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上海恒遠(yuǎn)生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第15年
學(xué)會(huì)這些,ELISA實(shí)驗(yàn)so easy!2020/09/16
優(yōu)質(zhì)的試劑,良好的儀器和正確的操作是保證ELISA檢測(cè)結(jié)果準(zhǔn)確可靠的必要條件。ELISA的操作因固相載體的形成不同而有所差異,國(guó)內(nèi)醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)一般均用板式點(diǎn)。本文將敘述板式ELISA各個(gè)操作步驟的注意要點(diǎn),珠式、管式及磁性球ELSIA,國(guó)外試劑均與特殊儀器配合應(yīng)用,兩者均有詳細(xì)的使用說(shuō)明,嚴(yán)格遵照規(guī)定操作,必能得出準(zhǔn)確的結(jié)果。1.標(biāo)本的采取和保存可用于ELISA測(cè)定的標(biāo)本十分廣泛,體液(如血清)、分泌物(唾液)和排泄物(如尿液、糞便)等均可作標(biāo)本以測(cè)定其中某種抗體或抗原成份??芍苯舆M(jìn)行測(cè)定的標(biāo)本:如
干貨分享:LB培養(yǎng)基怎么配制?2020/09/09
LB培養(yǎng)基,是微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中常用的培養(yǎng)基,用于培養(yǎng)大腸桿菌等細(xì)菌,其分為液態(tài)或是加入瓊脂制成的固態(tài)培養(yǎng)基。加入抗生素的LB培養(yǎng)基可用于篩選以大腸桿菌為宿主的克隆。盡管該培養(yǎng)基的名稱被廣泛解釋為L(zhǎng)uria-Bertani培養(yǎng)基,然而根據(jù)其發(fā)明人貝爾塔尼(GiuseppeBertani)的說(shuō)法,這個(gè)名字來(lái)源于英語(yǔ)的lysogenybroth,即溶菌肉湯。LB培養(yǎng)基的配制:1.成分胰蛋白胨(tryptone)10g酵母提取物(yeastextract)5g氯化鈉(NaCl)10g固體培養(yǎng)基另加瓊脂粉1
恒遠(yuǎn)產(chǎn)品文獻(xiàn):大鼠TGF-β、ANGII ELISA試劑盒引用文獻(xiàn)2020/08/31
【文獻(xiàn)標(biāo)題】EffectofanaqueousextractofAverrhoacarambolaL.onendothelialfunctioninratswithventricularremodelling【作者】XingmeiLianga,RenbinHuangb,JianchunHuanget.al【作者單位】廣西醫(yī)科大學(xué)【文獻(xiàn)中引用產(chǎn)品】大鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β(TGF-β)ELISA試劑盒大鼠血管緊張素II(ANGII)ELISA試劑盒【關(guān)鍵詞】AEA,Ventricularremodell
幾個(gè)問(wèn)題幫你了解細(xì)胞培養(yǎng)FAQ2020/08/26
1.細(xì)胞冷凍管解凍培養(yǎng)時(shí),是否應(yīng)馬上去除DMSO?除少數(shù)特別注明對(duì)DMSO敏感之細(xì)胞外,絕大部分細(xì)胞株(包括懸浮性細(xì)胞),在解凍之后,應(yīng)直接放入含有10-15ml新鮮培養(yǎng)基之培養(yǎng)角瓶中,待隔天再置換新鮮培養(yǎng)基以去除DMSO即可,如此可避免大部分解凍后細(xì)胞無(wú)法生長(zhǎng)或貼附之問(wèn)題。2.可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基?不能。每一細(xì)胞株均有其特定使用且已適應(yīng)之細(xì)胞培養(yǎng)基,若驟然使用和原先提供之培養(yǎng)條件不同之培養(yǎng)基,細(xì)胞大都無(wú)法立即適應(yīng),造成細(xì)胞無(wú)法存活。3.可否使用與原先培養(yǎng)條件不同之血清種類?不能。
