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實(shí)驗(yàn)十五酵母菌子囊孢子的觀察2010/04/06: 一、基本原理酵母菌的子囊孢子生成與否及其形狀，是酵母分類上的重要依據(jù)。一部分酵母菌只有當(dāng)它在zui適條件下，才能觀察到形成的子囊孢子，不同種屬的酵母菌，形成子囊孢子的條件不同。葡萄糖-醋酸鹽培養(yǎng)基特別有利于釀酒酵母子囊孢子的形成。本實(shí)驗(yàn)用生長(zhǎng)在此培養(yǎng)基上的釀酒酵母為材料，進(jìn)行子囊孢子的觀察。二、器材釀酒酵母；呂氏堿性美藍(lán)染液，石炭酸復(fù)紅染液，3％的酸性酒精，孔雀綠芽孢染液，麥芽汁瓊脂斜面培養(yǎng)基，葡萄糖-醋酸鹽培養(yǎng)基等。三、操作步驟1．將釀酒酵母先移種到新鮮麥芽汁瓊脂斜面上，25℃培養(yǎng)24小時(shí)左右

實(shí)驗(yàn)二十八厭氧微生物的培養(yǎng)2010/03/31: 一、基本原理厭氧微生物在自然界分布廣泛，種類繁多，作用也日益引起重視。培養(yǎng)厭氧微生物的技術(shù)關(guān)鍵是要使該類微生物處于除去了氧或氧化還原勢(shì)低的環(huán)境中。焦性沒食子酸與堿性溶液作用后，形成堿性沒食子酸鹽，在此反應(yīng)過程中能吸收氧氣而造成厭氧環(huán)境；牛肉渣內(nèi)既含有不飽和脂肪酸能吸收氧，又含有谷胱甘肽（glutathione）能形成負(fù)氧化還原電位差；厭氧罐是采用某種方法除去其中的氧，例如將鎂與氧化鋅制成產(chǎn)氫氣袋，放入罐中加水反應(yīng)產(chǎn)生氫，鈀或鉑是催化劑，在常溫下催化氫與氧化合成水，則可除去密封的厭氧罐中的氧。二、

微生物數(shù)量的測(cè)定2010/03/31: 單細(xì)胞微生物個(gè)體生長(zhǎng)時(shí)間很短，很快進(jìn)入繁殖階段，生長(zhǎng)和繁殖難以分開，個(gè)體生長(zhǎng)很難測(cè)定，而且實(shí)際應(yīng)用意義不大，因此，它們的生長(zhǎng)不是依據(jù)細(xì)胞大小，而是以群體的生長(zhǎng)作為單細(xì)胞微生物生長(zhǎng)的指標(biāo)。群體生長(zhǎng)表現(xiàn)為細(xì)胞數(shù)目的增加或細(xì)胞物質(zhì)的增加。測(cè)定細(xì)胞數(shù)目的方法有顯微鏡直接計(jì)數(shù)法、平板菌落計(jì)數(shù)法、光電比濁法等。測(cè)量細(xì)胞物質(zhì)的方法有細(xì)胞干重的測(cè)定、細(xì)胞某種成分如氮的含量、RNA和DNA的含量測(cè)定、代謝產(chǎn)物的測(cè)定等。總之，測(cè)定方法很多，各有優(yōu)缺點(diǎn)，工作中應(yīng)根據(jù)具體情況加以選擇。

試劑和溶液的配制2010/03/29: 一、3%酸性酒精溶液（實(shí)驗(yàn)15）濃鹽酸3ml95%酒精97ml二、中性紅指示劑（實(shí)驗(yàn)40）中性紅0．04g95%乙醇28ml蒸餾水72ml中性紅pH6．8—8，顏色由紅變黃，常用濃度為0．04%。三、淀粉水解試驗(yàn)用碘液（盧戈氏碘液）（實(shí)驗(yàn)40）碘片1g碘化鉀2g蒸餾水300ml先將碘化鉀溶解在少量水中，再將碘片溶解在碘化鉀溶液中，待碘全溶后，加足水分即成。四、溴甲酚紫指示劑（實(shí)驗(yàn)41）溴甲酚紫0．04g0．01mol/LNaOH7．4ml蒸餾水92．6ml溴甲酚紫pH5．2—6．8，顏色由黃變紫

