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免疫衛(wèi)士-T細(xì)胞培養(yǎng)攻略2024/07/03
T細(xì)胞作為免疫系統(tǒng)的衛(wèi)士,肩負(fù)著適應(yīng)性免疫的重?fù)?dān),在細(xì)胞免疫和體液免疫都有著關(guān)鍵性的作用。不僅如此,基于T細(xì)胞的三大免疫療法:CAR-T、TCRT、TILs也在“遍地開(kāi)花”。截止目前,F(xiàn)DA共批準(zhǔn)了6款CAR-T產(chǎn)品,中國(guó)也上市了5款CAR-T產(chǎn)品,全球共有11款CAR-T產(chǎn)品獲批!2024年2月16日,全球shou款TIL療法-lifileucel(LN-144)獲批上市,用于治療晚期黑色素瘤,成為有望攻克實(shí)體瘤的又一把利劍。類器官與T細(xì)胞的共培養(yǎng)也是一大研究“爆點(diǎn)”:T細(xì)胞與腫瘤類器官共培養(yǎng)
CUT和Tag: 新型蛋白質(zhì)-DNA互作研究工具2024/06/14
表觀遺傳學(xué)研究中,在分子層面研究蛋白質(zhì)與DNA之間的相互作用有助于我們更深入的理解特定細(xì)胞功能和疾病發(fā)病機(jī)制。CST為了幫助科研人員更快的獲得可靠的實(shí)驗(yàn)結(jié)果,進(jìn)一步擴(kuò)大了蛋白質(zhì)-DNA互作研究產(chǎn)品組合,重磅推出了完整的CUT&Tag(CleavageUnderTargetsandTagmentation)解決方案,包括CUT&Tag試劑盒(#77552)、建庫(kù)試劑盒(#47415)、抗體和適用于細(xì)胞以及組織的實(shí)驗(yàn)步驟說(shuō)明書。CUT&Tag實(shí)驗(yàn)步驟對(duì)于CSTCUT&Tag實(shí)驗(yàn),首先將細(xì)胞與刀豆蛋白
探索電動(dòng)移液器的工作原理與維護(hù)要點(diǎn)2024/06/03
電動(dòng)移液器的工作原理與維護(hù)要點(diǎn)概述如下:工作原理電動(dòng)移液器采用先進(jìn)的微型電機(jī)技術(shù)作為其動(dòng)力源。通過(guò)電流的驅(qū)動(dòng),電機(jī)帶動(dòng)活塞或泵頭進(jìn)行上下活動(dòng),從而實(shí)現(xiàn)了液體的吸取和排放。這一過(guò)程中,電機(jī)的轉(zhuǎn)速和轉(zhuǎn)向被精確控制,確保了液體樣品的精確吸取和排放。此外,電動(dòng)移液器還配備了可調(diào)節(jié)的容量旋鈕或數(shù)字顯示屏,用戶可以根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求設(shè)定所需的液體體積。移液器內(nèi)部的控制系統(tǒng)會(huì)根據(jù)設(shè)定的容量值,精確控制電機(jī)的運(yùn)動(dòng),確保液體轉(zhuǎn)移的精確性。維護(hù)要點(diǎn)定期校準(zhǔn):為確保移液精度,電動(dòng)移液器應(yīng)定期進(jìn)行校準(zhǔn)。這可以在使用前或使用一
【科研明星細(xì)胞】HEK293細(xì)胞系培養(yǎng)攻略2024/05/30
HEK293細(xì)胞系家族歷史概覽1973年,科學(xué)家從一個(gè)父母譜系不祥的人類流產(chǎn)胚胎的腎臟中分離出最原始的人胚腎細(xì)胞,即293細(xì)胞(humanembryonickidney(HEK)293cellline),該細(xì)胞被轉(zhuǎn)入修改后的5型腺病毒DNA片段,一開(kāi)始轉(zhuǎn)化非常困難,一直到幾個(gè)月后,科學(xué)家得到一個(gè)穩(wěn)定的可以快速生長(zhǎng)的293單克隆細(xì)胞株,自此HEK293誕生。HEK293細(xì)胞在細(xì)胞生物學(xué)和生物技術(shù)中的應(yīng)用頻率僅次于第一個(gè)人類細(xì)胞系HeLa,并衍生出數(shù)百種克隆細(xì)胞系。SV40largeT抗原穩(wěn)轉(zhuǎn)入HE
ELISA包括哪些實(shí)驗(yàn)步驟和注意事項(xiàng)2024/05/23
