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上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第15年
ELISA常見(jiàn)問(wèn)題:如何確定樣本的稀釋倍數(shù)2015/09/16
ELISA檢測(cè)系統(tǒng)可謂是免疫學(xué)反應(yīng)應(yīng)用到科研生產(chǎn)中zui為靈敏的技術(shù)手段??墒窃谛吕鲜植僮鬟^(guò)程中總是會(huì)出現(xiàn)或大或小的問(wèn)題,常見(jiàn)問(wèn)題有:1.同一個(gè)試劑盒,每次檢測(cè)樣品時(shí),均需要帶標(biāo)準(zhǔn)品嗎?能否節(jié)約?2.如何確定樣本的稀釋倍數(shù)?3.使用標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋液來(lái)稀釋嗎?我司資深技術(shù)統(tǒng)一做出如下答復(fù):1:嚴(yán)格意義上,每次檢測(cè)樣品都要帶標(biāo)準(zhǔn)品,擬合標(biāo)準(zhǔn)曲線。原因是每次檢測(cè)都要受不同條件的影響,比如人為操作,環(huán)境的變化等。2:不能節(jié)約,建議您盡量把樣本同時(shí)檢測(cè)3:一般來(lái)說(shuō),ELISA是不需要稀釋的,除非你的測(cè)定值超
上海恒遠(yuǎn)與您分享標(biāo)本收集器材和注意事項(xiàng)2015/09/06
在ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中,標(biāo)本的收集是一項(xiàng)很重要的步驟!在標(biāo)本的收集中需用什么器材?需注意哪些事項(xiàng)?上海恒遠(yuǎn)生物與您分享!1.收集血液的試管應(yīng)為一次性的無(wú)熱原,無(wú)內(nèi)毒素試管。2.血漿抗凝劑推薦使用EDTA。避免使用溶血,高血脂標(biāo)本。3.標(biāo)本應(yīng)清澈透明,懸浮物應(yīng)離心去除。4.標(biāo)本收集后若不及時(shí)檢測(cè),請(qǐng)按一次使用量分裝,凍存于-20℃,-70℃電冰箱內(nèi),避免反復(fù)凍融,3-6月內(nèi)檢測(cè)。5.如果您的樣本中檢測(cè)物濃度高于標(biāo)準(zhǔn)品zui高值,請(qǐng)根據(jù)實(shí)際情況,做適當(dāng)倍數(shù)稀釋(建議做預(yù)實(shí)驗(yàn),以確定稀釋倍數(shù))。注意
使用ELISA試劑盒的注意事項(xiàng)2015/08/31
上海恒遠(yuǎn)供應(yīng)各種種屬ELISA試劑盒。種類(lèi)齊全!對(duì)于ELISA試劑盒的儲(chǔ)存應(yīng)該按照標(biāo)簽說(shuō)明書(shū),使用前應(yīng)該恢復(fù)到室溫,稀釋過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品要丟棄,不允許保存,再者,試驗(yàn)中,不用的半條應(yīng)立即放回包裝袋中,秘密保存,避免編制。1.試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。2.實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,ELISA試劑盒密封保存,以免變質(zhì)。3.不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。4.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻ELISA
ELISA結(jié)果造成假陽(yáng)性的原因何在2015/08/27
