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抗體特異性的那些事兒2019/11/22

特異性的挑選首要需求考慮四個方面：蛋白特異性、種屬特異性、試驗辦法特異性、符號物的特異性。1.蛋白特異性：針對需求檢測的蛋白查找抗體，幾個細節(jié)要區(qū)分，重組表達的蛋白和內(nèi)源性蛋白的檢測，對抗體的要求是不一樣的，留意查看抗體說明書的檢測說明。如果重組蛋白不是全長表達，則需求留意抗體的免疫原區(qū)域是否在重組蛋白區(qū)域內(nèi)。2.種屬特異性：同種蛋白不同物種，有著或大或小的差異?，F(xiàn)在大部分商品化抗體都是以人源蛋白序列為模板重組蛋白或規(guī)劃多肽抗原的，根據(jù)蛋白的同源性的狀況與其他種屬發(fā)生交叉反響。需求參照說明書注明

E2定量elisa 試劑盒變質(zhì)的話有哪些影響呢？2019/11/19

E2定量elisa試劑盒為什么變質(zhì)？是什么影響了E2定量elisa試劑盒質(zhì)保？一旦蛻變會有什么影響呢？1.辦法學(xué)的影響ELISA測定形式包含以下幾種：雙抗體夾心法、間接法、雙抗原夾心法、IgM抗體捕捉法、競爭抑制法，其間競爭抑制法(HBeAb,HBcAb等選用)因受操作時差所引起的競爭等要素的影響，成果重復(fù)性較差，質(zhì)量較難操控。2.試劑要素不同批次的ELISA試劑在制作進程中很難保證質(zhì)量*一致，即使是通過批批檢的項目其檢測成果也存在差異，因而必須挑選和訂購長批號的試劑，并保證保存條件。嚴格執(zhí)行這

小鼠骨髓的染色體制備方法步驟2019/11/15

染色體制備方法步驟（1）秋水仙素處理：取骨髓前3h先給小鼠腹腔注入秋水仙素，注射劑量為100μg／kg動物體重。（2）取骨髓：用損傷脊髓法處死小鼠，然后用剪刀剪開大腿上的皮膚和肌肉，取出大腿骨，用一小塊紗布搓干凈附在骨上的肌肉碎渣。剪掉股骨兩端膨大的關(guān)節(jié)頭，然后用注射器吸取5ml0.85％生理鹽水，插入股骨一端，將骨髓細胞沖洗至10ml的離心管中。可重復(fù)沖洗多次，直至骨髓腔呈白色為止。（3）低滲處理：將所獲得的細胞懸浮液以1000rpm離心10min，吸去上清液，留0.2ml沉淀物，加0.075

常用試劑的配制2019/11/12

1.無Ca2+、Mg2+Hanks液NaCl4.5gKCl0.2gNaHCO30.175gNa2HPO4·12H2O0.076gKH2PO40.03g葡萄糖0.5g0.4%酚紅2.5ml將上述成分依次溶解或加入到雙蒸水中,zui后補加雙蒸水至500ml,以5.6%NaHCO3調(diào)整pH值至7.4，4℃冰箱保存?zhèn)溆谩?.甲基紅試劑（1）成份甲基紅0.1g蒸餾水200ml95％乙醇300ml（2）用途：測定甲基紅反應(yīng)。3．Hanks液（原液）原液甲：NaCl160gKCl8gMgSO4·7H2O2gM

抗體特異性都有哪些斷定2019/11/08

抗體的特異性抗體的特異性是指與相應(yīng)抗原或近似抗原物質(zhì)的辨認才干?？贵w的特異性高，它的辨認才干就強。衡量特異性一般以交叉反應(yīng)率來標明。交叉反應(yīng)率可用競賽克制試驗測定。以不同濃度抗原和近似抗原別離做競賽克制曲線，核算各自的結(jié)合率，求出各安閑IC50時的濃度，并按公式核算交叉反應(yīng)率。假如所用抗原濃度IC50濃度為pg/管，而一些近似抗原物質(zhì)的IC50濃度幾乎是無窮大時，標明這一抗血清與其他抗原物質(zhì)的交叉反應(yīng)率近似為0，即該血清的特異性較好。拓展延伸：1.抗體的效價斷定不管是用于確診仍是用于醫(yī)治，制備抗