ELISA實(shí)驗(yàn)步驟圖3ELISA標(biāo)準(zhǔn)實(shí)驗(yàn)流程實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:1.樣本采集:a)血漿:采集血漿時(shí)可使用EDTA、肝素或檸檬酸鹽作為抗凝血?jiǎng)?。采集?0分鐘內(nèi),1000xg離心15分鐘。立即檢測(cè)或分裝后于≤-20℃儲(chǔ)存。避免反復(fù)凍融。b)細(xì)胞培養(yǎng)上清液:通過(guò)離心去除顆粒,立即檢測(cè)或分裝后將樣品于≤-20°C儲(chǔ)存。避免反復(fù)凍融。c)細(xì)胞裂解液:在裂解緩沖液中裂解細(xì)胞并將其放在冰上靜置30分鐘。14,000xg離心5分鐘除去不溶物。將上清液轉(zhuǎn)移至新管中利用總蛋白分析法定量總蛋白濃度。立即檢測(cè)或分裝后將樣品于
深入解析電動(dòng)移液器的核心技術(shù)與應(yīng)用2024/05/08
電動(dòng)移液器,作為現(xiàn)代實(shí)驗(yàn)室中的工具,以其高效、精準(zhǔn)和便捷的特性贏得了科研人員的青睞。下面,我們將深入解析電動(dòng)移液器的核心技術(shù)及其在實(shí)驗(yàn)室中的應(yīng)用。電動(dòng)移液器的核心技術(shù)主要體現(xiàn)在其精準(zhǔn)計(jì)量和穩(wěn)定吸液分液的能力上。其內(nèi)部采用電機(jī)驅(qū)動(dòng)活塞上下運(yùn)動(dòng),通過(guò)吸、擠手柄調(diào)節(jié)吸液和排液量,完成液體的容積分配和移液操作。這種設(shè)計(jì)不僅提高了操作的精度,還保證了實(shí)驗(yàn)結(jié)果的穩(wěn)定性和可靠性。在應(yīng)用方面,電動(dòng)移液器廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)療研究、醫(yī)藥工業(yè)、環(huán)境監(jiān)測(cè)等領(lǐng)域。在分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中,電動(dòng)移液器被用于DNA/RNA樣本的提取
細(xì)胞培養(yǎng)dmso的具體步驟和要求以及注意事項(xiàng)2024/04/25
一、細(xì)胞復(fù)蘇將凍存細(xì)胞從液氮中取出后,在37℃水浴鍋內(nèi)不斷搖動(dòng)促進(jìn)其融化。移人15ml離心管中,加入10ml預(yù)熱的DMEM*培養(yǎng)基,輕輕吹勻,離心,2000rpmX2min,棄上清液。加入10mlDMEM培養(yǎng)基清洗,棄上清液。加入10mlDMEM*培養(yǎng)基,輕輕吹打,接種于10cm盤中,在含5%CO2的細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。二、細(xì)胞傳代細(xì)胞密度達(dá)到80%~90%時(shí).去培養(yǎng)基,10mlPBS清洗2次。加入3ml含0.25%EDTA的胰蛋白酶,放人細(xì)胞培養(yǎng)箱3min。加人1mlDMEM*培養(yǎng)基終止胰酶消化
明星蛋白——GSPT12024/04/15
GSPT1是一種翻譯終止因子,通過(guò)結(jié)合eRF1來(lái)識(shí)別終止密碼子,迫使蛋白質(zhì)在翻譯后從核糖體中分離。下調(diào)GSPT1可導(dǎo)致多種腫瘤細(xì)胞中關(guān)鍵蛋白的異常表達(dá),抑制細(xì)胞增殖或誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡。GSPT1蛋白產(chǎn)品信息介紹如下:GSPT1蛋白種屬Human表達(dá)系統(tǒng)E.coli純度>90%分子標(biāo)記Unconjugated標(biāo)簽GST-Tag儲(chǔ)存條件-20to-70°C12個(gè)月;2to8°C1周,避免反復(fù)凍融圖1:GSPT1生物活性分析圖2:GSPT1SDS-PAGE檢測(cè)圖3:GSPT1SEC-HPLC檢測(cè)產(chǎn)品推薦:
Nature|棕色脂肪組織在低溫下對(duì)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的競(jìng)爭(zhēng)力竟比腫瘤組織強(qiáng)2024/04/11
