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上海源葉生物科技有限公司
初級(jí)會(huì)員 | 第16年
微生物鑒別方法:新技術(shù)新方法2010/03/10
1、細(xì)胞壁組分分析細(xì)胞壁組分分析首先應(yīng)用于放線菌分類中,把它作為區(qū)分“屬”的依據(jù)之一。它比單純用形態(tài)進(jìn)行分類更全面。2、紅外光譜IR一般認(rèn)為,每種物質(zhì)的化學(xué)結(jié)構(gòu)都有特定的紅外光譜。若兩個(gè)樣品的吸收光譜*相同,可以初步認(rèn)為它們是同一種物質(zhì)。因此,紅外光譜技術(shù)被應(yīng)用到微生物的分類中。根據(jù)有關(guān)學(xué)者的試驗(yàn)表明,這種方法簡(jiǎn)便快速,樣品少,結(jié)果較好,不僅可以初步了解各屬菌的細(xì)胞成分的化學(xué)性質(zhì),同時(shí)也有助于微生物間系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系的探索。但是它也有不足之處,借助于紅外線光譜區(qū)分屬內(nèi)的種和菌株是困難的,但可以作為“
標(biāo)準(zhǔn)化的微生物采集方法2010/03/08
標(biāo)準(zhǔn)化的微生物采集方法(一)基本原則1、發(fā)現(xiàn)感染應(yīng)及時(shí)采集微生物標(biāo)本作病原學(xué)檢查,二、三級(jí)醫(yī)院微生物標(biāo)本送檢率不應(yīng)低于70%。2、盡量在抗菌藥物使用之前采集標(biāo)本。3、標(biāo)本采集時(shí)應(yīng)嚴(yán)格無(wú)菌操作,減少或避免機(jī)體正常菌群及其它雜菌污染。4、標(biāo)本采集后應(yīng)立即送至細(xì)菌室。床旁接種可提高病原菌檢出率。5、以棉拭子采集的標(biāo)本如咽拭子、肛拭或傷口拭子,宜插入運(yùn)送培養(yǎng)基送檢。6、送檢標(biāo)本應(yīng)注明來(lái)源和檢驗(yàn)?zāi)康模辜?xì)菌室能正確選用相應(yīng)的培養(yǎng)基和適宜的培養(yǎng)環(huán)境。(二)血液與骨髓的送檢方法1、通常采血部位為肘靜脈。疑似細(xì)
腦膜炎球菌和李斯特菌的培養(yǎng)2010/03/08
腦膜炎球菌和李斯特菌凍干菌株,需要用無(wú)菌的生理鹽水溶解。1、腦膜炎球菌:革蘭陰性菌,營(yíng)養(yǎng)要求較高,在普通培養(yǎng)基上不長(zhǎng),30℃以下不長(zhǎng),應(yīng)接種于已溫暖的血平板或巧克力平板上,置于燭缸內(nèi)37℃培養(yǎng)。2、李斯特菌:革蘭陽(yáng)性桿菌,營(yíng)養(yǎng)要求不高,在含有肝浸液、腹水、血清或葡萄糖的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)良好,在5%養(yǎng)血平板上形成細(xì)小圓形光滑而有狹窄beta溶血圈的菌落。
病毒變異的研究方法(二)2010/03/05
3.研究方法研究病毒的遺傳變異,包括幾方面的內(nèi)容:從整體水平上研究病毒的突變率,即某病毒基因組一次復(fù)制過(guò)程中某一核苷酸位點(diǎn)因置換、缺失或插入而改變的可能性;根據(jù)某一遺傳學(xué)指標(biāo)(見(jiàn)上述),從自然流行毒株中篩選或結(jié)合應(yīng)用誘變因素篩選有意義的變異株;分析變異株突變的性質(zhì);通過(guò)人工突變研究某一位點(diǎn)(或區(qū)域)的改變對(duì)病毒遺傳性狀的影響。下面分別加以敘述。(1)病毒突變率研究:確定病毒突變率的方法有多種。首先,zui直接的方法是體外測(cè)定病毒基因組復(fù)制酶的錯(cuò)配率,如水皰性口炎病毒(VSV)RNA聚合酶的錯(cuò)