重生牛血清的首要成分有哪些？2019/11/07

血清的成分盡管比較簡單，但是仍是有許多成分沒有被破解，這也是一向讓科研人員頭痛的一件事，而且重生牛血清的成分還受供體的一些要素所影響，例如供體的年齡和生理狀況，這些都會影響血清的成分，所以研究血清成分也是一件比較復(fù)雜的作業(yè)，那么重生血清有哪些成分？1.蛋白質(zhì)重生牛血清的服務(wù)商介紹，重生牛血清中的首要成份中除包括可帶著金屬離子、脂肪酸和本身是激素類蛋白外，首要還有白蛋白，球蛋白。2.多肽?血小板促生長因子能促細胞分裂，據(jù)專人介紹重生牛血清是多肽家族的重要成員，多肽擁有著重要的效果，比如它能夠促進細

冬季如何保存ELISA試劑盒更安全2019/10/31

我司給您講講elisa試劑盒怎么保存更安全。1.要留意防止呈現(xiàn)嚴峻溶血。血紅蛋白中含有血紅素基團，其有相似過氧化物的活性，因而，在以HRP為符號酶的ELISA試劑盒測定中，如血清標本中血紅蛋白濃度較高，則其就很簡單在溫育進程中吸附于固相，然后與后邊參加的HRP底物反響顯色。2.樣本的收集及血清分離中要留意盡量防止細菌污染，一則細菌的成長，其所排泄的一些酶或許會對抗原抗體等蛋白發(fā)生分化作用；二則一些細菌的內(nèi)源性酶如大腸桿菌的β-半乳糖苷酶自身會對用相應(yīng)酶作符號的測定辦法發(fā)生非特異性攪擾。3.血清標

western blot 常見問題及解決辦法2019/10/29

我們在做WB時zui常遇到的問題也是驚人的相似——樣品漂浮、蛋白條帶扭曲（無法準確判斷蛋白分子量）、轉(zhuǎn)膜后看不到帶藍色或橙色的指示條帶、抗體孵育不均勻?qū)е缕毓舛炔町惡艽螅ㄒ廊皇菚绊懙降鞍妆磉_量的估算）。這些問題其實都或多或少與樣品前處理有關(guān)。也就是說，我們*可以通過優(yōu)化樣品處理手法，以及經(jīng)驗累積，來獲得的WB結(jié)果。1.出現(xiàn)樣品漂浮怎么辦？？原因分析：樣品中含有未除凈的溶劑或雜質(zhì)，其密度比電泳緩沖液小解決辦法：處理組織或菌體時，需充分分散或裂解，確保目的蛋白盡可能的釋放；熱處理粗樣時，確保升溫迅

如何解決ELISA檢測試劑盒的“花板”問題2019/10/25

ELISA檢測試劑盒吸附性能好，空白值低，孔底透明度高的固相載體，適用血清、血漿、組織勻漿液、細胞培養(yǎng)上清液、尿液等等多種標本類型?！盎ò濉眴栴}是ELISA檢測試劑盒比較常見的一個問題，那么客戶在遇到這類問題時，該如何處理呢?在ELISA檢測試劑盒結(jié)果"花板"的這一問題中，對檢測數(shù)據(jù)造成很大影響，往往會使檢測者做出誤判，是實驗中必須要注意和避免的。針對這個問題，我們建議從以下幾點出發(fā)：一、標本/試劑/儀器1.標本：出入境人員的血液標本。2.試劑：HBsAg、HCV、HIV、梅毒試劑均為不同廠家的

培養(yǎng)基中丙酮酸鈉的作用是什么？2019/10/24

丙酮酸鈉可以作為細胞培養(yǎng)中的替代碳源，盡管細胞更傾向于以葡萄糖作為碳源，但是，如果沒有葡萄糖的話，細胞也可以代謝丙酮酸鈉。丙酮酸鈉的貯存液濃度一般為50mM，-20℃保存，培養(yǎng)基中的終濃度為1mM.丙酮酸鈉是zui常見的丙酮酸鹽，是一類內(nèi)源性小分子物質(zhì)，丙酮酸鈉和丙酮酸均是天然存在于人體內(nèi)，并參與全身各組織和器官的代謝。丙酮酸鈉在醫(yī)學(xué)上、診斷試劑以及醫(yī)療器械中被廣泛用作緩沖劑、賦形劑和抗氧化劑。此外丙酮酸鈉在細胞培養(yǎng)中也是常用到的試劑之一，那么丙酮酸鈉在細胞培養(yǎng)中的作用是什么呢？酮酸鈉在細胞培養(yǎng)