恒遠(yuǎn)教你生物素標(biāo)記蛋白操作的方法2020/08/19
下面的操作方法可以使約3~5分子的生物素與1分子的蛋白結(jié)合,對(duì)某些蛋白來(lái)說(shuō),生物素與蛋白的分子比可根據(jù)不同的生物素化要求進(jìn)行調(diào)整。1.溶解2~10mg蛋白于1ml的BuphTm磷酸鹽緩沖液中,并計(jì)算溶解的毫摩爾數(shù)。如果蛋白含有不恰當(dāng)?shù)木彌_液(如Tris或者甘氨酸),可以通過(guò)在PBS中透析或濃縮的方法除去。計(jì)算:蛋白質(zhì)量(mg)/蛋白分子量(MW)=蛋白質(zhì)的毫摩爾數(shù)。2.在打開(kāi)之前,平衡生物素至室溫。加2mgSulfo-NHS-Biotin于100ul超純水中,加入足夠量濃度的生物素,一般對(duì)于10
在ELISA中,如何進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇呢?2020/08/12
在ELISA中,進(jìn)行各項(xiàng)實(shí)驗(yàn)條件的選擇是很重要的,其中包括:1.固相載體的選擇:許多物質(zhì)可作為固相載體,如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體,在使用前均可進(jìn)行篩選:用等量抗原包被,在同一實(shí)驗(yàn)條件下進(jìn)行反應(yīng),觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,據(jù)此判明其吸附性能是否良好。2.包被抗體(或抗原)的選擇:將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時(shí),要求純度要好,吸附時(shí)一般要求PH在9.0~9.6之間。吸附溫度,時(shí)間及其蛋白量也有一定影
恒遠(yuǎn)文獻(xiàn):小鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒引用文獻(xiàn)2020/08/07
【文獻(xiàn)標(biāo)題】ChronicrestraintstressdecreasestherepairpotentialfrommesenchymalstemcellsonliverinjurybyinhibitingTGF-b1generation【作者】XYang,Z-PHan,S-SZhanget.al【作者單位】第二軍醫(yī)大學(xué)【文獻(xiàn)中引用產(chǎn)品】小鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1(TGF-β1)ELISA試劑盒【DOI】doi.org/10.1038/cddis.2014.257【影響因子(IF)】5.72【出版期
超級(jí)干貨:如何選擇抗體2020/07/29
抗體(英語(yǔ):antibody),(免疫球蛋白不僅僅只是抗體)是一種由漿細(xì)胞(效應(yīng)B細(xì)胞)分泌,被免疫系統(tǒng)用來(lái)鑒別與中和外來(lái)物質(zhì)如細(xì)菌、病毒等的大型Y形蛋白質(zhì),僅被發(fā)現(xiàn)存在于脊椎動(dòng)物的血液等體液中,及其B細(xì)胞的細(xì)胞膜表面??贵w能識(shí)別特定外來(lái)物的一個(gè)*特征,該外來(lái)目標(biāo)被稱為抗原。1.一抗選擇(1)確定抗體的名字,注意中英文名字、別名、亞型等信息。(2)確定實(shí)驗(yàn)樣本的種屬,Human,Mouse,Rat等。我們的抗體說(shuō)明書(shū)都列出該抗體驗(yàn)證過(guò)的適用物種,可根據(jù)說(shuō)明書(shū)列出已驗(yàn)證的種屬來(lái)選擇適合你實(shí)驗(yàn)需要的
影響細(xì)胞轉(zhuǎn)染的因素,你知道嗎?2020/07/23
