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上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第15年
判定ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)結(jié)果常用方法2016/01/11
ELISA法實(shí)驗(yàn)現(xiàn)已普遍運(yùn)用于科研領(lǐng)域,其實(shí)驗(yàn)原理:用純化的抗體包被微孔板,制成固相載體,往包被抗C3抗體的微孔中依次加入標(biāo)本或標(biāo)準(zhǔn)品、生物素化的抗C3抗體、HRP標(biāo)記的親和素,經(jīng)過*洗滌后用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的C3呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),計(jì)算樣品濃度。當(dāng)我們將實(shí)驗(yàn)的一切都準(zhǔn)備好并且即將完畢時(shí),要如何去判定ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)結(jié)果呢?這里給您總結(jié)出了三個(gè)方法,分別是定量測定
切片的清洗方法及注意事項(xiàng)2015/12/30
上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司提供免費(fèi)代做ELISA實(shí)驗(yàn),WB實(shí)驗(yàn)按樣收費(fèi)。各種技術(shù)問題可提供一對(duì)一的服務(wù)。昨日,我司技術(shù)部負(fù)責(zé)人歐陽技術(shù)在給中科院物理研究所高老師關(guān)于切片的清洗方法分析介紹到:為了防止一抗、二抗等試劑殘留而引起非特異性染色,所以適當(dāng)?shù)丶訌?qiáng)清洗(延長時(shí)間和增多次數(shù))尤為重要,一般要求在一抗孵育前的清洗是3min*3次,而一抗孵育后的清洗均為5次*5min。注意事項(xiàng):(1)單獨(dú)沖洗,防止交叉反應(yīng)造成污染。(2)溫柔沖洗,防止切片的脫落??梢赃x擇用浸洗方式;(3)沖洗的時(shí)間要足夠,才能*洗
恒遠(yuǎn)分析:影響ELISA中非特異性顯色的原因很多2015/12/23
恒遠(yuǎn)分析:影響ELISA中非特異性顯色的原因有很多,比如試劑盒特異性、檢驗(yàn)標(biāo)本中含酶標(biāo)記物的干擾物,操作過程中的問題?,F(xiàn)在就這原因作一簡要分析,以便可以通過以上措施把非特異顯色降至zui低限度,從而提高檢測的特異性,并得到更準(zhǔn)確、可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果。elisa試劑盒樣品收集、處理及保存方法1、血清-----操作過程中避免任何細(xì)胞刺激。使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管。收集血液后,1000×g離心10分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心地分離。2、血漿-----EDTA、檸檬酸鹽、肝素血漿可用于檢測。1000×g離心
評(píng)價(jià)ELISA試劑盒的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)有哪些2015/12/16
ELISA試劑盒名稱一般由“(物種)+(測定指標(biāo))+酶聯(lián)免疫試劑盒(ELISAkit)”。目前,市場上供應(yīng)的試劑盒有用于科研的,也有用于臨床診斷的。應(yīng)用于臨床診斷的試劑盒必須有衛(wèi)生部的許可文號(hào),國家對(duì)應(yīng)用于臨床診斷的試劑盒有嚴(yán)格的規(guī)定和要求,制定相關(guān)的手則來管理試劑盒的質(zhì)量。而應(yīng)用于科研的試劑盒,國家則沒有出臺(tái)相關(guān)的質(zhì)量管理規(guī)定,對(duì)應(yīng)科研試劑盒質(zhì)量評(píng)估科研參考以下幾點(diǎn):1.準(zhǔn)確性2.精密度3.靈敏度4.穩(wěn)定性5.回收率6.曲線的相關(guān)系數(shù)恒遠(yuǎn)公司提醒您整套ELISA試劑盒一般由以下成分組成:1.3