上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司技術(shù)明確表明ELISA實(shí)驗(yàn)樣本要求:血清標(biāo)本宜在新鮮時(shí)檢測(cè),嚴(yán)重溶血標(biāo)本禁用。一般說(shuō)來(lái),在5天內(nèi)測(cè)定的血清標(biāo)本可放置于4℃,標(biāo)本在冰箱中保存時(shí)間過(guò)長(zhǎng)導(dǎo)致血清IgG聚合。超過(guò)一周測(cè)定的需-20℃保存。凍結(jié)血清融解后,蛋白質(zhì)局部濃縮,分布不均,應(yīng)充分混勻并避免產(chǎn)生氣泡。混濁或有沉淀的血清標(biāo)本應(yīng)先離心或過(guò)濾,澄清后再檢測(cè)。反復(fù)凍融會(huì)使抗體效價(jià)跌落,所以測(cè)抗體的血清標(biāo)本如需保存作多次檢測(cè),宜少量分裝冰存;使用一次性玻璃試管或真空管采血管;并使用非抗凝標(biāo)本,肝素抗凝血漿會(huì)增加OD值
恒遠(yuǎn)帶你了解培養(yǎng)基2015/08/26
培養(yǎng)基(Medium)是供微生物、植物和動(dòng)物組織生長(zhǎng)和維持用的人工配制的養(yǎng)料,一般都含有碳水化合物、含氮物質(zhì)、無(wú)機(jī)鹽(包括微量元素)以及生長(zhǎng)素和水等。有的培養(yǎng)基還含有抗菌素、色素、激素和血清。培養(yǎng)基分類(lèi):按其組成成分分成三類(lèi):①天然培養(yǎng)基,全由天然產(chǎn)物組成,例如含淀粉、黃豆餅粉等天然物質(zhì);②復(fù)合培養(yǎng)基,由部分天然產(chǎn)物和部分已知成分的化合物組成,例如其中的氮源既有天然物質(zhì)黃豆餅粉,又有合成化合物硫酸銨;③合成培養(yǎng)基,全由已知成分的化合物所組成,例如以純的碳水化合物或碳?xì)浠衔餅樘荚?,以銨鹽為氮源。
選擇我司ELISA試劑盒的優(yōu)勢(shì)2015/08/21
現(xiàn)市場(chǎng)上ELISA試劑盒越來(lái)越多,數(shù)不勝數(shù)!也給科研人員帶來(lái)了選擇的難題,ELISA試劑盒的質(zhì)量直接影響其實(shí)驗(yàn)結(jié)果,因而買(mǎi)ELISA試劑盒就要選擇一個(gè)有保障的公司是非常有必要的!我司ELISA試劑盒,擁質(zhì)保價(jià)廉服務(wù)三重優(yōu)勢(shì)!優(yōu)勢(shì)如下:優(yōu)勢(shì)一:用途1.將酶催化反應(yīng)的放大作用和抗原抗體親和反應(yīng)的高度專(zhuān)一性、特異性相結(jié)合,以酶標(biāo)記的抗原或抗體作為主要試劑進(jìn)行免疫測(cè)試,所以具有很高的靈敏度。2.其抗原抗體反應(yīng)具有高度的特異性。3.實(shí)現(xiàn)了在細(xì)胞或亞細(xì)胞水平上示蹤抗原或抗體的所在部位,或在微克、甚至納克水平
標(biāo)準(zhǔn)曲線圖該怎樣選擇方程去擬合2015/08/19
ELISA試劑盒標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制選擇什么方程去擬合?做校準(zhǔn)曲線時(shí),曲線擬合類(lèi)型是選擇線性還是二次方程(曲線),二者哪一個(gè)更?這兩個(gè)問(wèn)題幾乎是剛開(kāi)始接觸所有做ELISA實(shí)驗(yàn)的新手必問(wèn)的問(wèn)題。因?yàn)闃?biāo)準(zhǔn)曲線做的好與壞會(huì)直接影響到實(shí)驗(yàn)的結(jié)果,甚至是關(guān)系到實(shí)驗(yàn)的成敗。恒遠(yuǎn)技術(shù)為您總結(jié)以下要點(diǎn):在S曲線的低濃度部門(mén)可以用乘冪方程很好的擬合,中低濃度部門(mén)可以用直線方程,中間部門(mén)可用對(duì)數(shù)方程,而中后段可用四參數(shù)。免疫檢測(cè)時(shí)尺度點(diǎn)(可以是倍比稀釋的,也可以不是)濃度假如和相應(yīng)的吸光度(OD)值假如能夠呈現(xiàn)直線關(guān)系當(dāng)
ELISA試劑盒測(cè)定影響因素之一操作因素2015/08/12
