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2013
12-31

單抗制備-細(xì)胞融合篩選過程中遇到的問題及對(duì)策
1，融合率低，陽性孔少①免疫的問題。由于免疫原性不強(qiáng)或者免疫途徑不當(dāng)造成免疫弱，效價(jià)低。②融合過程中溫度、時(shí)間、PEG分子量，作用時(shí)間等。③脾細(xì)胞是否取出了足夠多的細(xì)胞，有無組織碎片干擾。④融合前骨髓瘤細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)是否完好，細(xì)胞是否渾圓，透亮，成對(duì)數(shù)生長(zhǎng)。2，單抗親和力整體低①免疫的問題。免疫途徑不當(dāng)或者免疫原問題。②融合細(xì)胞篩選過程出現(xiàn)遺漏，篩選方法不當(dāng)或檢測(cè)方法不當(dāng)，造成沒有篩到高親和力的融合細(xì)胞。③由于亞克隆細(xì)胞生長(zhǎng)環(huán)境不合適，導(dǎo)致融合細(xì)胞染色體丟失，分泌特性改變，親和力從高變低，這時(shí)就需
2013
12-31

骨髓瘤細(xì)胞SP2/0 培養(yǎng)過程中遇到的問題及對(duì)策
1，細(xì)胞長(zhǎng)的慢或細(xì)胞死亡正常生長(zhǎng)情況下，細(xì)胞一天傳代一次，生長(zhǎng)越好，貼壁越多對(duì)策：①培養(yǎng)基配方不對(duì)；②接種密度太低，低于10的4次方；③污染了支原體或者其他不明細(xì)菌，支原體的現(xiàn)狀是出現(xiàn)小黑點(diǎn)；細(xì)菌污染是渾濁；霉菌污染是出現(xiàn)白色肉眼可見菌落；不明細(xì)菌污染出現(xiàn)砂狀平鋪背景，視野發(fā)暗。④細(xì)胞瓶刷洗不干凈2，細(xì)胞形態(tài)異常正常生長(zhǎng)情況下，細(xì)胞渾圓，透亮，成對(duì)數(shù)生長(zhǎng)，生長(zhǎng)越好，貼壁多，懸浮少對(duì)策：①培養(yǎng)基配方不對(duì)；②接種密度太低，低于10的4次方；③污染了支原體或者其他不明細(xì)菌，支原體的現(xiàn)狀是出現(xiàn)小黑點(diǎn)；細(xì)
2013
12-31

高親和力單克隆抗體制備問題及對(duì)策
一、單抗制備-骨髓瘤細(xì)胞SP2/0培養(yǎng)過程中遇到的問題及對(duì)策1，細(xì)胞長(zhǎng)的慢或細(xì)胞死亡正常生長(zhǎng)情況下，細(xì)胞一天傳代一次，生長(zhǎng)越好，貼壁越多對(duì)策：①培養(yǎng)基配方不對(duì)；②接種密度太低，低于10的4次方；③污染了支原體或者其他不明細(xì)菌，支原體的現(xiàn)狀是出現(xiàn)小黑點(diǎn)；細(xì)菌污染是渾濁；霉菌污染是出現(xiàn)白色肉眼可見菌落；不明細(xì)菌污染出現(xiàn)砂狀平鋪背景，視野發(fā)暗。④細(xì)胞瓶刷洗不干凈2，細(xì)胞形態(tài)異常正常生長(zhǎng)情況下，細(xì)胞渾圓，透亮，成對(duì)數(shù)生長(zhǎng)，生長(zhǎng)越好，貼壁多，懸浮少對(duì)策：①培養(yǎng)基配方不對(duì)；②接種密度太低，低于10的4次方；
2013
12-31

單抗腹水制備過程中遇到的問題及對(duì)策
1，腹水少或者無腹水產(chǎn)生①致敏不正確，不正確的使用致敏劑，或者致敏時(shí)間與接種雜交瘤的時(shí)間相差太久，一般是7-14天，具體看小鼠的腹部情況。②雜交瘤細(xì)胞或者致敏劑的接種位置不正確，沒有打到腹腔，而是打到了皮下。③接種的雜交瘤細(xì)胞數(shù)量太少，太多或者細(xì)胞狀態(tài)不好。一般不50萬個(gè)細(xì)胞左右為宜。④建議使用母鼠或者生育過的母鼠制備腹水。2，腹水沒有效價(jià)①制備腹水的雜交瘤極不穩(wěn)定，打到小鼠身上之前就失去抗體分泌能力或者打到腹腔內(nèi)就失去了分泌能力。②致敏小鼠時(shí)采用了錯(cuò)誤的致敏劑。③接種的雜交瘤細(xì)胞數(shù)量太少，或者
2013
12-17

