狗凝血因子ⅩⅢ（ⅩⅢ）elisa試劑盒用于測(cè)定狗血清、血漿及相關(guān)液體樣本中凝血因子ⅩⅢ（ⅩⅢ）含量。
　　
　　狗凝血因子ⅩⅢ（ⅩⅢ）elisa試劑盒細(xì)胞培養(yǎng)上清：
　　
　　檢測(cè)分泌性的成份時(shí)，用無(wú)菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí)，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬(wàn)/ml左右。通過(guò)反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
　　
　　狗凝血因子ⅩⅢ（ⅩⅢ）elisa試劑盒血漿：
　　
　　應(yīng)根據(jù)試劑盒的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑，加入10％（v/v）抗凝劑（0.1M檸檬酸鈉或1%heparin或2.0%EDTA.Na2）混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。
　　
　　實(shí)狗凝血因子ⅩⅢ（ⅩⅢ）elisa試劑盒驗(yàn)原理
　　
　　 本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中狗凝血因子ⅩⅢ（ⅩⅢ）水平。用純化的狗凝血因子ⅩⅢ（ⅩⅢ）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入凝血因子ⅩⅢ（ⅩⅢ），再與HRP標(biāo)記的凝血因子ⅩⅢ（ⅩⅢ）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的凝血因子ⅩⅢ（ⅩⅢ）呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度（OD值），通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中狗凝血因子ⅩⅢ（ⅩⅢ）濃度。