ELISA方法被廣泛用于各種抗原和抗體測(cè)定。但ELISA測(cè)定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在臨床檢驗(yàn)中如果處理不當(dāng),會(huì)出現(xiàn)一些錯(cuò)誤結(jié)果。引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有:(1)標(biāo)本因素;(2)操作因素;(3)試劑因素;上海恒遠(yuǎn)就操作因素對(duì)ELISA測(cè)定的影響做如下討論:操作因素1溫育的影響溫育是影響ELISA測(cè)定結(jié)果的關(guān)鍵因素。溫育時(shí)間不夠,弱陽(yáng)性標(biāo)本檢測(cè)不出;溫育溫度不夠,弱陽(yáng)性標(biāo)本也難以檢出。2洗板的影響洗板對(duì)ELISA測(cè)定來(lái)說(shuō)也是關(guān)鍵步驟。洗板分手工洗板和機(jī)器洗板,一
掌握兩點(diǎn)抗體選擇不再是難題2015/08/07
不同的實(shí)驗(yàn)使用的抗體也大為不同,根據(jù)試驗(yàn)應(yīng)用的類(lèi)型、樣本蛋白的結(jié)構(gòu)性質(zhì)、樣本的種屬、抗體宿主的種類(lèi)以及抗體的標(biāo)記和檢測(cè)具體情況選擇zui符合實(shí)驗(yàn)實(shí)際操作情況的單抗和二抗。恒遠(yuǎn)總結(jié)一下兩點(diǎn)供廣大科研愛(ài)好者參考。(一)動(dòng)物的選擇目前應(yīng)用zui廣的是小白鼠和大白鼠,尤以小白鼠為好。就品系而言以Balb/c小白鼠應(yīng)用zui廣,因?yàn)樗械男“资蠊撬枇鱿稻鶑腂alb/c小白鼠系誘導(dǎo)出來(lái)。Balb/c系小白鼠必須用純系的,雌雄均可,以8~12周齡為宜。大白鼠也可,能產(chǎn)生較多量的單克隆抗體。現(xiàn)在已經(jīng)在小鼠雜交瘤
ELISA試劑盒檢測(cè)的影響因素有哪些2015/08/03
ELISA方法被廣泛用于各種抗原和抗體測(cè)定。但ELISA測(cè)定中影響因素較多,而且其操作中有一定的技術(shù)要求,在臨床檢驗(yàn)中如果處理不當(dāng),會(huì)出現(xiàn)一些錯(cuò)誤結(jié)果(即假陽(yáng)性或假陰性結(jié)果)。引起ELISA測(cè)定錯(cuò)誤結(jié)果的原因主要有:(1)標(biāo)本因素;(2)操作因素;(3)試劑因素;本文主要就操作因素對(duì)ELISA測(cè)定的影響做如下討論:操作因素1、溫育的影響溫育是影響ELISA測(cè)定結(jié)果的關(guān)鍵因素。溫育時(shí)間不夠,弱陽(yáng)性標(biāo)本檢測(cè)不出;溫育溫度不夠,弱陽(yáng)性標(biāo)本也難以檢出。2、洗板的影響洗板對(duì)ELISA測(cè)定來(lái)說(shuō)也是關(guān)鍵步驟。
技術(shù)在線解答浙江大學(xué)學(xué)生ELISA洗板操作相關(guān)問(wèn)題2015/07/29
七月初,浙江大學(xué)張同學(xué)由學(xué)校實(shí)驗(yàn)室的其他同學(xué)介紹與我司取得。并訂購(gòu)了人MDA、GSH-PX、SOD、TAOCELISA試劑盒。星期一老師做了人GSH-PXelisa實(shí)驗(yàn)。介紹自己在洗板操作過(guò)程遇到棘手問(wèn)題,麻煩我司技術(shù)給她提供解決處理方法及建議。主要問(wèn)題如下:?jiǎn)栴}一:說(shuō)明書(shū)上說(shuō)洗板時(shí)要把孔里的水甩干,可我做的時(shí)候,無(wú)論我怎么拍,孔底還是有殘留液體,請(qǐng)問(wèn)這對(duì)試驗(yàn)有沒(méi)有影響?或著有沒(méi)有別的什么好的辦法可以解決這個(gè)問(wèn)題?答:有一定的影響.尤其二抗反應(yīng)后洗滌不好,會(huì)出現(xiàn)非特異.ELISA試驗(yàn)中洗滌是關(guān)鍵
S100B蛋白試劑盒使用注意的事項(xiàng)2015/07/22
本試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中大鼠S100B蛋白(S-100B)水平。用純化的大鼠S100B蛋白(S-100B)抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入S100B蛋白(S-100B),再與HRP標(biāo)記的S100B蛋白(S-100B)抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過(guò)*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的S100B蛋白(S-100B)呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度(OD值)
