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研域(上海)化學(xué)試劑有限公司
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ELISA試劑盒檢測結(jié)果分析方法2021/12/09
任何場景細節(jié)決定成敗,這對于實驗室科研工作者來說也是如此。在ELISA試劑盒實驗中的各項操作細節(jié)有很多,如盡量少用排槍、勤換槍頭,加樣時由低濃度向高濃度加,因為這樣可以減少跳孔的幾率。而整個實驗的尤其關(guān)鍵就是結(jié)果的處理方法了,那么在在今天的技術(shù)文章中,上海研域生物為您帶來的是ELISA試劑盒檢測結(jié)果分析方法。1:ELISA實驗中樣品都要做復(fù)孔或三孔,然后計算每個濃度標(biāo)準(zhǔn)品的平均OD值,復(fù)孔的變異系數(shù)應(yīng)該小于20%。2:平均OD值減去空白孔的OD值。3:制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。以減去本底后的OD值為X軸,標(biāo)
怎樣才能使ELISA試劑盒反響值添加2021/12/03
ELISA試劑盒實驗在必定溫度下的反響時刻并不是反響的結(jié)尾,溫育時刻過短、溫度過低,易致顯色不全;溫育時刻過長、溫度過高,易致非特異性緊附于反響孔周圍,難以清潔*,發(fā)生陰性高值或假陽性反響。要嚴(yán)厲按規(guī)則的溫度和溫育時刻進行。如果參加的酶物過多或加在較高的孔壁上或孔口,也會致使本底添加或假陽性。水浴箱門,嚴(yán)厲控制水浴的溫度為37±0.5。同時,微孔板不可堆疊放置,以確保傳熱均勻,各板的溫度都能敏捷到達平衡。當(dāng)標(biāo)本收集保留不妥發(fā)生溶血時,紅細胞中的血紅蛋白釋放到血清中,血紅蛋白具有過氧化物酶的性質(zhì),
細胞株培養(yǎng)技術(shù)的三大要素2021/11/25
細胞株是用單細胞分離培養(yǎng)或通過篩選的方法,由單細胞增殖形成的細胞群。細胞株的特殊性質(zhì)或標(biāo)志必須在整個培養(yǎng)期間始終存在。細胞株是通過選擇法或克隆形成法從原代培養(yǎng)物或細胞系中獲得的具有特殊性質(zhì)或標(biāo)志的培養(yǎng)細胞。下面上海研域生物分享細胞株培養(yǎng)技術(shù)的三大要素:1、取材細胞株培養(yǎng)的材料主要來源于外科手術(shù)或活檢瘤組織,取材時避免用壞死組織,要挑選瘤細胞集中和活力較好的部位,瘤性轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)或胸腹水是較好的培養(yǎng)材料。取材后盡快培養(yǎng),因故不能立即培養(yǎng)者,可凍存。細胞株的培養(yǎng)方法及凍存方法同前述正常組織。2、成纖維
胎牛血清白蛋白如何提取2021/11/22
胎牛血清白蛋白(BSA),又稱第五組分,是牛血清中的一種白蛋白,包含583個氨基酸殘基,分子量為66.430kDa,等電點為4.7。牛血清白蛋白在生化實驗中有廣泛的應(yīng)用,例如在westernblot中作為Blockingagent;在酶切反應(yīng)緩沖液中加入BSA,通過提高溶液中蛋白質(zhì)的濃度,對酶起保護作用。防止酶的分解和非特異性吸附,能減輕有些酶的變性,能減輕有些不利環(huán)境因素如加熱,表面張力及化學(xué)因素引起的變性。是胎牛血清中的一種球蛋白,一般獲取胎牛血清白蛋白,常常運用的方法是加熱法。下面一起和上
ELISA試劑盒樣本影響因素有哪些2021/11/11
ELISA即酶聯(lián)免疫吸附法,是一種常用的固相酶免疫測定方法。由于ELISA方法簡單,方便,靈敏,特異性強且不需要特殊設(shè)備(只需要酶標(biāo)儀就可以),所以被廣泛應(yīng)用于各種抗原和抗體測定。但是影響ELISA測定的因素有很多,而其操作中需要有一定的技術(shù)要求,如操作手法,環(huán)境,樣本等,有時??梢姷揭恍╁e誤結(jié)果(即假陽性或假陰性)等,上海研域生物為大家解讀常見影響ELISA檢測的因素:樣本的影響。樣本的影響有哪些?1、樣本的保存:在冰箱中保存過久的標(biāo)本,在間接法ELISA測定中會導(dǎo)致本底過深、會造成假陽性;為