血清:血清影響復(fù)合物的形成,降低轉(zhuǎn)染效率陽(yáng)離子脂質(zhì)體和DNA的量在使用血清時(shí)會(huì)有所不同,因此想在轉(zhuǎn)染培養(yǎng)基中加入血清時(shí)要進(jìn)行條件優(yōu)化。大部分細(xì)胞可以在無(wú)血清培養(yǎng)基中幾個(gè)小時(shí)內(nèi)保持健康,對(duì)于對(duì)血清缺乏比較敏感的細(xì)胞,可以使用OPTI-MEMI培養(yǎng)基。對(duì)于對(duì)血清缺乏比較敏感的貼壁細(xì)胞,建議使用LIPOFECTAMINE2000??股兀罕热缜嗝顾睾玩溍顾?,是影響轉(zhuǎn)染的培養(yǎng)基添加物。這些抗生素一般對(duì)于真核細(xì)胞無(wú)毒,但陽(yáng)離子脂質(zhì)體試劑增加了細(xì)胞的通透性,使抗生素可以進(jìn)入細(xì)胞。這降低了細(xì)胞的活性,導(dǎo)致轉(zhuǎn)染
選擇elisa試劑盒,要注意這幾點(diǎn)2020/07/15
Elisa生物試驗(yàn)是一種敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)診斷方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡(jiǎn)便,結(jié)果判斷較客觀等因素,已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗(yàn)的各領(lǐng)域中。如果選對(duì)了試劑盒,用對(duì)了實(shí)驗(yàn)技巧,就會(huì)讓您的實(shí)驗(yàn)效率事半功倍。那么如何選購(gòu)一款*,價(jià)格實(shí)惠的ELISAKit呢?大家都知道市面上任意品牌的一個(gè)ELISAKit售價(jià)都不便宜,如果選錯(cuò)了試劑盒,輕則損失一筆科研經(jīng)費(fèi),重則毀掉整個(gè)實(shí)驗(yàn)課題.如何去挑選適合自己的試劑盒就顯得特別重要,有以下幾點(diǎn)可供參考。1.查找待測(cè)樣本的蛋白濃度:可通過(guò)NCBI的文
是誰(shuí)解碼了細(xì)胞通信網(wǎng)絡(luò)?2020/07/08
細(xì)胞通訊是指一個(gè)細(xì)胞發(fā)出的信息通過(guò)介質(zhì)傳遞到另一個(gè)細(xì)胞產(chǎn)生相應(yīng)的反應(yīng),通過(guò)化學(xué)信號(hào)分子進(jìn)行細(xì)胞間通訊是動(dòng)物和植物普遍采用的通訊方式。配體-受體復(fù)合物介導(dǎo)的細(xì)胞-細(xì)胞通訊對(duì)協(xié)調(diào)發(fā)育、分化和炎癥等多種生物學(xué)過(guò)程具有至關(guān)重要的作用。為了研究不同細(xì)胞類型間的細(xì)胞通訊網(wǎng)絡(luò)如何使生理過(guò)程得以進(jìn)行的,英國(guó)Sanger研究所的Teichmann實(shí)驗(yàn)室和Vento-Tormo實(shí)驗(yàn)室聯(lián)合開(kāi)發(fā)了CellPhoneDB一個(gè)配體、受體及其相互作用的數(shù)據(jù)庫(kù),用于細(xì)胞通訊網(wǎng)絡(luò)的系統(tǒng)分析。CellPhoneDB進(jìn)行細(xì)胞通訊分析
關(guān)于實(shí)驗(yàn)的問(wèn)題,你知道嗎?2020/07/01
1.我的標(biāo)準(zhǔn)曲線很好,但我沒(méi)有得到一個(gè)信號(hào),我的樣本,當(dāng)我期望,為什么?樣品不包含被分析物.一個(gè)矩陣的效果可能是掩蓋檢測(cè).確保推薦的稀釋液在試劑盒插入后按規(guī)定進(jìn)行.如果建議稀釋,請(qǐng)檢查是否正確進(jìn)行稀釋.過(guò)稀釋會(huì)導(dǎo)致樣品在標(biāo)準(zhǔn)曲線的范圍內(nèi)下降。2.你怎么推薦我洗盤(pán)子?如果您使用的是一個(gè)自動(dòng)平板洗衣機(jī),我們建議定期檢查校準(zhǔn),并將該系統(tǒng)在洗滌前沖洗緩沖液沖洗.手動(dòng)洗衣機(jī)也是一樣的.一個(gè)中繼器或洗瓶也可以使用.用戶應(yīng)小心,以確保所有的內(nèi)容都是送氣和板拍干的無(wú)塵紙。3.我需要用一個(gè)盤(pán)子嗎?可靠的結(jié)果可以得