染色液的配制 22010/03/29: 五、莢膜染色液（實(shí)驗(yàn)9）1．黑色素水溶液黑色素5g蒸餾水100ml福爾馬林（40%甲醛）0．5ml將黑色素在蒸餾水中煮沸5分鐘，然后加入福爾馬林作防腐劑。2．番紅染液與革蘭氏染液中番紅復(fù)染液相同。六、鞭毛染色液（實(shí)驗(yàn)10）A液：?jiǎn)螌幩?gFeCl31．5g蒸餾水100ml福爾馬林（15%）2．0mlNaOH（1%）1．0ml配好后，當(dāng)日使用，次日效果差，第三日則不宜使用。B液：AgNO32g蒸餾水100ml待AgNO3溶解后，取出10ml備用，向其余的90mlAgNO3中滴入濃NH4ON，使之成

各種霉菌的形態(tài)特征——42010/03/26: 1.3鐮刀菌屬本屬的產(chǎn)毒舞茵主要包括禾谷鐮刀菌、串珠鐮刀菌、雪腐鐮刀菌、三線鐮刀菌、梨孢鐮刀菌、擬枝孢鐮刀菌、尖孢鐮刀菌、茄病鐮刀菌和木賊鐮刀菌等。這些霉菌的代謝產(chǎn)物為單端孢霉烯族化合物、玉米赤霉烯酮和丁烯酸內(nèi)醋等。在馬鈴薯——葡萄糖瓊脂或察氏培養(yǎng)基上氣生菌絲發(fā)達(dá)，高0.5cm—1.0cm或較低為0.3cm—0.5cm，或更低為0.1cm—0.2cm；稀疏的氣生菌絲，甚至*無氣生菌絲而由基質(zhì)菌絲宜接生出粘孢層，內(nèi)含大量的分生孢子。大多數(shù)種小型分生孢子通常假頭狀著生，較少為鏈狀著生，或者假頭狀和鏈

各種霉菌的形態(tài)特征——32010/03/26: 1.2.5展開青霉，異名：尊麻青霉屬于不對(duì)稱青霉組，束狀青霉亞組。在察氏瓊脂培養(yǎng)基上，菌落生長(zhǎng)局限，12d—14d直徑2cm—2.5cm，大多有放射狀溝紋，邊緣陡峭，中央稍凸起，表面呈現(xiàn)粒狀，有些在邊緣有明顯的菌絲束，有的則呈現(xiàn)絮狀，厚密?；揖G色至亮灰色。有的菌系產(chǎn)生近于無色的滲出液，氣味不明顯．反面暗黃色漸變?yōu)槌群稚酥良t褐色，稍擴(kuò)散于培養(yǎng)基中。帚狀枝疏松散開，可具3層一4層分枝，其大小和復(fù)雜程度差別很大，一般40um—50um，極限20um—80um。分生孢子鏈略散開，長(zhǎng)達(dá)50um—100u

PPM1A蛋白的表達(dá)純化及鼠多克隆抗體制備研究——22010/03/24: 2結(jié)果2.1目的蛋白的表達(dá)SDS2PAGE電泳可見,pBEX2PPM1A2His經(jīng)IPTG誘導(dǎo)2、4h后在大腸桿菌中均有表達(dá),4h時(shí)獲得量zui大,空菌誘導(dǎo)4h僅有較弱條帶。且PPM1A的產(chǎn)量隨IPTG的濃度加大變化不大.2.2目的蛋白的純化和復(fù)性誘導(dǎo)后的菌體處理后經(jīng)超速離心,SDS2PAGE電泳發(fā)現(xiàn)大部分目的蛋白存在于沉淀中,主要以包涵體形式存在。用Ni2NTA純化試劑盒處理所得的目的蛋白純度達(dá)90%,質(zhì)量濃度為2.45mg/mL,復(fù)性后目的蛋白質(zhì)量濃度為1.15mg/mL。2.3目的蛋白的W