ELISA kit操作中的實驗禁忌2019/10/18

酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）因其操作簡單，靈敏度高，特異性好，經(jīng)濟安全等特點而在臨床上廣泛應(yīng)用，但是由于其操作步驟復(fù)雜，一般包括試劑準備，樣本收集，加樣，溫育，洗滌，顯色，比色，結(jié)果判定等，其中任何一項操作不當都會對檢測結(jié)果產(chǎn)生很大影響。因此，必須加強ELISA檢測的全面質(zhì)量控制，保證其結(jié)果的準確可靠。Elisa實驗結(jié)果的影響因素包括檢測樣品因素、操作因素等。在實驗操作的過程中有一些技術(shù)要點，在這里，上海恒遠生物為大家分享操作Elisakit的實驗禁忌---(僅供參考)：1.加樣后及時放人孵箱

實驗時手套的選擇,被你忽略掉的小細節(jié)!!!2019/10/14

在生化實驗過程中必然會經(jīng)常接觸到各類生化試劑，而且很多有機試劑是有毒的，具有揮發(fā)性，吸入體內(nèi)對身體是非常不利的，特別是對于女孩子，更要保護好，如果不提前做好防護措施，敷再多的面膜擦再好的護膚品，都是無濟于事。因此，我們做實驗時，要保持高度警惕，任何小的細節(jié)都要引起重視，時刻保護好自己。說到這里，一些基礎(chǔ)性的個人防護裝備都是*的。畢竟身體是革命的本錢，實驗失敗了可以重來，但身體卻是不可以的。今天我們就來從「手套」說起。做實驗時，手套是一層防護裝備，是一定要戴的，這不僅是為了安全，同時也是實驗操作的

做細胞培養(yǎng)實驗對環(huán)境的具體要求2019/10/11

細胞的培養(yǎng)直接關(guān)系著實驗的成敗，所以不少科研人員做細胞培養(yǎng)實驗時因被污染而感到十分的苦惱，想要防止過程中發(fā)生污染情況，首先就要做好預(yù)防，只有預(yù)防工作做好了才能將發(fā)生污染的可能性降到zui小程度。那么怎樣才能做到預(yù)防污染呢？上?；庥忻钫校裉毂竟镜募夹g(shù)人員在這里為您整理出幾個妙招，供您參考。從物品、用品消毒滅菌著手：所用物品清洗、消毒要*，各種溶液滅菌除菌要仔細，并在無菌試驗陰性后才能使用。操作室及剩余的無菌器材要定期清潔消毒滅菌。從操作者做起：1.操作者責任心要強，要細心穩(wěn)重，操作技術(shù)要熟練

如何判斷你的細胞是何種污染2019/10/09

細胞培養(yǎng)中常見的生物污染類型有7種，分別是細菌污染、支原體污染、原蟲污染、黑膠蟲污染、真菌污染、病毒污染以及非細胞污染。他們在細胞培養(yǎng)中污染的特點如下：1.細菌：細菌在普通倒置顯微鏡下為黑色細沙狀，根據(jù)感染細菌的不同，可有不同的外形，培養(yǎng)液一般會渾濁變黃，對細胞生長影響明顯。2.支原體：黑色的，好象多為多形，培養(yǎng)液一般培養(yǎng)液一般會渾濁，原體感染，國內(nèi)血清很多都沒有做支原體陰性檢測，而支原體是牛血清中zui常見的微生物之一。而且它不能用過濾的辦法除去。支原體感染細胞以后，細胞病變不很明顯，只是慢慢

避免血清沉淀物的產(chǎn)生2019/09/06

血清中的沉淀物，有些沉淀物的不影響質(zhì)量，但有些會使血清會變得混濁，同時血清中許多較不穩(wěn)定的成分也會因此受到損害，而影響血清的質(zhì)量。怎么才能避免沉淀物的產(chǎn)生呢？我公司的科研人員，總結(jié)了幾小點與大家分享。避免沉淀物產(chǎn)生：1、解凍血清時，請按照所建議的逐步解凍法(-2℃至4℃至室溫)，若血清解凍時改變的溫度太大(如-20℃至37℃，實驗顯示非常容易產(chǎn)生沉淀物。2、解凍血清時，請隨時將之搖晃均勻，使溫度及成分均一，減少沉淀的發(fā)生3、請勿將血清置于37℃太久。若在37℃放置太久，血清會變得混濁，同時血清中