通過(guò)冷刺激改變的整體代謝,棕色脂肪介導(dǎo)腫瘤抑制曹教授課題組研究各種疾病中血管生成的基本機(jī)制,這是血管形成的關(guān)鍵過(guò)程。目標(biāo)是了解血管生成在最常見(jiàn)和致命的人類疾病(如癌癥、代謝性疾病和心血管疾病)的發(fā)病和進(jìn)展中的分子和功能機(jī)制。背景部分介紹:代謝改變是癌癥和惡性細(xì)胞的標(biāo)志之一,惡性細(xì)胞經(jīng)常重編程代謝以促進(jìn)其生長(zhǎng)、增殖、遷移和生存。大多數(shù)癌癥所共有的代謝改變的一個(gè)顯著特征是葡萄糖的高攝取,并通過(guò)發(fā)酵代謝產(chǎn)生乳酸。在有氧條件下,癌細(xì)胞利用葡萄糖-發(fā)酵-乳酸途徑以ATP的形式利用能量。與健康細(xì)胞線粒體中的
31分文獻(xiàn)揭示棕櫚酰化與胰島素分泌的相關(guān)性2024/04/09
棕櫚?;悸?lián)胰島素分泌亢進(jìn)與糖尿病β細(xì)胞衰竭作者簡(jiǎn)介:本文亮點(diǎn):APT1在人胰島中表達(dá)改變APT1缺乏導(dǎo)致胰島素分泌過(guò)多APT1底物Scamp1缺乏導(dǎo)致胰島素分泌過(guò)多APT1缺乏促進(jìn)高脂喂養(yǎng)小鼠和db/db小鼠的β細(xì)胞衰竭背景部分介紹:II型糖尿病(T2D)是一種致命的多系統(tǒng)疾病,以循環(huán)葡萄糖水平升高為特征。T2D的高血糖是由β細(xì)胞功能障礙引起的,通常在胰島素耐受的情況下發(fā)生。高胰島素血癥常見(jiàn)于T2D,高血糖可能代表β細(xì)胞無(wú)法補(bǔ)償外周胰島素抵抗。T2D演變的機(jī)制尚不清楚,該疾病有一系列表現(xiàn),包括
超濾離心濃縮管:高效濃縮與分離的新選擇2024/04/07
在生物樣本處理、藥物研發(fā)以及實(shí)驗(yàn)室研究中,高效濃縮與分離技術(shù)一直是科研人員追求的目標(biāo)。近年來(lái),超濾離心濃縮管作為一種新型濃縮分離工具,以其高效、便捷的特點(diǎn),逐漸受到廣大科研人員的青睞。超濾離心濃縮管結(jié)合了超濾技術(shù)和離心技術(shù)的優(yōu)勢(shì),實(shí)現(xiàn)了對(duì)生物樣本的高效濃縮與分離。其工作原理是通過(guò)超濾膜的選擇性過(guò)濾作用,將樣本中的大分子物質(zhì)截留,而小分子物質(zhì)則通過(guò)膜孔排出,從而實(shí)現(xiàn)樣本的濃縮。同時(shí),離心力的作用加速了濃縮過(guò)程,提高了處理效率。在生物樣本處理中,超濾離心濃縮管的應(yīng)用廣泛。例如,在蛋白質(zhì)純化過(guò)程中,科
46.9分|急性髓系白血病AML靶向治療新技術(shù)2024/03/29
急性髓系白血病(AML)是成人中最常見(jiàn)的急性白血病,其特點(diǎn)是骨髓(BM)和外周血中髓系前體的克隆擴(kuò)增。AML的醫(yī)療需求明顯未得到滿足,高達(dá)50%的患者在初始化療后復(fù)發(fā),老年患者的預(yù)后仍然很差。一些靶向免疫療法,如單克隆抗體、雙特異性T(TCE)和殺傷細(xì)胞接合分子,以及嵌合抗原受體(CAR-T)細(xì)胞,目前正在臨床評(píng)估中。它們靶向AML原細(xì)胞上表達(dá)的各種抗原,其中CD33和CD123抗原是最常見(jiàn)的靶標(biāo)。CD123是IL-3受體(IL-3Rα)的α鏈,在AML中經(jīng)常高水平表達(dá),主要表達(dá)于白血病干細(xì)胞或
Nature | NINJ1細(xì)胞死亡研究領(lǐng)域新進(jìn)展2024/03/28
使用NINJ1抗體抑制膜撕裂限制組織損傷背景部分介紹:NINJ1是一種16kDa的細(xì)胞表面蛋白,預(yù)計(jì)具有兩個(gè)跨膜區(qū)域,并且在細(xì)胞外部具有N和C端。雖然對(duì)細(xì)胞死亡的誘導(dǎo)是非必要的,但NINJ1控制著細(xì)胞凋亡或焦亡的一個(gè)重要后果,介導(dǎo)PMR(plasmamembranerupture),非選擇性地從死亡細(xì)胞中釋放促炎細(xì)胞質(zhì)內(nèi)容物。NINJ1依賴性PMR是否會(huì)加重疾病中的組織損傷尚不清楚,但據(jù)報(bào)道,在小鼠模型中,Ninj1缺乏可減輕肺纖維化和多發(fā)性硬化癥。鑒于NINJ1的一個(gè)保守的細(xì)胞外區(qū)域?qū)ζ涔丫刍?