感染動(dòng)物體內(nèi)的細(xì)胞損傷2010/03/05
上述細(xì)胞損傷和其它變化,也都發(fā)生于感染動(dòng)物體內(nèi)。但是,由于機(jī)體防衛(wèi)反應(yīng)的限制,細(xì)胞損傷的范圍和程度,可能不同于試管內(nèi)所見(jiàn)。再者,機(jī)體內(nèi)各種類型的細(xì)胞并不呈現(xiàn)同樣的病毒感受性,例如傳染性軟疣主要侵害皮膚上皮細(xì)胞,狂犬病病毒主要侵害神經(jīng)細(xì)胞等等。不言而喻,不同類型和不同部位的細(xì)胞損傷,對(duì)機(jī)體的危害性也不一樣。皮膚細(xì)胞發(fā)生損傷時(shí),機(jī)體的正常生命活動(dòng)一般不受明顯影響;粘膜細(xì)胞的損傷,則常引起比較嚴(yán)重的消化道或呼吸道癥狀;小血管內(nèi)皮細(xì)胞的損傷,更可招致水腫、出血、梗塞和缺氧等嚴(yán)重病變。而腦細(xì)胞和心肌細(xì)胞
聯(lián)合疫苗和多價(jià)疫苗2010/03/03
為了使用上的方便,生物制品生產(chǎn)單位愈來(lái)愈多地制備多價(jià)疫苗或聯(lián)合疫苗。在一個(gè)劑量的疫苗中包含一種病毒的幾個(gè)型或亞型者,稱為多價(jià)疫苗;在一個(gè)劑量的疫苗中包含幾種病毒乃至其它微生物或其產(chǎn)物者,稱為聯(lián)合疫苗。必須指出,多價(jià)疫苗決不是幾種疫苗的簡(jiǎn)單的混合。制備和應(yīng)用多價(jià)疫苗或聯(lián)合疫苗,必須首先保證其中各個(gè)免疫成分之間不發(fā)生免疫干擾現(xiàn)象,也就是不降低各該免疫成分的免疫效能。因此必須進(jìn)行大量細(xì)致的試驗(yàn),通過(guò)對(duì)比,選擇zui適當(dāng)?shù)呐浜蠈?duì)象和配合比例,并作較大數(shù)量的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和本動(dòng)物的免疫效果測(cè)定。另外還有一個(gè)經(jīng)濟(jì)
被動(dòng)免疫2010/03/03
給人或動(dòng)物肌肉注射免疫血清或由免疫血清提取的免疫球蛋白(抗體),能使其獲得短期(約2~3周)的免疫保護(hù),這種免疫方法稱為被動(dòng)免疫。被動(dòng)免疫在醫(yī)學(xué)上有著現(xiàn)實(shí)意義,例如,注射破傷風(fēng)抗毒素能夠防止患者術(shù)后破傷風(fēng)的發(fā)生。在獸醫(yī)學(xué)上,對(duì)犬瘟熱、貓泛白細(xì)胞減少癥或犬細(xì)小病毒感染以及豬瘟等病毒性傳染病的緊急預(yù)防也采用被動(dòng)免疫的方法。在一般的病毒性傳染病預(yù)防中則不常采用。通常采用同源免疫球蛋白,異種動(dòng)物血清則可以引起血清病或過(guò)敏反應(yīng)。免疫球蛋白既可由經(jīng)過(guò)加強(qiáng)免疫的同種動(dòng)物獲得,也可由自然感染某種病毒(如犬瘟熱病
細(xì)菌形態(tài)觀察及單染色 2010/03/01