解析凍存細(xì)胞如何復(fù)蘇2020/05/26
在實(shí)際操作中,凍存細(xì)胞要進(jìn)行復(fù)蘇,再培養(yǎng)傳代。凍存細(xì)胞應(yīng)如何復(fù)蘇呢?復(fù)蘇細(xì)胞一般采用快速融化法。以保證細(xì)胞外結(jié)晶快速融化,以避免慢速融化水分滲入細(xì)胞內(nèi),再次形成胞內(nèi)結(jié)晶損傷細(xì)胞。細(xì)胞復(fù)蘇的主要操作步驟(1)佩戴眼鏡和手套,從液氮罐中取出安瓿或冷凍管。(2)迅速放入38℃水浴中,并不時(shí)搖動(dòng),在1分鐘內(nèi)使其*融化,然后在無(wú)菌下取出細(xì)胞。(3)在1000r/min速度下離心5~10分鐘,棄去上層液,加入適量培養(yǎng)液后接種于培養(yǎng)瓶中,接種濃度1×109/L,置37℃溫箱靜置培養(yǎng),次日更換一次培養(yǎng)液,繼續(xù)培
淺談無(wú)血清培養(yǎng)基的優(yōu)勢(shì)2020/05/19
無(wú)血清培養(yǎng)基是不需要添加血清就可以維持細(xì)胞在體外較長(zhǎng)時(shí)間生長(zhǎng)繁殖的合成培養(yǎng)基。無(wú)血清培養(yǎng)基和無(wú)血清培養(yǎng)成為當(dāng)今細(xì)胞培養(yǎng)領(lǐng)域的一大趨勢(shì)。采用無(wú)血清培養(yǎng)可降低生產(chǎn)成本,簡(jiǎn)化分離純化步驟,避免病毒污染造成的危害。雖然基礎(chǔ)培養(yǎng)基加少量血清所配制的*培養(yǎng)基可以滿足大部分細(xì)胞培養(yǎng)的要求,但對(duì)有些實(shí)驗(yàn)卻不適合,如觀察一種生長(zhǎng)因子對(duì)某種細(xì)胞的作用,這時(shí)需要排除其他生長(zhǎng)因子的干擾作用,而血清中可能含有各種生長(zhǎng)因子;又如需要測(cè)定某種細(xì)胞在培養(yǎng)過(guò)程中分泌某種物質(zhì)(抗體、生長(zhǎng)因子)的能力;或者要大規(guī)模的培養(yǎng)某種細(xì)胞,以
雙抗夾心ELISA試劑盒的反應(yīng)時(shí)間2020/05/13
雙抗夾心ELISA試劑盒的反應(yīng)時(shí)間在保證ELISA有效檢測(cè)病原菌的前提下,快速、方便也是雙抗夾心ELISA的必要條件。雙抗夾心ELISA從加入待測(cè)抗原到得出結(jié)果,檢測(cè)大腸桿菌O157:H7共需要5h左右,而間接ELISA則需要7h(包被37℃,2h)或者17h(包被4℃guo夜)。本論文篩選出的雙抗夾心ELISA檢測(cè)大腸桿菌O157:H7省去封閉這一步驟。在間接ELISA測(cè)定抗原中,封閉一般是*的,因?yàn)榘徊煌瑵舛瓤乖灰欢梢?覆蓋固相載體表面,如果不封閉,很可能使隨后加入的特異性抗體和酶標(biāo)二
國(guó)產(chǎn)標(biāo)準(zhǔn)品與對(duì)照品選擇注意事項(xiàng)2020/04/28
國(guó)產(chǎn)標(biāo)準(zhǔn)品、對(duì)照品是指國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)中用于鑒別、檢查、含量測(cè)定、雜質(zhì)和有關(guān)物質(zhì)檢查等標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),其制備與標(biāo)定應(yīng)符合“生物制品國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)制備和標(biāo)定規(guī)程”要求,并由國(guó)務(wù)院藥品監(jiān)督管理部門(mén)的機(jī)構(gòu)分發(fā)。對(duì)照品,是指用于鑒別、檢查、含量測(cè)定和校正檢定儀器性能的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)。采用化學(xué)方法來(lái)測(cè)定,即是一般儀器的都叫做對(duì)照品,國(guó)家規(guī)定的有107種,包括地塞米松、di西泮、土霉素、阿莫西林等等。標(biāo)準(zhǔn)品和對(duì)照品一樣是指國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)中用于鑒別、檢查、含量測(cè)定、雜質(zhì)和有關(guān)物質(zhì)檢查等標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),它是國(guó)家藥品標(biāo)準(zhǔn)不可分割的組成部分