放療化療患者呼吸道感染病原菌檢測(cè)及結(jié)果分析_22010/03/24: 結(jié)果2.1病原菌分布：從2333例送檢標(biāo)本中共分離出致病菌和條件致病菌1402株,總陽(yáng)性率60.1%（1402/2333）。其中革條件致病菌1402株,總陽(yáng)性率60.1%（1402/2333）。其中革條件致病菌1402株,總陽(yáng)性率60.1%（1402/2333）。其中革條件致病菌1402株,總陽(yáng)性率60.1%（1402/2333）。其中蘭陰性桿菌544株占38.3%,以肺炎克雷伯菌187株、大腸埃希菌162株、銅綠假單胞菌107株為主。革蘭陽(yáng)性球324菌株占23.1%,以金黃色葡萄球菌145株、

2型糖尿病患者并發(fā)院外獲得性敗血癥24例的臨床分析_32010/03/22: 3、討論敗血癥和糖尿病都是常見的疾病,好發(fā)于老年人,隨著人口的老齡化,其發(fā)生率也是逐年上升,給社會(huì)和醫(yī)療帶來了沉重的負(fù)擔(dān)。本組患者占我科收治的糖尿病總?cè)藬?shù)的2.2%（24/1090）,患者年齡大,符合糖尿病和感染性疾病在老年人中常見的特點(diǎn);女性更多見,與國(guó)內(nèi)多家報(bào)道相符。細(xì)菌性敗血癥與真菌性敗血癥不同癥狀上,發(fā)熱程度多為高熱,部分患者可無發(fā)熱。熱型上,典型的馳張熱已不常見,取而代之的熱型是間歇熱和不規(guī)則熱。伴隨癥狀上常有寒戰(zhàn)。血白細(xì)胞計(jì)數(shù)常升高,中性粒細(xì)胞比率也會(huì)上升。臨床癥狀常不典型,因此,在

2型糖尿病患者并發(fā)院外獲得性敗血癥24例的臨床分析_22010/03/22: 2結(jié)果2.1臨床癥狀24例患者中,22例患者有發(fā)熱,其中1例超高熱41.0℃,16例高熱41.1℃,5例中熱38.1～39.0℃。熱型以間歇熱zui為常見14例,其次為不規(guī)則熱8例。伴隨癥狀以寒戰(zhàn)14例多見,未見伴有關(guān)節(jié)腫痛。2.2白細(xì)胞檢查白細(xì)胞總數(shù)正常6例,僅1例中性粒細(xì)胞的比率正常。白細(xì)胞總數(shù)4.9～27.310g/L,平均13.6×10g/L,中性粒細(xì)胞比率62%～93%,平均84.5%。2.3細(xì)菌學(xué)檢查革蘭陽(yáng)性球菌11例,其中人葡萄球菌6例耐甲氧西林金黃色葡萄球菌2例,金黃色葡萄球菌2

BDNF的克隆及pTAT/HA2BDNF重組表達(dá)載體的構(gòu)建—22010/03/19: 2結(jié)果2.1胎腦總RNA的提取及RT2PCR擴(kuò)增目的基因28s、18s及5s3條帶明顯完整且無降解,A260nm/A280nm為1.79,RNA質(zhì)量濃度為950mg/L。第1輪PCR產(chǎn)物在電泳圖中1000bp處有特異性條帶,與預(yù)期的957bp接近,為包含目的基因的大片段;第2輪PCR擴(kuò)增產(chǎn)物行電泳時(shí),在750bp處有特異性條帶,與預(yù)期的763bp相近,為BDNF目的基因片段,見圖3A-B。2.2PTAT/HA2BDNF載體的構(gòu)建及酶切鑒定重組質(zhì)粒PTAT/HA2BDNF經(jīng)XhoⅠ和EcoRⅠ雙酶