ELISA試劑盒：溫育可不是你想的那么簡單！2019/09/05

溫育是ELISA測定中影響測定勝敗zui為要害的一個要素。也是zui簡略出現(xiàn)問題的一個過程。通常目前國內(nèi)ELISA產(chǎn)品試劑盒的反應(yīng)溫育時間為37℃30分鐘～1小時，進口ELISA試劑盒則通常為37℃1～2小時才華有較*的結(jié)合，低于1小時，或許會影響測定下限。因此，關(guān)于溫育，在實踐測定操作中必定要留意以下幾點：1.要保證在設(shè)定的溫度下有滿意的反應(yīng)時間。一般來說，加完樣本和/或反應(yīng)試劑后，將微孔板從室溫拿至水浴箱或溫箱中時，孔內(nèi)溫度從室溫升至37℃，需求必定的時間，尤其是在室溫比較低以及非水浴的狀態(tài)

ELISA試劑盒為什么會變質(zhì)？2019/08/28

ELISA試劑盒為什么蛻變？是什么影響了ELISA試劑盒質(zhì)保？一旦蛻變會有什么影響呢？1.辦法學(xué)的影響ELISA測定形式包含以下幾種：雙抗體夾心法、間接法、雙抗原夾心法、IgM抗體捕捉法、競爭抑制法，其間競爭抑制法(HBeAb,HBcAb等選用)因受操作時差所引起的競爭等要素的影響，成果重復(fù)性較差，質(zhì)量較難操控。2.試劑要素不同批次的ELISA試劑在制作進程中很難保證質(zhì)量*一致，即使是通過批批檢的項目其檢測成果也存在差異，因而必須挑選和訂購長批號的試劑，并保證保存條件。嚴格執(zhí)行這一規(guī)范可以防止因

Elisa試驗如何才能“*”2019/08/28

在您我眼中的Elisa試劑盒一直是具有靈敏性高、特異性強等特點?？墒沁@么的它也會因為您的操作失誤而帶來不好的結(jié)果，那這些怎樣避免。今天上海通蔚就教教您Elisa試劑盒實驗時如何才能出現(xiàn)“*”！一：檢驗技師應(yīng)具備從事實驗室操作的基本素質(zhì)和實踐經(jīng)驗。能熟練操作實驗儀器、器械，具有一定總結(jié)和分析問題的能力，對實驗中出現(xiàn)的意外情況能及時妥善解決。二：操作前仔細閱讀說明書，嚴格按照說明書要求進行規(guī)范化操作。不同批號的試劑不可混用。值得改進的地方，反復(fù)試驗確定成立后才能改進，比如洗板次數(shù)的掌握等。三：評估試

怎么挑選適宜的酶標板ELISA試劑盒2019/08/20

ELISA試劑盒免疫酶技能即是用酶(如辣根過氧化物酶)符號已知抗體(或抗原)，然后與安排標本在必定條件下反響，假如安排中含有相應(yīng)抗原(或抗體)，抗原抗體彼此構(gòu)成的復(fù)合物中所帶酶分子遇到底物時，能催化底物水解、氧化或復(fù)原，發(fā)生顯色反響，這么就能夠識別出標本抗原(抗體)散布的方位和性質(zhì)，通過圖像剖析并可到達定量的意圖。ELISA試劑盒免疫酶技能與免疫熒光技能免疫熒光技能雖已廣泛應(yīng)用于免疫學(xué)的研討與診斷，可是熒光抗體染色標本不能長時間保存，對安排細胞的細微結(jié)構(gòu)分辨不清，免疫酶技能則能戰(zhàn)勝上述缺乏，符號

ELISA實驗中血漿的采集2019/08/16

上海恒遠生物科技有限公司根據(jù)多年的研究經(jīng)驗，對ELISA試劑盒實驗中血漿的采集，處理和保存做出具體分析，歡迎新老客戶賞析閱讀，如有意見或建議均可聯(lián)系我司，感謝您對公司的支持與鼓勵。ELISA實驗中血漿的采集，處理和保存具體要點解析：1.真空采血針2ml新鮮血液，加入無菌試管中2.按1:9加入抗凝劑（EDTA、草酸鈉、肝素、枸櫞酸鈉），30分鐘內(nèi)于冰上分離血漿以減少血小板的污染；（也可以直接用抗凝管采集）；3.將采集血液用離心機4℃，2500rpm離心5min，將離心好的勻漿留上清，棄下面沉淀。4