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2024
04-11

用二氧化碳培養(yǎng)箱做海馬神經(jīng)元細(xì)胞分離培養(yǎng)
海馬神經(jīng)元細(xì)胞分離培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)1、儀器二氧化碳培養(yǎng)箱，解剖鏡，眼科鑷，眼科剪2、動物新生鼠（SD大鼠）3、耗材DMEM/F12培養(yǎng)基、聚賴氨酸實(shí)驗(yàn)步驟：包被：培養(yǎng)前一天將培養(yǎng)板或培養(yǎng)瓶或皿用0.01%多聚賴氨酸包被過夜。第二天早上來吸除包被液在無菌超凈臺中自然晾干后放置于二氧化碳培養(yǎng)箱中備用。配制神經(jīng)元專用培養(yǎng)基（DMEM/F12培養(yǎng)基中添加1%谷氨酰胺，2%B27，1%雙抗）取腦：選取新生24h之內(nèi)的SD大鼠數(shù)只,雌雄不限,75%酒精全身消毒,斷頭處死,無菌條件下分層剪開頭皮,顱骨,用彎鑷?yán)_腦區(qū)
2024
04-10

小量質(zhì)粒DNA的提取之堿裂解法
此方法適用于小量質(zhì)粒DNA的提取，提取的質(zhì)粒DNA可直接用于酶切、PCR擴(kuò)增、銀染序列分析。方法如下：1、接1%含質(zhì)粒的大腸桿菌細(xì)胞于2mlLB培養(yǎng)基2、37℃振蕩培養(yǎng)箱過夜3、取1.5ml菌體于Ep管，以4000rpm離心3min，棄上清液4、加0.lml溶液I(1％葡萄糖，50mM/LEDTApH8.0，25mM/LTris-HClpH8.0)充分混合5、加入0.2ml溶液II(0.2mM/LNaOH，1％SDS)，輕輕翻轉(zhuǎn)混勻，置于冰浴5min6、加入0.15ml預(yù)冷溶液III(5mol/
2024
04-10

真空干燥箱做三聚氰胺實(shí)驗(yàn)
三聚氰胺（C3H6N6）是一種有機(jī)化合物，因其化學(xué)結(jié)構(gòu)中含有三個氰基（-CN）而得名。在實(shí)驗(yàn)中使用真空干燥箱進(jìn)行三聚氰胺實(shí)驗(yàn)，可能是為了在低壓環(huán)境下除去三聚氰胺樣品中的水分，以獲得干燥的樣品。以下是一個簡化的實(shí)驗(yàn)步驟，但請注意，具體實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)遵循實(shí)驗(yàn)室安全規(guī)范和化學(xué)品操作指南。實(shí)驗(yàn)步驟：準(zhǔn)備：確保實(shí)驗(yàn)室通風(fēng)良好，穿戴適當(dāng)?shù)膫€人防護(hù)裝備，如實(shí)驗(yàn)服、手套、護(hù)目鏡等。稱量：準(zhǔn)確稱取一定量（根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要確定）的三聚氰胺樣品。裝樣：將稱量好的三聚氰胺樣品放入干燥的試管或者稱量瓶中。預(yù)干燥：將裝有樣品的試管
2024
04-09

一文了解箱式電阻爐的使用注意事項(xiàng)
箱式電阻爐是一種常見的電爐形式，分為立式，臥式，分體式，一體式。使用溫度為1200度以下，1400度以下，1600度以下，1700度以下，分別以電阻絲、硅碳棒、硅鉬棒為發(fā)熱元件，根據(jù)需要可選擇，箱式電爐除通常在空氣中加熱外，還有可通氣氛和密封抽真空電爐，形式多樣。廣泛用于陶瓷、冶金、電子、玻璃、化工、機(jī)械、耐火材料、新材料開發(fā)、特種材料、建材等領(lǐng)域的生產(chǎn)及實(shí)驗(yàn)。箱式電阻爐使用注意事項(xiàng)：1.使用時爐膛溫度不得超過額定爐溫，也不要長時間工作在額定溫度以上。2.工作環(huán)境條件為：溫度0～50℃，相對濕度
2024
04-08

如何快速估算每次實(shí)驗(yàn)放幾只動物？
動物實(shí)驗(yàn)設(shè)計應(yīng)遵循實(shí)行“3R原則”，包括實(shí)驗(yàn)動物的替代、減少和優(yōu)化原則，其中減少即指盡量減少實(shí)驗(yàn)動物的數(shù)量。查閱文獻(xiàn)，并未發(fā)現(xiàn)對實(shí)驗(yàn)動物數(shù)目有絕對要求，但在減少的同時，一定要滿足統(tǒng)計學(xué)要求。統(tǒng)計學(xué)上要求一般至少每組有6個可用數(shù)據(jù)，才有意義。一般小鼠的每組一般不少于10只；一般大鼠每組不少于6只；大動物等級越高，價格越貴，根據(jù)情況可適當(dāng)減少，但一般不能少于4-5只。作為實(shí)驗(yàn)設(shè)計者，我們不僅僅知其然，也要知其所以然1、為什么要進(jìn)行樣本量估算？科學(xué)性要求：使研究設(shè)計更加嚴(yán)謹(jǐn)。倫理學(xué)考慮：對于實(shí)驗(yàn)動物研
2024
04-08