ELISA試劑盒使用及開發(fā)過程中常見問題及對(duì)策
現(xiàn)象可能原因解決方法板條不顯色或者無相應(yīng)數(shù)值試劑使用順序混亂，或操作步驟出錯(cuò)嚴(yán)格遵循實(shí)驗(yàn)說明重復(fù)實(shí)驗(yàn)使用了不同批次的試劑確保試劑來自同一試劑盒板條受潮嚴(yán)重板條要封好，干燥劑失效要及時(shí)更換低吸光度OD值試劑過期，或者不同的批次混用查證過期試劑和批次洗液配制錯(cuò)誤、洗滌浸泡時(shí)間過長(zhǎng)按照說明書要求洗滌，并正確配制洗液孵育時(shí)間過短按照說明書要求，嚴(yán)格計(jì)算好時(shí)間試劑污染確保吸取不同液體更換新的槍頭和盛放器皿試劑溫度過低根據(jù)試劑體積大小回溫時(shí)間相應(yīng)延長(zhǎng)，確保試劑*回溫使用錯(cuò)誤波長(zhǎng)讀數(shù)，或者酶標(biāo)儀失靈確保450
2012
11-08

膠體金試紙條常見問題及對(duì)策
膠體金試紙條常見問題及對(duì)策關(guān)鍵詞：膠體金試紙條檢測(cè)卡1.膠體金試紙條背景深或者是金殘留跑不動(dòng)？原因之一：被標(biāo)記蛋白復(fù)溶液中添加的某種成分不合適。解決方法：修改復(fù)溶液配方。更多原因及解決方案請(qǐng)點(diǎn)擊咨詢---2.膠體金試紙條邊緣效應(yīng)如何去除？原因之一：金爬速過快或者過慢。解決方法：對(duì)樣品墊進(jìn)行處理。更多原因及解決方案請(qǐng)點(diǎn)擊咨詢---3.膠體金標(biāo)記蛋白時(shí)出現(xiàn)死金如何解決？或者是金標(biāo)記不上？原因之一：被標(biāo)記蛋白量不足。解決方法：重新篩選合適的蛋白標(biāo)記量。更多原因及解決方案請(qǐng)點(diǎn)擊咨詢---4.熬制膠體金時(shí)
2012
10-27

ELISA試劑盒生產(chǎn)標(biāo)準(zhǔn)操作規(guī)程
食品安全檢測(cè)試劑盒、檢測(cè)卡、生產(chǎn)原材料搶購：武ShandongLvduBio-Sciences&TechnologyCo.,Ltd.地址：山東省濱州市黃河二路169號(hào)綠都生物高科技園：http://www.sdbzasvm.com24小時(shí)技術(shù)服務(wù)：+86-：lvdukeji@126.com：256600一、生產(chǎn)定量1．生產(chǎn)材料1.1包被液1.2磷酸鹽緩沖液1.3標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1.4樣品稀釋液1.5封閉液1.6抗體稀釋液A11.7酶稀釋液E1/E21.8洗滌液1.9底物液A液1.10底物液B液1.1
2012
10-25

ELISA試劑盒生產(chǎn)注意事項(xiàng)、生產(chǎn)技術(shù)
ELISA試劑盒生產(chǎn)1.ELISA試劑盒生產(chǎn)流程2,包被2.1將包被抗原用包被緩沖液配制包被液，每孔取100mL加入酶標(biāo)板，蓋好蓋板膜，包被條件如下表，4℃16-20h包被時(shí)酶標(biāo)板可以疊放，而37℃2h包被時(shí)酶標(biāo)板之間的間距應(yīng)保持一致（一般為5cm）。根據(jù)培養(yǎng)箱的設(shè)計(jì)調(diào)節(jié)酶標(biāo)板間的間距，如培養(yǎng)箱從底部產(chǎn)熱，則應(yīng)增加下層酶標(biāo)板間的間距為10cm。2.2包被加樣采取吸二打一的方式，應(yīng)避免加在孔壁上部，若不慎滴加在孔壁上，根據(jù)該滴溶液是否應(yīng)加入孔內(nèi)再做判斷，若應(yīng)加入，則小心振蕩使其落入孔底，反之則用吸

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