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elisa試劑盒使用應(yīng)當(dāng)注意哪些事項(xiàng)？2014/12/05: elisa試劑盒使用注意事項(xiàng)：1、Elisa試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標(biāo)包被板開封后如未用完，板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2、濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出，稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶，洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3、各步加樣均應(yīng)使用加樣器，并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性，以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi)，如標(biāo)本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。4、請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線，做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過高(樣本OD值大于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔OD值的)，請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(shù)(n倍)后再測(cè)定

實(shí)驗(yàn)測(cè)量誤差的可能因素2014/12/03: 上海恒遠(yuǎn)十年資深技術(shù)經(jīng)驗(yàn)總結(jié)造成誤差的可能來源有以下幾個(gè)方面：1．各種儀器：設(shè)備的準(zhǔn)確性、穩(wěn)定性、效率以及被污染等情況帶來的誤差。如：①由于放射性測(cè)量?jī)x器的穩(wěn)定性、效率、樣品試管的材料和均勻性及被測(cè)物的放射性強(qiáng)度等原因。②由于樣品的自吸收，本底校正，測(cè)定時(shí)間，可能的污染等原因。③在試驗(yàn)室中所有的移液管、微量取樣器以及天平的刻度、校準(zhǔn)和使用方法等原因。④由于反應(yīng)試管、移液管以及測(cè)定用試管等表面清潔度和所引起的不同吸附等原因都可以對(duì)測(cè)定結(jié)果帶來誤差。2．試劑的純度、質(zhì)量和穩(wěn)定性的影響也是造成誤差的重

ELISA試劑盒的操作注意事項(xiàng)有哪10項(xiàng)2014/11/26: 上海恒遠(yuǎn)公司提供的試劑盒具有、靈敏、特異的抗體，穩(wěn)定的重復(fù)性和可靠性，吸附性能好，空白值低，適用血清、血漿、組織勻漿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標(biāo)本類型，可檢測(cè)指標(biāo)齊全：細(xì)胞因子檢測(cè)、心肌梗塞檢測(cè)、內(nèi)分泌檢測(cè)、肝纖維化檢測(cè)、自身免疫檢測(cè)、腫瘤標(biāo)志物檢測(cè)、傳染病檢測(cè)、特種蛋白檢測(cè)、無放射性危害的優(yōu)點(diǎn)，因而多年來廣泛應(yīng)用于各高校、醫(yī)院、血站和科研機(jī)構(gòu)的實(shí)驗(yàn)室中。由于ELISA實(shí)驗(yàn)的影響因素較多，在實(shí)際工作中必須操作規(guī)范、仔細(xì)，避免和排除各種因素的影響，使之得到準(zhǔn)確可靠的檢驗(yàn)結(jié)果。大鼠ELISA試

我司技術(shù)給客戶解答：ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因分析2014/11/04: 引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有：①標(biāo)本因素；②試劑因素；③操作因素。假是zui常用的ELISA標(biāo)本，血漿一般可視為與血清同等的標(biāo)本，標(biāo)本引起的假陽性和假陰性結(jié)果主要是干擾性物質(zhì)所致，分為內(nèi)源性物質(zhì)和外源性物質(zhì)兩種：1．內(nèi)源性物質(zhì)有人認(rèn)為大約40%的人血清標(biāo)本中含有非特異性干擾物質(zhì)，可以不同程度影響檢測(cè)結(jié)果。常見的干擾物質(zhì)有：類風(fēng)濕因子、補(bǔ)體、嗜異性抗體、嗜打靶歸來自身抗體、醫(yī)源性誘導(dǎo)的抗鼠Ig(s)抗體、交叉反應(yīng)物質(zhì)和其它物質(zhì)等。（1）類風(fēng)濕因子人血清中IgM、IgG型類風(fēng)濕因子（RF）