BDNF的克隆及pTAT/HA2BDNF重組表達(dá)載體的構(gòu)建—12010/03/19: 腦源性神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)因子brain2derivedneurotro2phicfactor,BDNF）作為神經(jīng)生長(zhǎng)因子家族成員,與神經(jīng)系統(tǒng)發(fā)育有著密切關(guān)系,不僅對(duì)中樞神經(jīng)元的發(fā)育、增殖分化、存活起重要作用,而且對(duì)損傷后神經(jīng)元的修復(fù)與功能重塑也起重要作用。BDNF廣泛分布于中樞及周圍神經(jīng)系統(tǒng),以海馬和皮質(zhì)含量zui高。研究表明BDNF可支持中腦多巴胺能神經(jīng)元存活并向多巴胺能表型分化,并且能保護(hù)多巴胺能神經(jīng)元免受62羥多巴胺62OHDA的神經(jīng)毒素作用。還可通過支持膽堿能細(xì)胞的生存和上調(diào)膽堿乙酰轉(zhuǎn)移酶的表達(dá),

多元納米復(fù)合抗菌殺菌材料西南交通大學(xué)科研處2010/03/17: 化學(xué)藥物和有機(jī)消毒劑的大量使用極易導(dǎo)致細(xì)菌和病毒的變異,并造成嚴(yán)重的后果,如O157大腸桿菌、瘋牛病、SARS、禽流感等微生物事件的發(fā)生,使人們對(duì)生態(tài)環(huán)境和微生物環(huán)境的惡化給地球和人類健康帶來的危險(xiǎn)表示擔(dān)憂,安全無毒的無機(jī)抗菌材料已成為人們的迫切需要。本項(xiàng)目的任務(wù)利用具有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的氧化鋅晶須（簡(jiǎn)寫為:ZnOw）制備技術(shù),并在前期研究工作的基礎(chǔ)上,對(duì)ZnOw、納米材料進(jìn)行抗菌活性處理,將ZnOw與多種納米材料復(fù)合,制備一種安全、持久、、廣譜的抗菌殺菌材料。主要技術(shù)經(jīng)濟(jì)指標(biāo)1、抗菌指標(biāo):多元納米

肝硬化合并感染及抗菌藥物治療的研究現(xiàn)狀實(shí)用——12010/03/17: 細(xì)菌感染是肝硬化常見的并發(fā)癥,也是失代償期肝硬化zui重要的并發(fā)癥之一。肝硬化患者住院時(shí)并發(fā)感染或住院期間并發(fā)院內(nèi)感染的占20%～60%,也是zui主要的死亡原因之一。肝硬化患者大多數(shù)細(xì)菌感染為院內(nèi)獲得性,常見的細(xì)菌感染不僅包括自發(fā)性細(xì)菌性腹膜炎,還有尿路感染、菌血癥、肺炎、結(jié)核、軟組織感染、細(xì)菌性心內(nèi)膜炎等。在感染的細(xì)菌中,多數(shù)為腸道菌群,大腸桿菌是主要的病原菌。許多藥物包括抗菌藥物經(jīng)肝臟代謝而排出體外,肝功能損害時(shí),藥物的體內(nèi)過程受到不同程度的影響。如何科學(xué)合理地應(yīng)用抗菌藥物,有效控制和預(yù)防

宮內(nèi)給藥對(duì)大鼠細(xì)菌性宮內(nèi)感染胎盤IL26與MMP29表達(dá)的影響——22010/03/15: 2、結(jié)果2.1給藥途徑對(duì)胎盤組織IL26表達(dá)的影響陽(yáng)性反應(yīng)主要位于絨毛膜層和其近蛻膜的區(qū)域。給藥后第1、2、3天,胎盤組織IL26表達(dá)水平,各給藥組低于相應(yīng)的對(duì)照組P2.2給藥途徑對(duì)胎盤組織MMP29表達(dá)的影響陽(yáng)性反應(yīng)主要分布于絨毛膜層和靠近蛻膜的區(qū)域。胎盤MMP29表達(dá)水平在給藥后第1、2、3天,各給藥組低于各相應(yīng)對(duì)照組P3討論IL26是一種多能炎性細(xì)胞因子,與炎癥反應(yīng)密切相關(guān)。IL26產(chǎn)生于滋養(yǎng)細(xì)胞,且其受體也存在于滋養(yǎng)細(xì)胞表面,宮內(nèi)感染時(shí),細(xì)菌侵犯羊膜腔,刺激蛻膜、羊膜和絨毛膜細(xì)胞及胎兒產(chǎn)