恒遠(yuǎn)技術(shù)解析:靈敏度高對(duì)ELISA試劑盒效果的影響2015/12/14
靈敏度高是ELISA試劑盒的一大優(yōu)點(diǎn),而這其實(shí)也是和檢測樣本有些關(guān)聯(lián)的,我們一般說來,如果待測樣本中目標(biāo)蛋白的濃度比較高,則對(duì)靈敏度要求相對(duì)小一些。如果待測樣本中目標(biāo)蛋白的濃度比較低,則必須考慮靈敏度的問題。一般來說,試劑盒曲線上的zui小濃度是比較準(zhǔn)確的,低于這個(gè)值因?yàn)榕c曲線是個(gè)“S”型結(jié)構(gòu)有關(guān),所以結(jié)果是有偏差的,是一種估算。再加上實(shí)驗(yàn)誤差,所以達(dá)不到理想的效果。建議選擇試劑盒時(shí),應(yīng)該看曲線上zui小的濃度值,而不是試劑盒上寫的靈敏度。那么ELISA試劑盒檢測哪些范圍呢?一般說來,診斷試劑的
為什么科研人員都選擇牛血清做細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)2015/12/09
血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物,血清組成及含量常隨供血?jiǎng)游锏男詣e、年齡、生理?xiàng)l件和營養(yǎng)條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機(jī)物等,這些物質(zhì)對(duì)促進(jìn)細(xì)胞生長或抑制生長活性是達(dá)到生理平衡的??蒲腥藛T選擇用牛血清做細(xì)胞實(shí)驗(yàn)的理由有如下幾點(diǎn):1、牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)基中的中藥成份之一。在培養(yǎng)基中加入適量血清(10%),首先可以補(bǔ)充細(xì)胞生長所需的生長因子、激素、帖附因子等。2、具有解毒作用,能解除脂肪酸、重金屬和某些蛋白酶的毒性。3、它還能中止胰酶
恒遠(yuǎn)公司黃曲霉素B1試劑盒實(shí)驗(yàn)樣本處理方法及操作注意事項(xiàng)2015/12/03
黃曲霉素B1ELISA試劑盒采用直接競爭ELISA方法,在微孔板包被有黃曲霉素偶聯(lián)抗原,加入黃曲霉素B1(AFB1)標(biāo)準(zhǔn)品或樣品,游離黃曲霉素B1(AFB1)與微孔條上預(yù)包被的黃曲霉素B1偶聯(lián)抗原互相競爭抗黃曲霉素B1(AFB1)抗體酶標(biāo)記物,用TMB底物顯色,加入終止液后顏色由藍(lán)色變?yōu)辄S色,用酶標(biāo)儀在450nm波長下進(jìn)行檢測,吸光值與樣品中黃曲霉素B1(AFB1)含量成反比,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中黃曲霉素B1(AFB1)的含量.樣品處理程序(樣品在提取過程中,要嚴(yán)格按說明書操作,提取過程中應(yīng)準(zhǔn)
小鼠雌三醇(E3)ELISA試劑盒操作步驟2015/12/02
小鼠雌三醇(E3)ELISA試劑盒操作步驟:1.在各孔中加入標(biāo)準(zhǔn)品或樣品各100μL,37℃孵育90分鐘2.加入100μL生物素化抗體工作液,37℃孵育60分鐘3.洗滌3次4.加入100μL酶結(jié)合物工作液,37℃孵育30分鐘5.洗滌5次6.加入90μL底物溶液,37℃孵育15分鐘左右7.加入50μL終止液,立即在450nm波長處測量OD值8.結(jié)果計(jì)算小鼠雌三醇(E3)ELISA試劑盒對(duì)客戶的承諾:1.有質(zhì)量問題免費(fèi)包換,合同上注明了的.(質(zhì)量問題包括運(yùn)輸不當(dāng),客戶在使用過程中測不出結(jié)果,等等?。?