ELISA試劑盒實驗有哪些步驟2021/11/04
上海研域生物ELISA試劑盒是一種敏感性高,特異性強,重復(fù)性好的實驗診斷方法。雖然ELISA試劑盒的操作步驟看似簡單易操作,但如果我們在實驗的時候細節(jié)沒做到位的話就會直接影響實驗的效果。所以我們要注重ELISA試劑盒實驗時至關(guān)重要的步驟有哪些呢?今天帶大家一起來了解下:、重要的洗滌:不充分的洗滌會導(dǎo)致差異和高背景,從而帶來不理想的實驗結(jié)果。如果未結(jié)合的材料殘留在微孔板中,那么它會增加背景噪音。有必要的話,可增加洗滌液中的鹽濃度,這會阻止非特異結(jié)合反應(yīng)。如果背景過高,懷疑洗滌不夠時,可以嘗試增加洗
ELISA試劑盒的由來和實驗原理2021/10/28
ELISA試劑盒在國內(nèi)有很多種叫法,大致分為:ELISA檢測試劑盒、ELISAKit、酶聯(lián)免疫試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒、酶聯(lián)免疫分析試劑盒、酶免試劑盒等,其中比較常見的叫法是ELISA檢測試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒等。ELISA試劑盒自從60-70年代問世以來,得到所有科研工作者的認(rèn)可及推崇,在歐美及中國獲得很大的推廣,尤其是國內(nèi)生化領(lǐng)域的長足發(fā)展。Elisa生物試驗是一種敏感性高,特異性強,重復(fù)性好的實驗診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡便,結(jié)果判斷較客觀等因素,已廣泛應(yīng)用在免
ELISA實驗操作六大原則2021/10/21
ELISA試劑盒實驗操作中的原則有哪些呢?今天小編給你整理了六大原則!一、隨機原則:即運用“隨機數(shù)字表”實現(xiàn)隨機化;運用“隨機排列表”實現(xiàn)隨機化;運用計算機產(chǎn)生“偽隨機數(shù)”實現(xiàn)隨機化。盡量運用統(tǒng)計學(xué)知識來設(shè)計自己的實驗,減少外在因素和人為因素的干擾。二、照原則:空白對照組的設(shè)立——只有通過對照的設(shè)立我們才能清楚地看出實驗因素在當(dāng)中所起的作用。當(dāng)某些處理本身夾雜著重要的非處理因素時,還需設(shè)立僅含該非處理因素的實驗組為實驗對照組;歷史或中外對照組的設(shè)立一一這種對照形式應(yīng)慎用,其對比的結(jié)果僅供參考,不
抗體的制備和原理之抗血清的制備方法2021/10/15
抗體的制備方法和原理之抗血清的制備的方法有哪些呢?一、用于免疫的動物作免疫用的動物有哺乳類和禽類,主要為羊、馬、家兔、猴、豬、豚鼠、雞等,實驗室常用者為家兔、山羊和豚鼠等。動物種類的選擇主要根據(jù)抗原的生物學(xué)特性和所要獲得抗血清數(shù)量,如一般制備抗r-免疫球蛋白抗血清,多用家兔和山羊,因動物反應(yīng)良好,而且能夠提供足夠數(shù)量的血清,用于免疫的動物應(yīng)適齡,健壯,無感染性疾患,為雄性,此外還需十分注意動物的飼養(yǎng),以消除動物的個體差異以及在免疫過程中死亡的影響。若用兔,用純種新西蘭兔,一組三只,兔的體重以2~
細胞培養(yǎng)需要哪些環(huán)境因素2021/10/09
細胞培養(yǎng)需要哪些環(huán)境因素?1.無菌環(huán)境無毒和無菌是體外培養(yǎng)細胞的首要條件。細胞在活體內(nèi),解毒系統(tǒng)和免疫系統(tǒng)可抵抗微生物或其他有害物質(zhì)的入侵,但細胞在體外培養(yǎng)的過程中,缺乏機體免疫系統(tǒng)的保護而喪失對微生物的防御能力和對有害物質(zhì)的解毒能力。為保證細胞能在體外環(huán)境中生長繁殖,必須要確保無菌工作區(qū)域、良好的個人衛(wèi)生、無菌試劑和培養(yǎng)基以及無菌操作。常見的微生物污染有支原體、細菌、真菌。支原體無致死毒性,可與細胞長期共存,對細胞有潛在影響,但體積小,不易鑒別,可借助于地衣紅或Hoechst33342染色來進