一、實(shí)驗(yàn)原理細(xì)菌個(gè)體微小,且較透明,必須借助染色法使菌體著色,與背景形成鮮明的對(duì)比,以便在顯微鏡下進(jìn)行觀察。根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)康牟煌?,可分為?jiǎn)單染色法、鑒別染色法和特殊染色法等。簡(jiǎn)單染色法是zui基本的染色方法,是利用單一染料對(duì)細(xì)菌進(jìn)行染色。此法操作簡(jiǎn)便,適用于菌體一般形狀和細(xì)菌排列的觀察。常用堿性染料進(jìn)行簡(jiǎn)單染色。二、試劑與器材1、材料大腸桿菌,枯草芽孢桿菌2、試劑呂氏堿性美藍(lán)染液(或草酸銨結(jié)晶紫染液)、齊氏石炭酸復(fù)紅染液。3、器材顯微鏡、酒精燈、載玻片、接種環(huán)、雙層瓶(內(nèi)裝香柏油和二甲苯)等。三、實(shí)
菌種保藏 2010/03/01
一、實(shí)驗(yàn)原理微生物個(gè)體微小、代謝旺盛、生長(zhǎng)繁殖快,如果保存不妥容易發(fā)生變異和雜菌污染,甚至導(dǎo)致細(xì)胞死亡等現(xiàn)象。因此,保存好菌種是非常必要和重要的。常用的菌種保藏方法包括傳代培養(yǎng)法、載體法、懸液法、冷凍法和真空干燥法二、試劑與器材1、材料大腸桿菌、青霉菌、放線菌2、試劑液體石蠟、甘油、五氧化二磷、95%乙醇、10%鹽酸、無(wú)水氯化鈣、食鹽、干冰3、器材無(wú)菌吸管、無(wú)菌滴管、無(wú)菌培養(yǎng)皿;安額管、凍干管、40目與100目篩子、油紙、濾紙條(0.5X1、2cm)、干燥器、真泵器、真空泵、真空壓力表、噴燈、L
估算T7噬菌體濃度方法2010/02/26
(1)病毒效價(jià)。zui常用的方法,將T7和大腸桿菌懸液以及半固體營(yíng)養(yǎng)瓊脂混合后倒在高瓊脂濃度的平板上,培養(yǎng),然后計(jì)數(shù)噬菌斑數(shù),計(jì)算每毫升噬菌體懸液形成的噬菌斑數(shù)(PFU)。(2)電鏡下直接計(jì)算病毒顆粒數(shù)目。這當(dāng)然不是很可行了,不實(shí)用。(3)通過(guò)如PCR等分子生物學(xué)方法來(lái)測(cè)定。也挺麻煩的。建議做效價(jià)測(cè)定。T7噬菌體為線狀雙鏈DNA,其雙螺旋鏈的相對(duì)分子質(zhì)量為2.5×10-7。
支原體即霉形體的培養(yǎng)2010/02/26
解脲脲原體(UU)是耐酸不耐堿的,UU培養(yǎng)的原理是在于其菌體中含有脲酶,而UU培養(yǎng)基中含有尿素,UU的生長(zhǎng)需要其本身的脲酶分解尿素益提供其自身生長(zhǎng)所需要的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),UU培養(yǎng)基中含有指示劑酚紅,由于尿素被分解釋放出氨從而使培養(yǎng)基變堿而使培養(yǎng)基由黃變紅,但是這種紅是一種清亮的紅色,透明澄清無(wú)渾濁,UU其適宜的PH值為6.2-6.5,由于尿素分解產(chǎn)氨是PH上升,UU在PH值大于7的條件下會(huì)迅速死亡,因此,在培養(yǎng)時(shí)要隨時(shí)觀察其液體培養(yǎng)基的PH值,一旦看到培養(yǎng)基變紅,要立即取出,以防培養(yǎng)基PH上升導(dǎo)致UU
食品環(huán)境中的微生物2010/02/24