實(shí)驗(yàn)新手必看“ELISA溫育方法”2015/07/15
溫育是ELISA測(cè)定中影響測(cè)定成敗zui為關(guān)鍵的一個(gè)因素。ELISA作為一種固相免疫測(cè)定,抗原抗體的結(jié)合反應(yīng)在固相上進(jìn)行,要使液相中的抗原或抗體與固相上的特異抗體或抗原*結(jié)合,必須在一定的溫度條件下反應(yīng)一定的時(shí)間。溫育所需時(shí)間與溫度成反比,即溫度越高,則所需時(shí)間相對(duì)較短。zui為常用的溫育溫度有37℃和室溫,其次是43℃和2~8℃。溫育這一步是ELISA測(cè)定中zui容易出現(xiàn)問(wèn)題的步驟。通常目前國(guó)內(nèi)ELISA試劑盒的反應(yīng)溫育時(shí)間為37℃30分鐘~1小時(shí),進(jìn)口ELISA試劑盒則通常為37℃1~2小時(shí)
四川大學(xué)老師咨詢組織勻漿樣本濃度相關(guān)問(wèn)題2015/07/09
四川大學(xué)自我司成立以來(lái)一直與我司合作。昨日,閆老師大鼠細(xì)胞因子相關(guān)ELISA試劑盒,課題預(yù)計(jì)暑期開(kāi)展實(shí)驗(yàn),樣本為組織樣本。為了更順利的開(kāi)展實(shí)驗(yàn),閆老師做了非常詳細(xì)的準(zhǔn)備,并咨詢我司技術(shù)如下問(wèn)題:?jiǎn)?:ELISA試劑盒,標(biāo)本檢測(cè)血清,肝,腦,腎,懷疑是組織是組織液?jiǎn)柊俜种嗌偈裁词怯糜诮M織勻漿,濃度是多少?答1:組織勻漿,勻漿按10%,即1組織勻漿加9,生理鹽水勻漿可以選擇,也可以選擇,但選擇,值=7.2-7.4,濃縮液。問(wèn)2:當(dāng)包在zui后的計(jì)算,使用一般的試劑盒測(cè)試來(lái)衡量組織蛋白濃度,zui后
ELISA試劑盒多種叫法你知道幾個(gè)?2015/07/07
恒遠(yuǎn)具有完善的ELISA試劑盒開(kāi)發(fā)平臺(tái),成熟的抗原、抗體研發(fā)系統(tǒng),熟練掌握各種酶聯(lián)技術(shù),如雙抗夾心法、(直接)競(jìng)爭(zhēng)法、間接競(jìng)爭(zhēng)法、阻斷法、間接法、雙抗原夾心法等方法,結(jié)合我公司的診斷試劑開(kāi)發(fā)團(tuán)隊(duì)我們可以有效的將試劑盒開(kāi)發(fā)為臨床診斷級(jí)別,質(zhì)量處于世界前列。想要了解更多有關(guān)我們公司產(chǎn)品信息,請(qǐng)登陸我公司。ELISA試劑盒多種叫法你知道幾個(gè)?ELISA試劑盒在國(guó)內(nèi)有許多種叫法:例如:ELISA檢測(cè)試劑盒、ELISAKit、酶聯(lián)免疫試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒、酶聯(lián)免疫分析試劑盒、酶免試劑盒等,比較常
正確規(guī)范的細(xì)胞凍存的方法2015/06/16
目前,細(xì)胞凍存zui常用的技術(shù)是液氮冷凍保存法,主要采用加適量保護(hù)劑的緩慢冷凍法凍存細(xì)胞。細(xì)胞在不加任何保護(hù)劑的情況下直接冷凍,細(xì)胞內(nèi)外的水分會(huì)很快形成冰晶,從而引起一系列不良反應(yīng)。正確細(xì)胞凍存的方法:1.細(xì)胞:選對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期細(xì)胞,收集細(xì)胞24小時(shí)前換液一次。2.計(jì)數(shù):按常規(guī)方法把細(xì)胞制成細(xì)胞懸液,計(jì)數(shù),令細(xì)胞密度達(dá)5×106/ml,離心去上清,吸入離心管中。3.凍存液:先用培養(yǎng)液9分+DMSO1分(或甘油)配成10%的DMSO凍存液,按上法一滴滴加入離心管中,然后用吸管輕輕吹打令細(xì)胞重懸。4.分