案例分析：為什么血液離心后成淡紅色2014/10/28: 來自廣西大學(xué)的趙老師：zui近在做豬的實(shí)驗(yàn)，趙老師按照文獻(xiàn)上看到的血清、血漿提取操作方法發(fā)現(xiàn)有的血液離心后，上層液為淡紅色，有的很清涼，但每次采血的方法和步驟都是參考文獻(xiàn)的一樣。麻煩貴公司技術(shù)人員可否去指導(dǎo)分析具體原因，有什么辦法可以得到澄清透明的血清？？我公司技術(shù)人員*時(shí)間去答：取血時(shí)豬是否有掙扎，注射器吸液、放液的速度過快、與抗凝劑的混合手法、抗凝劑的滲透壓都可能照成溶血。與此同時(shí)，技術(shù)指導(dǎo)ELISA實(shí)驗(yàn)血清、血漿樣本正確采集方法：檢測(cè)的樣本，及時(shí)儲(chǔ)存在4℃?zhèn)溆?。?duì)于隔天再檢測(cè)的樣本，及時(shí)分

恒遠(yuǎn)十年資深技術(shù)與您分享“WB內(nèi)參抗體選擇原則”2014/10/21: 內(nèi)參抗體種類很多，比如β-actin、β-tubunlin、GAPDH、LaminB等，那么針對(duì)自己的實(shí)驗(yàn)，我們?cè)撊绾芜x擇呢?下面恒遠(yuǎn)技術(shù)簡(jiǎn)單介紹下選擇內(nèi)參抗體應(yīng)遵循的原則：一.樣本種屬來源：首先要考慮的就是實(shí)驗(yàn)樣本來源于什么物種。1、哺乳動(dòng)物的組織或者細(xì)胞樣本，通常選擇β-actin、β-tubulin、GAPDH、LaminB、HistoneH3、Na,Katpase等。2、植物來源實(shí)驗(yàn)樣本，則可以選擇plantactin、Rubisco等。3、其他來源樣本研究較少，所以就應(yīng)該參照文獻(xiàn)報(bào)導(dǎo)，

選對(duì)您實(shí)驗(yàn)真正所需的“膠原蛋白”2014/10/15: 中文名稱：膠原蛋白CAS：9007-34-5規(guī)格：BR，I型，大分子包裝：5G、10G、50G英文名稱：Collagen其他名稱：膠原水解物；骨膠水解物；骨膠原水解物；膠原CAS號(hào)：9007-34-5分子量：～30萬道爾頓類型：TypeI活力：≥500u/mgItfundamentalstructuralunitisatropo-collagen,amolecularrodabout2600inlengthａnd15ASindiameterwithamolecularweightof300000

正確選擇您所需要的細(xì)胞培養(yǎng)板2014/10/11: 一、細(xì)胞培養(yǎng)板依底部形狀的不同可分為平底和圓底(U型和V型);培養(yǎng)孔的孔數(shù)有6、12、24、48、96、384孔等;根據(jù)材質(zhì)的不同有Terasaki板和普通細(xì)胞培養(yǎng)板。具體選擇時(shí)根據(jù)培養(yǎng)細(xì)胞的類型、所需培養(yǎng)體積及不同的實(shí)驗(yàn)?zāi)康亩?。平底和圓底(U型和V型)培養(yǎng)板的區(qū)別和選擇：1）貼壁細(xì)胞一般用平底培養(yǎng)板2)懸浮型細(xì)胞的培養(yǎng)一般用V型3）U型培養(yǎng)板亦多用于培養(yǎng)懸浮型細(xì)胞大部分細(xì)胞培養(yǎng)都用平底培養(yǎng)板，便于鏡下觀測(cè)、有明確的底面積、細(xì)胞培養(yǎng)液面高度相對(duì)一致，還便于MTT檢測(cè)。圓底培養(yǎng)板主要用于同位素?fù)?