如何選擇更適合的ELisa試劑盒?2021/09/28
如何選擇更適合的ELisa試劑盒?通常ELisa試劑盒可分為液體單試劑和液體雙試劑,前者特別適用于半自動生化分析儀和小型自動生化分析儀,使用方便,缺點是穩(wěn)定性較差。與單試劑相比,雙試劑提高了抗干擾能力,具有穩(wěn)定性能較好,可消除樣品自身空白等特點。此外還有多項同測組合試劑、濃縮試劑等。一、試劑空白吸光度用蒸餾水做空白,用的空白液加入試劑作為樣品測試,在測試主波長下,記錄測試啟動時的吸光度(A1)和約5分鐘后的吸光度(A2),A2測試結(jié)果即為試劑空白吸光度測定值,應(yīng)符合生產(chǎn)企業(yè)給定范圍。這是判定試劑
科研ELISA試劑盒是干什么用的,又該怎么用呢?2021/09/22
科研ELISA試劑盒是干什么用的,又該怎么用呢?科研ELISA試劑盒即酶聯(lián)吸附試驗,是一種常用的固相酶免疫測定方法。Engvall和Perlmann于1971年應(yīng)用該法進行了IgG定量測定,并命名為"enzymelinkedimmunosorbentassay(ELISA)"??蒲蠩LISA試劑盒免疫測定的目的:1.測定體液中的各種蛋白質(zhì),包括含量極少的蛋白質(zhì)如甲胎蛋白等;2.測定激素,包括小分子量的甾體激素等;3.測定抗生素和藥物;4.測定病原體抗原,HBsAg、HBeAg等;5.利用純化的抗
該如何選擇合適的Elisa試劑盒呢?2021/09/15
由于Elisa試劑盒有著準(zhǔn)確性高、靈敏度高、特異性強的諸多優(yōu)點,深受廣大師生朋友的喜愛。而現(xiàn)試劑盒種類頗多,產(chǎn)品的選擇成為了實驗前的重點事項。那么該如何選擇合適的Elisa試劑盒呢?下面研域生物帶大家了解一下!一、檢測方式如今檢測Elisa試劑盒有許多途徑,我們可以根據(jù)自己的偏好進行選擇。一般Elisa檢測的是酶促反應(yīng)的可溶性產(chǎn)物,抗體上結(jié)合有相應(yīng)的酶,而反應(yīng)體系中添加有相應(yīng)的底物。這種酶促反應(yīng)生成具有特征性的顏色,可以通過分光光度計進行檢測,堿性磷酸酶ap也是一種常用酶。酶可以結(jié)合在一抗上,也
操作高靈敏elisa試劑盒要注意那些問題?2021/09/07
操作高靈敏elisa試劑盒要注意那些問題?1吸取液體時速度不易太快,以免產(chǎn)生氣泡,吸取的量不夠準(zhǔn).2手工洗板時每次加入洗滌液后.應(yīng)靜置15~30s,不要將一個酶標(biāo)孑L中的洗滌液濺入另一酶標(biāo)孔中,防止交叉污染.甩去洗滌液后將酶標(biāo)板放在毛巾或吸水紙上拍干.3底物為TMB,避免與皮膚相接觸.終止液為2tool的濃硫酸具有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸皮膚.4加樣后及時放人孵箱,標(biāo)本較多時,要分批操作.按說明步驟嚴(yán)格控制操作時間,防止孵育時間人為延長,導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周圍,難以清洗*.5作時必須戴手
酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)實驗操作步驟和注意事項2021/08/26
酶聯(lián)免疫吸附(ELISA)實驗操作步驟和注意事項有哪些呢?本文將為你一一解答。一、實驗方法原理本法首先也是用特異性抗體包被于固相載體,經(jīng)洗滌后加入含有抗原之待測樣品,如待檢樣品中有相應(yīng)抗原存在,即可與包被于固相載體上的特異性抗體結(jié)合,經(jīng)保溫孵育洗滌后,即可加入酶標(biāo)記特異性抗體,再經(jīng)孵育洗滌后,加底物顯色進行測定,底物降解的量即為欲測抗原的量。這種方法欲測的抗原必須有兩個可以與抗體結(jié)合的部位,因為其一端要包被于固相載體上的抗體作用,而另一端則要與酶標(biāo)記特異性抗體作用。因此,不能用于分子量小于500
如何避免ELISA試劑盒實驗中的失誤操作2021/08/19