調(diào)控多種生物功能的肌動(dòng)蛋白波2024/03/20
30年前,研究人員在土壤變形蟲(chóng)盤狀變形蟲(chóng)中shou次觀察到,細(xì)胞皮層中的肌動(dòng)蛋白結(jié)構(gòu)可以形成動(dòng)態(tài)的波浪狀圖案1,2。隨后,越來(lái)越多的其他類型的細(xì)胞中也發(fā)現(xiàn)了肌動(dòng)蛋白波,包括中性粒細(xì)胞、樹(shù)突狀細(xì)胞、T細(xì)胞、神經(jīng)元、內(nèi)皮細(xì)胞、成纖維細(xì)胞和角膜細(xì)胞1,3,4。雖然肌動(dòng)蛋白波在形態(tài)、傳播速度和生化成分上存在很大差異3(圖1),但它們可以被廣泛地定義為“在肌動(dòng)蛋白皮層中以波狀方式傳播的絲狀肌動(dòng)蛋白密度增加的微米級(jí)細(xì)胞骨架區(qū)域”1。早期的許多研究工作都在探討肌動(dòng)蛋白在細(xì)胞遷移和分裂中的作用1,但現(xiàn)在人們發(fā)現(xiàn)
mRNA治療領(lǐng)域的挑戰(zhàn)與前景2024/03/20
2020年,北京理工大學(xué)前沿交叉科學(xué)研究院黃淵余研究員課題組在生物領(lǐng)域*期刊《BiotechnologyAdvances》發(fā)表了題為《ThechallengeandprospectofmRNAtherapeuticslandscape》的綜述論文(IF=12.831),系統(tǒng)總結(jié)了mRNA療法的關(guān)鍵技術(shù)和研究進(jìn)展(圖1)。圖1mRNA療法示意圖(a)體外轉(zhuǎn)錄mRNA的結(jié)構(gòu);(b)mRNA遞送載體示意圖;(c)mRNA入胞表達(dá)目的蛋白示意圖基于信使RNA(mRNA)、小干擾RNA(siRNA)、以及
肌聯(lián)蛋白LTTN1調(diào)控T淋巴細(xì)胞的遷移2024/03/14
在細(xì)胞遷移過(guò)程中,循環(huán)T淋巴細(xì)胞會(huì)受到環(huán)境因素、作用力和細(xì)胞變形的影響,這些都是通過(guò)機(jī)械傳導(dǎo)機(jī)制來(lái)引起細(xì)胞反應(yīng)的。Toffali等人1試圖找出控制這些機(jī)械傳導(dǎo)機(jī)制的關(guān)鍵調(diào)節(jié)蛋白,從而調(diào)控T淋巴細(xì)胞的遷移。他們利用質(zhì)譜分析和蛋白相互作用研究將肌聯(lián)蛋白確定為潛在靶標(biāo),并通過(guò)RNA測(cè)序分析進(jìn)行了驗(yàn)證。有趣的是,他們發(fā)現(xiàn)在T淋巴細(xì)胞中活躍表達(dá)的肌聯(lián)蛋白有3種亞型,這些發(fā)現(xiàn)通過(guò)流式細(xì)胞術(shù)得到了驗(yàn)證。為了進(jìn)一步研究肌聯(lián)蛋白的第一種亞型LTTN1的作用,他們用四種siRNA沉默了該蛋白,使該蛋白的水平降低了4
磁性(氧化鐵)納米顆粒種類及應(yīng)用2024/03/13