本周探討--細(xì)胞培養(yǎng)失敗的主要原因？？？2014/10/09: 消毒和滅菌微生物污染是造成細(xì)胞培養(yǎng)失敗的主要原因（一）物理消毒法1.紫外線消毒:紫外線是一種低能量的電磁輻射，可殺死多種微生物。革蘭陰性菌zui為敏感，其次是陽性菌，再次為芽孢，真菌孢子的抵抗力zui強(qiáng)。紫外線的直接作用是通過破壞微生物的核酸及蛋白質(zhì)等而使其滅活，間接作用是通過紫外線照射產(chǎn)生的臭氧殺死微生物。直接照射培養(yǎng)室消毒，用法簡(jiǎn)單，效果好。紫外燈的消毒效果同紫外燈的輻射強(qiáng)度和照射劑量呈正相關(guān)，輻射強(qiáng)度隨燈距離增加而降低，照射劑量和照射時(shí)間呈正比。因此紫外燈同被照射物的距離和照射時(shí)間要適合。

小牛血清使用注意事項(xiàng)以及正確的凍存方法2014/09/25: 使用小牛血清時(shí)的注意事項(xiàng)具體如下：1.供血的新生小牛必須是健康牛的產(chǎn)仔，并在產(chǎn)后24小時(shí)內(nèi)抽血，此期間不得吸取母乳。2.以無菌操作自頸動(dòng)脈放血，并在無菌條件下分離血清及濾菌，全過程在36小時(shí)內(nèi)完成。經(jīng)濾菌的血清登一20IC保存。3.血清使用前需做細(xì)蔭、支原體培養(yǎng)及內(nèi)毒素測(cè)定，在確實(shí)無污染的情況下方可使用。4.每批小牛血清測(cè)定總蛋白含量并分別配成10%,20%,25%于墓礎(chǔ)培養(yǎng)墓和HAT培養(yǎng)墓中，對(duì)骨髓瘤細(xì)胞和雜交瘤細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，觀察小牛血清對(duì)瘤細(xì)胞和融合細(xì)胞的細(xì)胞毒性。若在20%濃度小牛血清情況

根據(jù)歷史起源來談“植物組織培養(yǎng)應(yīng)用前景”2014/09/23: 19世紀(jì)30年代，德國(guó)植物學(xué)施萊登和德國(guó)動(dòng)物學(xué)家施旺創(chuàng)立了細(xì)胞學(xué)說，根據(jù)這一學(xué)說，如果給細(xì)胞提供和生物體內(nèi)一樣的條件，每個(gè)細(xì)胞都應(yīng)該能夠獨(dú)立生活；1902年，德國(guó)植物學(xué)家哈伯蘭特細(xì)胞性的理論是植物組培的理論基礎(chǔ)。1958年，一個(gè)振奮人心的消息從美國(guó)傳向世界各地，美國(guó)植物學(xué)家斯蒂瓦特等人，用胡蘿卜的嫩皮的細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，終于得到了完整植株，并且這一植株能夠開花結(jié)果，證實(shí)了哈伯蘭特在五十多年前關(guān)于細(xì)胞的預(yù)言。植物組培的簡(jiǎn)單過程如下：剪接植物器官或組織——經(jīng)過脫分化（也叫去分化）形成愈傷組織——再經(jīng)過再

根據(jù)歷史起源來談“植物組織培養(yǎng)應(yīng)用前景2014/09/23: 19世紀(jì)30年代，德國(guó)植物學(xué)施萊登和德國(guó)動(dòng)物學(xué)家施旺創(chuàng)立了細(xì)胞學(xué)說，根據(jù)這一學(xué)說，如果給細(xì)胞提供和生物體內(nèi)一樣的條件，每個(gè)細(xì)胞都應(yīng)該能夠獨(dú)立生活；1902年，德國(guó)植物學(xué)家哈伯蘭特細(xì)胞性的理論是植物組培的理論基礎(chǔ)。1958年，一個(gè)振奮人心的消息從美國(guó)傳向世界各地，美國(guó)植物學(xué)家斯蒂瓦特等人，用胡蘿卜的嫩皮的細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，終于得到了完整植株，并且這一植株能夠開花結(jié)果，證實(shí)了哈伯蘭特在五十多年前關(guān)于細(xì)胞的預(yù)言。植物組培的簡(jiǎn)單過程如下：剪接植物器官或組織——經(jīng)過脫分化（也叫去分化）形成愈傷組織——再經(jīng)過再

