑測(cè)定儀、餾分收集器、切膠儀、藍(lán)光切膠儀、層析系統(tǒng)等產(chǎn)品。咨詢。

免責(zé)聲明

  • 凡本網(wǎng)注明“來源:化工儀器網(wǎng)”的所有作品,均為浙江興旺寶明通網(wǎng)絡(luò)有限公司-化工儀器網(wǎng)合法擁有版權(quán)或有權(quán)使用的作品,未經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)不得轉(zhuǎn)載、摘編或利用其它方式使用上述作品。已經(jīng)本網(wǎng)授權(quán)使用作品的,應(yīng)在授權(quán)范圍內(nèi)使用,并注明“來源:化工儀器網(wǎng)”。違反上述聲明者,本網(wǎng)將追究其相關(guān)法律責(zé)任。
  • 本網(wǎng)轉(zhuǎn)載并注明自其他來源(非化工儀器網(wǎng))的作品,目的在于傳遞更多信息,并不代表本網(wǎng)贊同其觀點(diǎn)和對(duì)其真實(shí)性負(fù)責(zé),不承擔(dān)此類作品侵權(quán)行為的直接責(zé)任及連帶責(zé)任。其他媒體、網(wǎng)站或個(gè)人從本網(wǎng)轉(zhuǎn)載時(shí),必須保留本網(wǎng)注明的作品第一來源,并自負(fù)版權(quán)等法律責(zé)任。
  • 如涉及作品內(nèi)容、版權(quán)等問題,請(qǐng)?jiān)谧髌钒l(fā)表之日起一周內(nèi)與本網(wǎng)聯(lián)系,否則視為放棄相關(guān)權(quán)利。
企業(yè)未開通此功能
詳詢客服 : 0571-87858618
中宁县| 屏东县| 临漳县| 婺源县| 长宁县| 张家川| 宁陵县| 溧水县| 错那县| 故城县| 都昌县| 个旧市| 滨州市| 中西区| 东乡县| 莫力| 交口县| 永康市| 阳春市| 华池县| 古交市| 伊金霍洛旗| 常熟市| 河东区| 开封市| 渑池县| 义马市| 榆树市| 淅川县| 宝应县| 石林| 自治县| 资源县| 唐河县| 满洲里市| 石家庄市| 麻城市| 万宁市| 大名县| 利辛县| 迁安市|