實(shí)驗(yàn)攻略:ELISA試劑盒檢測結(jié)果分析方法2015/11/18
細(xì)節(jié)決定成敗,這對(duì)于實(shí)驗(yàn)室科研工作者來說也是如此。在ELISA實(shí)驗(yàn)中的各項(xiàng)操作細(xì)節(jié)有很多,如盡量少用排槍、勤換槍頭,加樣時(shí)由低濃度向高濃度加,因?yàn)檫@樣可以減少跳孔的幾率。而整個(gè)實(shí)驗(yàn)的zui后關(guān)鍵就是結(jié)果的處理方法了,那么在在今天的技術(shù)文章中,上海恒遠(yuǎn)為您帶來的是ELISA試劑盒檢測結(jié)果分析方法。①:ELISA實(shí)驗(yàn)中樣品都要做復(fù)孔或三孔,然后計(jì)算每個(gè)濃度標(biāo)準(zhǔn)品的平均OD值,復(fù)孔的變異系數(shù)應(yīng)該小于20%。②:平均OD值減去空白孔的OD值。③:制作標(biāo)準(zhǔn)曲線。以減去本底后的OD值為X軸,標(biāo)準(zhǔn)品的濃度為Y
恒遠(yuǎn)技術(shù)深入剖析“標(biāo)本引起的假陽性和假陰性結(jié)果原因”2015/11/12
ELISA測定中出現(xiàn)的假陽性或假陰性結(jié)果,除了考慮試劑因素和操作因素之外,更多的應(yīng)從標(biāo)本因素方面進(jìn)行分析,并應(yīng)采取相應(yīng)措施排除干擾作用,從而提供正確可靠的檢測結(jié)果。血清是zui常用的ELISA標(biāo)本,血漿一般可視為與血清同等的標(biāo)本,標(biāo)本引起的假陽性和假陰性結(jié)果主要是干擾性物質(zhì)所致。常常由于用于ELISA測定的血標(biāo)本的采集、貯存等不當(dāng)所致。如標(biāo)本溶血、標(biāo)本被細(xì)菌污染、標(biāo)本貯存過久、標(biāo)本凝集不全和采血管中添加物等影響。(1)標(biāo)本溶血由于各種人為原因引起的標(biāo)本溶血,均可因紅細(xì)胞破壞溶解時(shí)釋放出大量具有過
知ELISA試劑盒質(zhì)量保證的重要條件,放心訂購2015/11/11
對(duì)于實(shí)驗(yàn)室試劑來說,產(chǎn)品的質(zhì)量是朋友們非常關(guān)注的一個(gè)重要問題,這是影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果的一大因素。產(chǎn)品質(zhì)量來源于生產(chǎn)廠家,實(shí)驗(yàn)的質(zhì)量就是與操作者有很大的關(guān)系了,今天上海恒遠(yuǎn)來為您說說讓ELISA試劑盒質(zhì)量保證的重要條件。ELISA診斷試劑經(jīng)歷了從合成肽向基因工程抗原的過渡。由于歷史的原因,人們往往以反應(yīng)本底的好壞來衡量ELISA反應(yīng)試劑盒,因此有些廠家為了保持較好的本底采用了單片段基因工程抗原及合成肽包被,該類試劑盒的流行病學(xué)敏感度不夠,穩(wěn)定性也成問題。我公司產(chǎn)品質(zhì)量優(yōu)勢表現(xiàn)在:1.潔凈的生產(chǎn)環(huán)境及科學(xué)
蛋氨酸基本信息及作用2015/11/04
蛋氨酸其他名稱:D-甲硫氨酸/D-蛋氨酸/D-2-氨基-4-甲硫基丁酸/D-甲硫基丁氨酸/D-MethionineCAS號(hào):348-67-4C3H7NO2=89.10級(jí)別:BR含量:≥98.5%蛋氨酸性狀:白色結(jié)晶粉末。有甜味,味覺值0.06%。200℃升華,264~269℃分解。并隨加熱速度而不同。易溶于熱水,溶于水,微溶于乙醇,不溶yimi;由水-乙醇液重結(jié)晶者為斜方晶體系,由水重結(jié)晶者為針狀結(jié)晶或結(jié)晶性粉末。10%水溶液的PH值5.5-7.0,約于295-300℃熔化并分解,化學(xué)性能穩(wěn)定,
成功完成WB檢測,必須滿足的4個(gè)條件2015/10/29