ELISA法細(xì)胞凋亡檢測(cè)操作步驟2014/09/16: 細(xì)胞凋亡的發(fā)生是由于鈣-鎂依賴性核酸酶進(jìn)入核小體間切割DNA,產(chǎn)生180bp～200bp或其倍數(shù)的核小體片段。而核小體由于與組蛋白H2A、H2B、H3和H4形成緊密復(fù)合物而不被核酸內(nèi)切酶切割。采用雙抗體夾心酶免疫法，應(yīng)用小鼠抗DNA和抗組蛋白的單克隆抗體，與核小體片段形成夾心結(jié)構(gòu)，可特異性檢測(cè)細(xì)胞溶解物中的核小體片段。常見樣本以及基本操作方法：1.收集細(xì)胞，離心后，用200µl溶細(xì)胞緩沖液重新懸浮，室溫下作用30min。（培養(yǎng)細(xì)胞的上清液、血漿和血清都可作為檢測(cè)樣本)2.取樣品離心后(1000r

大鼠胰島素ELISA試劑盒相關(guān)介紹2014/09/09: 胰島素是由胰島B細(xì)胞受內(nèi)源性或外源性物質(zhì)如葡萄糖、乳糖、核糖、精氨酸、胰高血糖素等的刺激而分泌的一種蛋白質(zhì)激素。胰島素是機(jī)體內(nèi)*降低血糖的激素，同時(shí)促進(jìn)糖原、脂肪、蛋白質(zhì)合成。大鼠胰島素ELISA試劑盒是一種酶聯(lián)免疫吸附技術(shù)，應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中大鼠胰島素（INS）水平。用純化的大鼠胰島素（INS）抗體包被微孔板，制成固相抗體，往包被單抗的微孔中依次加入胰島素（INS），再與HRP標(biāo)記的胰島素（INS）抗體結(jié)合，形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物，經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶

探討“ELISA實(shí)驗(yàn)重復(fù)性不佳及出現(xiàn)白板、陽性對(duì)照不顯色”2014/09/03: （一）、重復(fù)性不佳可能原因及解決方法？1.樣品數(shù)量多少不一，加樣時(shí)間有長(zhǎng)有短。重復(fù)某一樣品時(shí)，加樣時(shí)間盡可能與*次接近2.保溫時(shí)間不一致，洗滌條件不一致，操作人員不一致。重復(fù)測(cè)定標(biāo)本，操作條件、人員等應(yīng)盡可能與上次保持一致，以排除這些因素造成的不一致的可能性。3.加樣量不一致。樣本稀釋前應(yīng)充分混勻，盡可能使用同一移液器并裝緊吸嘴。。（二）出現(xiàn)白板，陽性對(duì)照不顯色可能原因及解決方法？1.顯色液變質(zhì)更換新的顯色液2.洗滌液配置有誤請(qǐng)按說明書所示稀釋倍數(shù)配制。3.未加酶結(jié)合物而認(rèn)為已加入注意不要漏加4

在同一條件下做WB實(shí)驗(yàn)為什么一張膜顯影，一張膜未顯影？2014/09/01: 近期恒遠(yuǎn)經(jīng)常接到客戶的：同一條件下，除了測(cè)的指標(biāo)不一樣，為什么有張膜顯影，有張未顯影？？？上海恒遠(yuǎn)技術(shù)分析：在同一條件下，如果一張膜顯影，一張膜未顯影，可以逐一查找原因：1、你是否兩張膜上都設(shè)有陽性對(duì)照？如果有，一張膜有信號(hào)，一張沒信號(hào)，可能是操作過程中有問題（可能原因是（1）、你結(jié)合底物會(huì)不會(huì)有問題，即沒有充分結(jié)合好，或者結(jié)合時(shí)間太短，（2）、你要確定兩張膜都是用新的底物反應(yīng)液，（3）、就是沒有信號(hào)的膜會(huì)不會(huì)壓片時(shí)間太短，如果使用儀器掃片就不存在這種問題，）所以原因比較多，你只能逐一排查。2、