ELISA試劑盒有許多試驗操作步驟,作為新手難免會出現(xiàn)操作失誤的時候。其中許多失誤是因為我們不注重細節(jié)而造成的。其實有很多方法可以減少這種失誤,例如在做試驗時少說話,以避免說話時唾液掉進酶的標(biāo)簽中。當(dāng)然,我們也要學(xué)會找尋自己的問題,找出原因。那么,我們該如何避免ELISA試劑盒試驗中的失誤呢?1、點評試劑的實用性試劑的穩(wěn)定性對準(zhǔn)確度非常重要。在啟用ELISA試劑盒之前,應(yīng)重復(fù)檢測陰性和陽性對照品和樣品,試劑僅在試劑符合要求后才能運用。2、操作前仔細閱讀ELISA試劑盒說明書嚴(yán)格依照說明書要求進行
elisa實驗中的包被要注意哪些問題2021/08/12
通常我們在進行Elisa試劑盒的實驗的時候,需要注意一些問題,例如溫育、顯色、包被等。其中,包被是需特別注意的一個問題,直接關(guān)系到實驗的效果。那么在實驗的時候包被要注意哪些問題呢?首先我們要知道什么是包被。在ELISA試劑盒實驗時將抗原或抗體固定在過程稱為包被(coating)。蛋白質(zhì)與聚苯乙烯固相載體是通過物理吸附結(jié)合的,靠的是蛋白質(zhì)分子結(jié)構(gòu)上的疏水基團與固相載體表面的疏水基團間的作用。這種物理吸附是非特異性的,受蛋白質(zhì)的分子量、等電點、濃度等的影響。大分子蛋白質(zhì)較小分子蛋白質(zhì)通常含有更多的疏
如何生成更可靠的免疫ELISA表型數(shù)據(jù)2021/08/05
ELISA數(shù)據(jù)中雖然表面CD分子仍是用于免疫表型的常用的標(biāo)記,但常規(guī)平行檢測的CD分子卻有所增加。研究者把其它細胞表面的蛋白和細胞內(nèi)標(biāo)記物加入到免疫表型分析中,已經(jīng)成為標(biāo)準(zhǔn)做法。因為這些進展不可避免地使得研究設(shè)計更加具有挑戰(zhàn)性,我們咨詢了一組專家來幫助您生成更可靠的免疫表型數(shù)據(jù)。研究免疫表型時,其復(fù)雜性是不同的。從基礎(chǔ)研究到臨床監(jiān)測,研究者對這些細胞進行免疫表型分析,有很多原因。Sartorius細胞分析測試開發(fā)經(jīng)理MarkCarter指出,免疫表型研究的范圍從識別單一表型到復(fù)雜的多參數(shù)應(yīng)用,比
Elisa試劑盒試驗原理2021/08/03
Elisa試劑盒運用雙抗體夾心法測定標(biāo)本中大白鼠類風(fēng)濕因子(RF)水平。用純化的大白鼠類風(fēng)濕因子(RF)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中順次加入類風(fēng)濕因子(RF),再與HRP符號的類風(fēng)濕因子(RF)抗體結(jié)合,構(gòu)成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗刷后加底物TMB顯。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍,并在酸的效果下轉(zhuǎn)化成終究的黃。彩的深淺和樣品中的類風(fēng)濕因子(RF)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),經(jīng)過規(guī)范曲線計算樣品中大白鼠類風(fēng)濕因子(RF)濃度。Eli
選擇ELISA試劑盒時應(yīng)該考慮的6個要素2021/07/21
對于新手而言,合理選擇ELISA試劑盒至關(guān)重要,只有選對了試劑盒,才能確保試驗的成功。下面,我們來介紹下選擇ELISA試劑盒時應(yīng)該考慮的6個要素,供大家借鑒參考!1、美譽度一個品牌不光要有zhi名度,更重要的是美譽度。通過行業(yè)調(diào)查公司以及網(wǎng)絡(luò),相關(guān)宣傳資料等可以找到美譽度高的ELISA試劑盒供應(yīng)商,這個反映的不僅是產(chǎn)品質(zhì)量的問題,對供應(yīng)商的售前售后服務(wù)也是一個非常嚴(yán)格的檢驗。目前上主要的ELISA供應(yīng)商有R&D細胞因子方面的試劑盒,Bender粘附分子方面的試劑盒,Cayman花生四烯酸類產(chǎn)品的
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