免疫印跡(immunoblotting)又稱蛋白質(zhì)印跡(Westernblotting),是根據(jù)抗原抗體的特異性結(jié)合檢測復(fù)雜樣品中的某種蛋白的方法。該法是在凝膠電泳和固相免疫測定技術(shù)基礎(chǔ)上發(fā)展起來的一種新的免疫生化技術(shù)。由于免疫印跡具有SDS-PAGE的高分辨力和固相免疫測定的高特異性和敏感性,現(xiàn)已成為蛋白分析的一種常規(guī)技術(shù)。免疫印跡常用于鑒定某種蛋白,并能對(duì)蛋白進(jìn)行定性和半定量分析。結(jié)合化學(xué)發(fā)光檢測,可以同時(shí)比較多個(gè)樣品同種蛋白的表達(dá)量差異。成功完成WesternBlot檢測,必須滿足4個(gè)條件
上海恒遠(yuǎn)解說ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)的技術(shù)手段和實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備2015/10/26
時(shí)光匆匆而過,十月進(jìn)入尾聲,即將迎來購物狂潮“雙11”,在十月購我司ELISA試劑盒的老師多個(gè)選擇我司待測,在實(shí)驗(yàn)中我司技術(shù)整理了相關(guān)實(shí)驗(yàn)技術(shù),下面我們就來看看:上海恒遠(yuǎn)解說ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)的技術(shù)手段和實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備!1、其抗原抗體反應(yīng)具有高度的特異性。2、將酶催化反應(yīng)的放大作用和抗原抗體親和反應(yīng)的高度專一性、特異性相結(jié)合,以酶標(biāo)記的抗原或抗體作為主要試劑進(jìn)行免疫測試,所以具有很高的靈敏度。3、實(shí)現(xiàn)了在細(xì)胞或亞細(xì)胞水平上示蹤抗原或抗體的所在部位,或在微克、甚至納克水平上對(duì)其進(jìn)行定量。ELISA試
恒遠(yuǎn)技術(shù)講解:ELISA空白孔顯現(xiàn)陽性的原因2015/10/22
近日,上海大學(xué)金老師實(shí)驗(yàn)后來電向我司咨詢ELISA空白孔為什么顯現(xiàn)陽性?金老師的實(shí)驗(yàn)流程大致是:包被放置一晚4攝氏度12小時(shí)-一抗65分鐘-二抗45分鐘-顯色15分鐘“-"表示洗板,洗五次,每次3min??瞻卓诪椴话?,加一抗和二抗,結(jié)果空白孔比陽性值還高。通過了解我司技術(shù)人員經(jīng)過詳細(xì)分析后給出以下幾種可能:1.手工洗板嗎,臨近空白孔的標(biāo)準(zhǔn)品濃度zui高,有可能甩液體的時(shí)候沒注意,標(biāo)準(zhǔn)孔的倒流到空白孔去了哦!2.如果沒有封閉,有可能是未經(jīng)過封閉的板子對(duì)一抗有吸附作用,吸附一抗后二抗自然色。3.如
ELISA加樣時(shí)移液槍的正確使用方法2015/10/21
大家經(jīng)常會(huì)討論移液的問題,這個(gè)步驟在ELISA實(shí)驗(yàn)中的卻是比較重要的。在加樣品和加顯色液的時(shí)候是定量的,產(chǎn)生氣泡可能會(huì)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果影響蠻大的??傊莆瘴⒘考訕悠骷訕颖仨氉⒁獾年P(guān)鍵點(diǎn)是可以幫助您在實(shí)驗(yàn)中避免不必要的麻煩。1.加樣不可太快,要避免加在孔壁上部,不可濺出和產(chǎn)生氣泡。加樣太快,無法保證微量加樣的準(zhǔn)確性和均一性。加在孔壁上部的非包被區(qū),易導(dǎo)致非特異吸附。濺出會(huì)對(duì)鄰近孔產(chǎn)生污染。出現(xiàn)氣泡則反應(yīng)液界面有差異。2.試劑的加入在國產(chǎn)試劑盒中基本上均是從滴瓶中滴加,除了要注意滴加的角度外,滴加的速度