ELISA實(shí)驗(yàn)加樣步驟不當(dāng)可能會(huì)影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果及解決方法2014/08/18: ELISA實(shí)驗(yàn)以靈敏度較高、特異性較好的特點(diǎn)在臨床跟科研得到了廣泛的應(yīng)用，但操作中的各個(gè)環(huán)節(jié)操作不當(dāng)可能會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)的檢測(cè)結(jié)果影響較大，如不注意，有可能導(dǎo)致顯色不全、花板等結(jié)果?，F(xiàn)我公司技術(shù)人員將加樣操作中常出現(xiàn)問題的原因及解決辦法總結(jié)于下，以便給同行帶來一些啟發(fā)，提高試驗(yàn)質(zhì)量：加樣可能原因：1)血清或血漿標(biāo)本分離不好即進(jìn)行加樣；2)手工操作中，加樣板過多造成加樣后放入孵箱前等待時(shí)間過長(zhǎng)(特別是室內(nèi)溫度較高時(shí))；3)加完標(biāo)本再加酶試劑時(shí)酶濺出孔外。解決辦法：1)標(biāo)本為血清：將血液先自然存放1-2小時(shí)

上海恒遠(yuǎn)為您講解：PCR過程Z常見的三種檢測(cè)模式2014/08/14: 定量PCR（PolymeraseChainReaction）技術(shù)有廣義概念和狹義概念。廣義概念的定量PCR技術(shù)是指以外參或內(nèi)參為標(biāo)準(zhǔn)，通過對(duì)PCR終產(chǎn)物的分析或PCR過程的監(jiān)測(cè)，進(jìn)行PCR起始模板量的定量。狹義概念的定量PCR技術(shù)（嚴(yán)格意義的定量PCR技術(shù)）是指用外標(biāo)法（熒光雜交探針保證特異性）通過監(jiān)測(cè)PCR過程（監(jiān)測(cè)擴(kuò)增效率）達(dá)到定量起始模板數(shù)的目的，同時(shí)以內(nèi)對(duì)照有效排除假陰性結(jié)果（擴(kuò)增效率為零）。PCR過程的監(jiān)測(cè)有多種檢測(cè)模式。zui常用的有三種檢測(cè)模式：⑴SYBRGreenI檢測(cè)模式。溫度

上海恒遠(yuǎn)公司ELISA試劑盒檢測(cè)方法2014/08/07: 上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司總部設(shè)在上海，公司專業(yè)經(jīng)營(yíng)生命科學(xué)領(lǐng)域的研究試劑、實(shí)驗(yàn)室消耗品、ELISA試劑盒等，我們致力于向國(guó)內(nèi)外生命科學(xué)研究人員提供*的產(chǎn)品和技術(shù)服務(wù)。首先讓我司的王總來談一下市場(chǎng)。首先R&D和TSZ等一些的ELISA試劑盒還是很值得信賴的，也得到了市場(chǎng)的認(rèn)可，特別是R&D的盒子，我們賣的很好，就是價(jià)格好貴，經(jīng)費(fèi)不是很充裕的實(shí)驗(yàn)室難消費(fèi)的起。國(guó)內(nèi)的廠家，質(zhì)量在靈敏度上和R&D的盒子還是有很大差距，但是有一點(diǎn)是可以肯定的，盒子反映的結(jié)果是公正客觀的。還有一個(gè)缺點(diǎn)就是廠家可供選擇的盒子

恒遠(yuǎn)為您講解人P選擇素ELISA試劑盒操作中常見的問題及解答2014/07/30: 人P選擇素ELISA試劑盒操作過程中常見的問題:1．溫育?溫育是ELISA測(cè)定中影響測(cè)定成敗zui為關(guān)鍵的一個(gè)因素。ELISA作為一種固相免疫測(cè)定，抗原抗體的結(jié)合反應(yīng)在固相上進(jìn)行，要使液相中的抗原或抗體與固相上的特異抗體或抗原*結(jié)合，必須在一定的溫度條件下反應(yīng)一定的時(shí)間。溫育所需時(shí)間與溫度成反比，即溫度越高，則所需時(shí)間相對(duì)較短。zui為常用的溫育溫度有37℃和室溫，其次是43℃和2～8℃。一些操作者，擅自改變說明書操作，使用自己喜歡的溫育時(shí)間和溫育溫度，這樣造成一些不必要的麻煩。因?yàn)椋煌噭┖?

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