肝硬化與小腸細(xì)菌過度生長(zhǎng)_12010/03/15: 肝硬化患者由于胃腸道瘀血、膽汁酸和胃酸的相對(duì)缺乏、腸道運(yùn)動(dòng)障礙等因素,可導(dǎo)致腸腔需氧菌增多,結(jié)腸的細(xì)菌移行至空腸和十二指腸,引起小腸細(xì)菌過度生長(zhǎng)。以空腸或十二指腸液細(xì)菌培養(yǎng),菌落數(shù)成人105/ml,小兒104/ml為標(biāo)準(zhǔn)。繼而引起小腸吸收功能障礙,營(yíng)養(yǎng)不良,增加內(nèi)源性感染即菌群從腸道粘膜侵入機(jī)體局部組織或附近體液,由此進(jìn)入血液和身體其他部位和內(nèi)毒素血癥的機(jī)會(huì)。內(nèi)源性感染和內(nèi)毒素血癥又進(jìn)一步加重肝損害。作者對(duì)近年來有關(guān)肝硬化合并SIBO的研究作一綜述。1、肝硬化合并SIBO的微生態(tài)變化人類腸道的微

頭孢拉定膠囊微生物限度檢查方法的建立2010/03/12: 頭孢拉定膠囊為*代頭孢菌素類抗生素,臨床上常用于頭孢拉定敏感細(xì)菌所致的急性咽炎、急性扁桃體炎、中耳炎、支氣管炎、肺炎等呼吸道感染、泌尿生殖道感染及皮膚軟組織感染等。此類抗細(xì)菌藥品在進(jìn)行微生物限度檢查時(shí),需采用適宜的方法消除藥物抗菌活性的干擾,才能保證其檢驗(yàn)方法的科學(xué)性及檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性。本試驗(yàn)用2005年版中國(guó)藥典規(guī)定的3株細(xì)菌、2株真菌,采用不同的方法對(duì)3批頭孢拉定膠囊進(jìn)行了微生物限度檢查方法的驗(yàn)證試驗(yàn),以建立頭孢拉定膠囊的微生物限度檢查方法。1、材料1.1儀器：電子天平；臺(tái)式低速離心機(jī)；集菌

頭孢拉定膠囊微生物限度檢查方法——22010/03/12: 2.4控制菌檢查方法的驗(yàn)證2.4.1取規(guī)定量供試液及10—100CFU大腸埃希菌加入相應(yīng)培養(yǎng)基中,按中國(guó)藥典2005年版一部附錄大腸埃希菌檢查法檢查,為試驗(yàn)組;同法操作,以金黃色葡萄球菌作為陰性對(duì)照菌,為陰性菌對(duì)照組;結(jié)果判斷:陰性菌對(duì)照組不得檢出陰性對(duì)照菌;試驗(yàn)組應(yīng)檢出試驗(yàn)菌,該試驗(yàn)方法成立。2.4.2預(yù)試驗(yàn)取供試液:①10mL、供試液②每10mL離心后的上清液全量分別加至100、200、300mLBL培養(yǎng)基中,并加入10～100CFU大腸埃希菌,試驗(yàn)組未檢出試驗(yàn)菌;取供試液;②每10mL離心

微生物鑒別方法：傳統(tǒng)方法2010/03/10: 1、形態(tài)學(xué)特征（1）細(xì)胞形態(tài)在顯微鏡下觀察細(xì)胞外形大小、形狀、排列等，細(xì)胞構(gòu)造，革蘭氏染色反應(yīng)，能否運(yùn)動(dòng)、鞭毛著生部位和數(shù)目，有無芽孢和莢膜、芽孢的大小和位置，放線菌和真菌的繁殖器官的形狀、構(gòu)造，孢子的數(shù)目、形狀、大小、顏色和表面特征等。（2）群體形態(tài)群體形態(tài)：在一定的固體培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的菌落特征，包括外形、大小、光澤、黏稠度、透明度、邊緣、隆起情況、正反面顏色、質(zhì)地、氣味、是否分泌水溶性色素等；在一定的斜面培養(yǎng)基上生長(zhǎng)的菌苔特征，包括生長(zhǎng)程度、形狀、邊緣、隆起、顏色等；在半固體培養(yǎng)基上經(jīng)穿刺接種

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