FortisLifeSciences在合成與開(kāi)發(fā)復(fù)雜納米材料和涂層方面擁有豐富的經(jīng)驗(yàn),可根據(jù)客戶需求生產(chǎn)出各種特性良好、精確匹配的磁性納米顆粒。公司具有不同成分、尺寸、形態(tài)和表面功能的磁性納米材料產(chǎn)品。1、磁性等離子體金納mi殼金納mi殼通常由一個(gè)電介質(zhì)內(nèi)核、薄二氧化硅層和均勻薄金外層(圖1)組成,具有du特且可調(diào)的光學(xué)特性。這種材料可用于醫(yī)學(xué)診斷和光熱療法。FortisLifeSciences利用超順磁性納米顆粒內(nèi)核、二氧化硅間隔層以及金外殼,制造出磁性材料。通過(guò)調(diào)整整體顆粒的尺寸或金殼的直徑
電動(dòng)移液器操作技巧與維護(hù)保養(yǎng)指南2024/03/07
電動(dòng)移液器作為實(shí)驗(yàn)室中常用的精密儀器,其正確的操作與日常的維護(hù)保養(yǎng)對(duì)于確保移液的準(zhǔn)確性和儀器的使用壽命至關(guān)重要。以下是一些關(guān)于電動(dòng)移液器的操作技巧和維護(hù)保養(yǎng)的建議。在操作方面,首先要確保電動(dòng)移液器在使用前進(jìn)行校準(zhǔn),以保證其移液精度。使用時(shí),要選擇合適的移液頭,并根據(jù)需要調(diào)節(jié)移液量。在吸取液體時(shí),要保持移液器垂直,避免傾斜或晃動(dòng),以防止氣泡的產(chǎn)生。同時(shí),要注意移液器的量程范圍,避免超出其最大量程,以免對(duì)儀器造成損壞。此外,使用完畢后,應(yīng)及時(shí)清潔移液頭和移液器外殼,避免液體殘留對(duì)儀器造成腐蝕。在更換
小G蛋白研究工具2024/03/05
小G蛋白,是具有GTP酶活性的一類蛋白,因其分子量只有20—30KD而得名。第一個(gè)被發(fā)現(xiàn)的小G蛋白是Ras,它是Ras基因的產(chǎn)物。根據(jù)序列的同源性,小G蛋白被分成若干亞家族,例如Rho,Ras,Ran,Rab,Arf和Rad/Rem/Gem/Kir。小G蛋白家族成員在細(xì)胞信號(hào)通路中具有分子開(kāi)關(guān)的功能,并參與調(diào)控許多生物學(xué)過(guò)程。下面小優(yōu)就帶大家一起來(lái)看看小G蛋白具體的功能以及研究方法吧~Part1小G蛋白的功能1、Rho亞家族Rho亞家族由20多個(gè)成員組成,目前研究得最多的是Rac1、RhoA和C
多發(fā)性骨髓瘤MM新進(jìn)展(模型建立)2024/02/27
背景部分介紹:多發(fā)性骨髓瘤(MM)是一種骨髓(BM)漿細(xì)胞(PCs)的腫瘤,其分泌單克隆免疫球蛋白,誘導(dǎo)多器官損傷。MM主要發(fā)生在老年人中,前兆階段包括兩種類型,一種稱為意義不明的單克隆γ病(MGUS);另一種是MGUS向MM進(jìn)展的一個(gè)過(guò)渡階段,稱為陰燃型多發(fā)性骨髓瘤(SMM)。了解從前驅(qū)疾病發(fā)展為臨床活動(dòng)性MM的機(jī)制可能有助于對(duì)特定人群實(shí)施早期治療。遺傳異質(zhì)性是MM的一個(gè)標(biāo)志。免疫球蛋白編碼基因的染色體易位和高二倍體被認(rèn)為是早期遺傳事件,隨后是NF-κB、MAPK-RAS和凋亡通路的異常,從而
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