樣本離心技術(shù)介紹2015/06/10
在生物科學(xué),特別是生物化學(xué)和分子生物學(xué)研究領(lǐng)域,已得到十分廣泛的應(yīng)用,每個(gè)生物化學(xué)和分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室都要準(zhǔn)備多種型式的離心機(jī)。離心技術(shù)主要用于各種生物樣品的分離和制備,生物樣品懸浮液盛放在離心管中在高速旋轉(zhuǎn)下,由于巨大的離心力作用,使懸浮的微小顆粒(如細(xì)胞器、生物大分子的沉淀等)以一定的速度沉降,從而與溶液得以分離?;驹恚寒?dāng)一個(gè)粒子(生物大分子或細(xì)胞器)在高速旋轉(zhuǎn)下受到離心力作用時(shí),此離心力“F”由下式定義,即:F=ma=mω2ra—粒子旋轉(zhuǎn)的加速度,m—沉降粒子的有效質(zhì)量,ω—粒子旋轉(zhuǎn)的角
ELISA試劑標(biāo)本的收集和保存方法2015/06/09
ELISA試劑標(biāo)本的收集和保存方法一、尿液標(biāo)本ELISA試劑同血標(biāo)本一樣,尿液標(biāo)本受飲食、運(yùn)動(dòng)、藥物量等因素的影響也較大,特別是飲食的影響,故一般來(lái)說(shuō)晨尿優(yōu)于隨機(jī)尿。晨尿是指清晨起床后的*次尿標(biāo)本,較濃縮和酸化,有形成分(如血細(xì)胞,上皮細(xì)胞,管形)相對(duì)集中便于觀察。隨機(jī)尿即隨意一次尿,留取方便,但受飲食、運(yùn)動(dòng)、藥物影響較甚,易于出現(xiàn)假陽(yáng)性和假陰性結(jié)果,如飲食性蛋白尿,飲食性糖尿,維生素C干擾潛血結(jié)果等。餐后尿(午餐后2小時(shí)收集的患者尿液)適用于尿糖,尿蛋白和尿膽原的檢查,此時(shí)的尿標(biāo)本可增加試驗(yàn)敏
溫度、濃度、金屬離子三點(diǎn)會(huì)影響ELISA抗原抗體反應(yīng)2015/06/02
抗原抗體反應(yīng)是ELISA實(shí)驗(yàn)中zui常見(jiàn)實(shí)驗(yàn)之一,同時(shí)也有很多客戶會(huì)問(wèn)為什么他們的實(shí)驗(yàn)總是做不出理想的結(jié)果,是試劑盒本身存在質(zhì)量有問(wèn)題還是自己實(shí)驗(yàn)過(guò)程中存有小差錯(cuò)?我公司的試劑盒是采用國(guó)外進(jìn)口抗體跟試劑由自己公司的實(shí)驗(yàn)室包被完成的,質(zhì)量保證。至于后者,上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司告訴您抗原抗體反應(yīng)影響的三大因素:1溫度:溫度影響分子的活動(dòng)速度,20-40度是溫度越高,結(jié)合越快,超過(guò)56度抗原抗體就會(huì)失活。2抗原抗體的相對(duì)濃度:比例合適結(jié)合越好。否則會(huì)出現(xiàn)前、后帶現(xiàn)象。3金屬離子;許多抗原抗體的反映需
胎牛血清恒遠(yuǎn)生物公司2015/05/18
血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物。胎牛血清采用健康母牛懷孕的八月齡胎牛血液為原料,經(jīng)無(wú)菌采集、分離、微孔過(guò)濾后而成。所以胎牛血清是品質(zhì)也是zui高的,因?yàn)樘ヅ_€未接觸外界,血清中所含的抗體、補(bǔ)體等對(duì)細(xì)胞有害的成分zui少。上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司高品質(zhì)為您提供gibco、hyclone、nqbb、sigma等各個(gè)品牌的血清。胎牛血清的功能:1.提供對(duì)維持細(xì)胞指數(shù)生長(zhǎng)的激素,基礎(chǔ)培養(yǎng)基中沒(méi)有或量很少的營(yíng)養(yǎng)物,以及主要的低分子營(yíng)養(yǎng)物。2.提供結(jié)合蛋白,能識(shí)別維生素、脂類(lèi)、金屬和其他
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