自然界中,一些在以前被人們認(rèn)為是生命禁區(qū)的高溫、低溫、高酸、高堿、高鹽、高壓或高輻射強(qiáng)度等惡劣環(huán)境中仍然生活著微生物,如嗜熱菌(thermophiles)、嗜冷菌(psychrophiles)、嗜酸菌(acidophiles)、嗜堿菌(basophgiles)、嗜鹽菌(halophiles)、嗜壓菌(barophiles)和耐輻射菌等,它們統(tǒng)稱為環(huán)境微生物或簡(jiǎn)稱為微生物(extrememicroorganism)。1、嗜鹽微生物嗜鹽菌和耐鹽菌嗜鹽菌是指那些能耐受一定濃度的鹽溶液,但在無(wú)鹽存在條件
新城疫病毒生物學(xué)活性與抗原性2010/02/24
生物學(xué)活性(1)血凝性NDV能凝集紅細(xì)胞,是由于其HN蛋白能結(jié)合于紅細(xì)胞表面的受體。這一特性以及抗血清的特異性抑制作用已成為本病的有效診斷方法。雖然NDV可凝集所有兩棲類、爬行類和禽類的紅細(xì)胞,但HA試驗(yàn)常用雞的紅細(xì)胞。所有NDV毒株都可凝集人、小鼠和豚鼠紅細(xì)胞。但凝集牛、山羊、綿羊、豬和馬紅細(xì)胞的能力則隨毒株或血清型而異。(2)神經(jīng)氨酸酶活性神經(jīng)氨酸酶(NA)也是HN分子的一部分,存在于副粘病毒屬的所有成員。此酶的明顯作用是可將病毒逐漸從紅細(xì)胞上洗脫下來(lái)。然而尚不知道NA對(duì)病毒復(fù)制的確切功
大鼠TT3 ELISA KiT2010/01/22
產(chǎn)品編號(hào):EIA05318使用前*閱讀說(shuō)明書。本酶聯(lián)免疫試劑盒是基于經(jīng)典酶聯(lián)夾心技術(shù)原理,能測(cè)量大鼠總?cè)饧紫僭彼幔═T3),只能用于研究用途,不得用于醫(yī)學(xué)診斷。工作原理三碘甲腺原氨酸3,5,3′-triiodothyronine縮寫TT3,是從甲狀腺分泌出來(lái)的激素,與甲狀腺素共同在甲狀腺球蛋白分子中合成。雖表現(xiàn)與甲狀腺素相同的生理活性,但其作用比甲狀腺素強(qiáng)。所提供的ELISAKit是典型的夾心法酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒(ELISA)。預(yù)先包被的抗體為多克隆抗體。檢測(cè)相抗體也為多克隆抗體,經(jīng)生物
大鼠TT4 ELISA KiT2010/01/22
產(chǎn)品編號(hào):EIA05319使用前*閱讀說(shuō)明書。本酶聯(lián)免疫試劑盒是基于經(jīng)典酶聯(lián)夾心技術(shù)原理,能測(cè)量大鼠總甲狀腺素(TT4),只能用于研究用途,不得用于醫(yī)學(xué)診斷。工作原理TT4全部由甲狀腺產(chǎn)生,每天約產(chǎn)生80—100ug.血清中99.96%的TT4以與蛋白結(jié)合的形式存在,其中10%一90%與甲狀腺激素結(jié)合球蛋白(TBG)結(jié)合。所提供的ELISAKit是典型的夾心法酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒(ELISA)。預(yù)先包被的抗體為多克隆抗體。檢測(cè)相抗體也為多克隆抗體,經(jīng)生物素(biotin)標(biāo)記。樣品和生物素標(biāo)記
大鼠TRF ELISA KiT2010/01/20
產(chǎn)品編號(hào):EIA06229使用前*閱讀說(shuō)明書。本酶聯(lián)免疫試劑盒是基于經(jīng)典酶聯(lián)夾心技術(shù)原理,能測(cè)量大鼠TRF,只能用于研究用途,不得用于醫(yī)學(xué)診斷。工作原理TRF,轉(zhuǎn)鐵蛋白(transferrin)。轉(zhuǎn)鐵蛋白是血漿中主要的含鐵蛋白質(zhì),負(fù)責(zé)運(yùn)載由消化管吸收的鐵和由紅細(xì)胞降解釋放的鐵。以TRF-Fe3+的復(fù)合物形式進(jìn)入骨髓中,供成熟紅細(xì)胞的生成。TRF分子量約7.7萬(wàn),為單鏈糖蛋白,含糖量約6%。TRF可逆地結(jié)合多價(jià)離子,包括鐵、銅、鋅、鈷等。每一分子TRF可結(jié)合兩個(gè)三價(jià)鐵原子。TRF主要由肝細(xì)胞合成,