實(shí)驗(yàn)必知:ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)條件的選擇2015/10/14
在ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中,進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的,其中包括:(1)固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。(2)包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時(shí),要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時(shí)間及
實(shí)驗(yàn)新手如何獨(dú)立看懂ELISA實(shí)驗(yàn)結(jié)果2015/10/09
ELISA測定按其表示測定結(jié)果的方式分為定性和定量測定兩大類。定性測定只是對(duì)標(biāo)本中是否含有待測抗原或抗體作出“有”或“無”的結(jié)論,分別用“陽性”和“陰性”來表示??梢姸ㄐ詼y定通常是用于傳染性病原體的抗原或抗體的測定,以判斷特定病原體感染的存在與否。而定量測定則是對(duì)標(biāo)本中待測抗原的多少進(jìn)行量值測定,以具體數(shù)值表示。定量測定基本上是用于非病原體抗原物質(zhì)的測定,如激素、細(xì)胞因子、腫瘤標(biāo)志物、小分子藥物等。FP,hCG、細(xì)胞因子等的定量測定。ELISA定性測定的“陰性”和“陽性”的判定依據(jù)是試劑盒所確定
科研試劑使用注意事項(xiàng)2015/09/29
試劑是試驗(yàn)、研究開發(fā)方面*的化學(xué)物質(zhì)。但有些試劑會(huì)因操作有誤而引起意想不到的事故。這樣的試劑大體可分為具有引發(fā)火災(zāi),爆炸的危險(xiǎn)性;因裸露而對(duì)人體產(chǎn)生傷害的有害特性;以及保管中因自然分解而引發(fā)意想不到的事故的危險(xiǎn)性。當(dāng)然,有些試劑同時(shí)具有多種危險(xiǎn)特性。因此,在使用時(shí)必須注意安全,從開封,保管,直到廢棄,希望實(shí)施責(zé)任制管理。要認(rèn)識(shí)到所有的試劑都具有“不被人知的危險(xiǎn)有害性”,防止化學(xué)事故發(fā)生。●購買后,請(qǐng)務(wù)必確認(rèn)標(biāo)簽上的注意事項(xiàng)?!褡龊妙A(yù)防顛倒,摔壞的措施和管理體制?!裨谑褂们霸俅未_認(rèn)標(biāo)簽上的注意事項(xiàng)
未使用完的96孔板試劑盒該作何處理2015/09/25
ELISA試劑盒包裝規(guī)格的大小取決于試劑盒里面酶標(biāo)板的規(guī)格大小,常見的有96T(12孔乘以8條)跟48T(12孔乘以4條)兩種。所以當(dāng)您在選擇ELISA試劑盒的時(shí)候考慮自己樣本的收集量再做選擇,以免造成浪費(fèi)。也許您會(huì)想剩余沒用完的板可以再保存等下次實(shí)驗(yàn)重新使用。我司技術(shù)卻不贊同該做法,不僅僅是因?yàn)榛厥盏陌遄訉?duì)后面實(shí)驗(yàn)會(huì)造成比較大的誤差。所以選購ELISA是應(yīng)該考慮另外兩個(gè)問題:一、經(jīng)濟(jì):一塊96孔板,進(jìn)口的也貴不到哪去,國產(chǎn)的更便宜,你重復(fù)利用,這么一折騰,時(shí)間,精力以及洗板所要產(chǎn)生的費(fèi)用,另外
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