向奔赴疫情前線的白衣天使致敬2020/04/16
主題:免費(fèi)ling取ELISA試劑盒啦時(shí)間:2020年4月8日-2020年12月31日領(lǐng)取群體:2020年因xin冠肺炎援鄂的醫(yī)務(wù)人員xin型冠狀病毒感染的肺炎疫情發(fā)生以來(lái),醫(yī)務(wù)人員們聞令行動(dòng),取消休假,全體動(dòng)員,全力以赴!不需要認(rèn)識(shí),不渴望知道……你用生命守護(hù)著孝感的防線;不奢求歌頌,不指望回報(bào)……你把真情傾注在孝感的大地!山知道你水知道你,歷史不會(huì)忘記你;山知道你水知道你,澴川大地永遠(yuǎn)銘記著你……山水相連一家親!向*所有的醫(yī)護(hù)人員致敬,你們的逆行,值得我們永遠(yuǎn)敬佩!現(xiàn)在國(guó)內(nèi)疫情已經(jīng)逐步穩(wěn)定,
解析ELISA檢測(cè)方法的三大特點(diǎn)有哪些2020/03/31
下面是我司為大家?guī)?lái)的ELISA檢測(cè)辦法的三大特點(diǎn):1.穩(wěn)定性好:包被的抗原的穩(wěn)定性可使試劑盒的效期得到確保,早期以合成肽為包被抗原的試劑盒效期只有3-4個(gè)月,選用基因工程抗原后效期大大延長(zhǎng)了。2.基因工程抗原將特異性抗原決定簇基因融合表達(dá),表達(dá)產(chǎn)物包含更多的抗原決定簇,可提高試劑盒的靈敏度,提高檢出率。3.分子量大:合成肽選用化學(xué)辦法制備,因?yàn)楣に嚨南拗?,合成?shù)量有限,只能達(dá)到數(shù)百個(gè)氨基酸。而使用基因工程制備的抗原,分子量更大。ELISA標(biāo)本之腦血漿的稀釋:1.用EDTA2K離心搜集在真空血液
抗體發(fā)展與分類2020/03/25
單克隆抗體的發(fā)展經(jīng)歷了四個(gè)階段,分別為:鼠源性單克隆抗體、嵌合性單克隆抗體、人源化單克隆抗體和全人源單克隆抗體。鼠源性單克隆抗體:鼠雜交瘤單克隆抗體主要是將來(lái)源于免疫接種過(guò)的小鼠的B細(xì)胞與骨髓瘤細(xì)胞融合,繼而篩選出既能無(wú)限增殖又能分泌抗體的鼠雜交融合細(xì)胞,進(jìn)而進(jìn)行篩選、抗體制備和抗體純化。嵌合性單克隆抗體:指用人的恒定區(qū)取代小鼠的恒定區(qū),保留鼠單抗的可變區(qū)序列,形成一個(gè)人-鼠雜合的抗體。其研制程序快,可大幅度降低異源抗體的免疫原性,卻幾乎保持親本鼠單抗全部的特異性和親和力。另外,它還具有人抗體的
ELISA試劑盒HIV抗體檢測(cè)操作要點(diǎn)2020/03/23
ELISA試劑盒HIV抗體檢測(cè)操作要點(diǎn)ELISA試劑盒HIV抗體檢測(cè)是發(fā)現(xiàn)HIV感染的有效途徑,ELISA法是艾滋病初篩試驗(yàn)室檢測(cè)HIV抗體普遍使用的方法之一。具體操作過(guò)程中ELISA法的影響因素較多,稍有不慎就會(huì)降低實(shí)驗(yàn)的準(zhǔn)確性。避免諸多影響因素、保證結(jié)果準(zhǔn)確性,才能夠充分發(fā)揮ELISA法的優(yōu)點(diǎn),經(jīng)過(guò)多次實(shí)驗(yàn)的總結(jié)和分析,這篇文章分享了相關(guān)的經(jīng)驗(yàn)。1試劑的選擇通常所使用的ELISA試劑盒或其它試劑,必須是經(jīng)國(guó)家食品藥品監(jiān)督管理局注冊(cè)批準(zhǔn)、批檢合格、臨床評(píng)估質(zhì)量?jī)?yōu)良,并且均在有效期內(nèi)使用。不同批
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