大鼠TRFR ELISA KiT2010/01/20
產(chǎn)品編號(hào):EIA06243使用前*閱讀說(shuō)明書。本酶聯(lián)免疫試劑盒是基于經(jīng)典酶聯(lián)夾心技術(shù)原理,能測(cè)量大鼠TRFR,只能用于研究用途,不得用于醫(yī)學(xué)診斷。工作原理TRFR,轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(transferrinreceptor)。轉(zhuǎn)鐵蛋白受體(TfR)是一種細(xì)胞膜受體,也是一種跨膜糖蛋白。主要在調(diào)節(jié)細(xì)胞鐵的攝取中發(fā)揮關(guān)鍵作用。正常人80%以上的TfR存在于骨髓紅系細(xì)胞上,紅系各階段細(xì)胞所表達(dá)的TfR數(shù)隨紅細(xì)胞的成熟而減少。原紅細(xì)胞上可有800,000個(gè)TfR,到網(wǎng)織紅細(xì)胞逐漸減少。原紅細(xì)胞上可有100,0
大鼠IL-7 ELISA KiT2010/01/19
產(chǎn)品編號(hào):EIA05365使用前*閱讀說(shuō)明書。本酶聯(lián)免疫試劑盒是基于經(jīng)典酶聯(lián)夾心技術(shù)原理,能測(cè)量大鼠IL-7,只能用于研究用途,不得用于醫(yī)學(xué)診斷。工作原理白細(xì)胞介素7是一種促進(jìn)B細(xì)胞和T細(xì)胞生長(zhǎng)的分子。,它主要由是一種促進(jìn)B細(xì)胞和T細(xì)胞生長(zhǎng)的分子等產(chǎn)生。分子質(zhì)量:20-28(kDa),主要生物學(xué)活性:刺激B細(xì)胞前體、前B細(xì)胞的增殖;促進(jìn)前T細(xì)胞、胸腺細(xì)胞和T細(xì)胞增殖;誘導(dǎo)CTL和LAK活性。所提供的ELISAKit是典型的夾心法酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒(ELISA)。預(yù)先包被的抗體為多克隆抗體。檢
大鼠IL-6 ELISA KiT2010/01/19
產(chǎn)品編號(hào):EIA05847使用前*閱讀說(shuō)明書。本酶聯(lián)免疫試劑盒是基于經(jīng)典酶聯(lián)夾心技術(shù)原理,能測(cè)量大鼠IL-6,只能用于研究用途,不得用于醫(yī)學(xué)診斷。工作原理IL-6,白介素-6。IL-6是一種多功能細(xì)胞因子,在體內(nèi)免疫反應(yīng)調(diào)節(jié)、血細(xì)胞的增生、防御機(jī)制和急性期反應(yīng)中起中心作用。既可由淋巴細(xì)胞產(chǎn)生,也能由非淋巴細(xì)胞合成,如單核/巨噬細(xì)胞,纖維母細(xì)胞,肝細(xì)胞,角化細(xì)胞,星形細(xì)胞,血管內(nèi)皮細(xì)胞和各種腫瘤細(xì)胞。IL-6的合成受多種細(xì)胞因子、核分裂因子和抗原的刺激而增加。IL-6是一種糖蛋白,包含N-和O-連
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