細(xì)胞傳代培養(yǎng)的流程和注意事項(xiàng)
細(xì)胞傳代培養(yǎng)的流程和注意事項(xiàng)如下：1、當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到其生長密度高處時（一般腫瘤細(xì)胞為80-100%，原代細(xì)胞和干細(xì)胞為80-90%，有些細(xì)胞為40-50%，熟知所養(yǎng)細(xì)胞的生長密度極限），移除舊培養(yǎng)液；2、用PBS洗滌兩次（舊培養(yǎng)中的鈣離子會抑制胰酶的活性），加入1ml胰酶消化液（以T25培養(yǎng)瓶為例），立即蓋好蓋子，把培養(yǎng)瓶置于倒置顯微鏡下觀察，如大部分細(xì)胞變圓，立即移除胰酶消化液（如大部分細(xì)胞漂起，可不移除胰酶消化液），加入5ml預(yù)熱培養(yǎng)基，用吸管取培養(yǎng)液吹打瓶壁細(xì)胞，使其脫離瓶壁形成單細(xì)胞懸液
2024
04-03

TUNEL法檢測細(xì)胞凋亡原理和經(jīng)驗(yàn)
TUNEL法檢測細(xì)胞凋亡原理和經(jīng)驗(yàn)細(xì)胞凋亡中,染色體DNA雙鏈斷裂或單鏈斷裂而產(chǎn)生大量的粘性3'-OH末端，可在脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶（TdT）的作用下，將脫氧核糖核苷酸和熒光素、過氧化物酶、堿性磷酸酶或生物素形成的衍生物標(biāo)記到DNA的3'-末端，從而可進(jìn)行凋亡細(xì)胞的檢測，這類方法稱為脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的缺口末端標(biāo)記法。由于正常的或正在增殖的細(xì)胞幾乎沒有DNA的斷裂，因而沒有3'-OH形成，很少能夠被染色。由此，TUNEL成為了檢測DNA片段化（細(xì)胞凋亡）的方法。TUNEL檢測：使用
2024
04-02

如何使用馬弗爐融化金屬粉末？
使用馬弗爐融化金屬粉末是在實(shí)驗(yàn)室或工業(yè)生產(chǎn)中常見的一種操作，需要遵循安全規(guī)程和科學(xué)的操作步驟。以下是一個基本的操作流程：準(zhǔn)備工作：在開始之前，確保馬弗爐已經(jīng)清潔，并預(yù)熱至所需的溫度。準(zhǔn)備金屬粉末，確認(rèn)其化學(xué)成分和純度，確保它適合在馬弗爐中融化。準(zhǔn)備適當(dāng)?shù)娜诨ぞ?，如耐火勺或crucible（坩堝）。裝載金屬粉末：將金屬粉末裝入耐火材料制成的坩堝中，注意不要裝得太滿，以免在融化過程中溢出。放入馬弗爐：輕輕地將裝有金屬粉末的坩堝放入馬弗爐內(nèi)。慢慢升降溫度的速度不可太快，以免金屬粉末濺出或者造成熱沖擊
2024
03-27

免疫組化實(shí)驗(yàn)常見問題分析
1.IHC實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯色過深一抗?jié)舛冗^高或孵育時間過長——降低一抗?jié)舛然驕p少孵育時間孵育溫度過高——選擇4℃或室溫孵育2.實(shí)驗(yàn)結(jié)果存在非特異性顯色石蠟切片脫蠟——延長脫蠟時間蛋白封閉不充分——增加蛋白封閉時間組織富含內(nèi)源性生物素與過氧化物酶——使用相關(guān)試劑進(jìn)行封閉3.實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯色弱或無染色一抗?jié)舛冗^低或孵育時間過短——增加一抗?jié)舛然蜓娱L孵育時間組織中無目的抗原的表達(dá)一抗種屬來源與二抗不匹配注意事項(xiàng)切片脫蠟和水化要充分，加反應(yīng)液時要覆蓋組織充分；每次加液前甩干洗滌液，同時防止干片。一抗的沖洗原則：單
2024
03-27

細(xì)胞培養(yǎng)板的選購技巧
細(xì)胞培養(yǎng)板是進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)的重要工具，選擇適合的細(xì)胞培養(yǎng)板對于細(xì)胞的生長和實(shí)驗(yàn)結(jié)果具有重要影響。本文將介紹一些選擇細(xì)胞培養(yǎng)板的關(guān)鍵因素，并提供一些應(yīng)用案例進(jìn)行說明。1.培養(yǎng)板材質(zhì)：細(xì)胞培養(yǎng)板的材質(zhì)是一個重要的考慮因素。目前市場上主要有塑料和玻璃兩種材質(zhì)的培養(yǎng)板。塑料培養(yǎng)板價格較低且易于使用，而玻璃培養(yǎng)板具有更好的透明度和耐高溫的特性。根據(jù)實(shí)驗(yàn)需要，可以選擇適合的材質(zhì)。2.表面涂層：細(xì)胞培養(yǎng)板的表面涂層可以影響細(xì)胞黏附和增殖。常用的涂層包括凝膠體、膠原蛋白、明膠等。例如，凝膠體涂層可以增加細(xì)胞對基質(zhì)
2024
03-26

微生物檢驗(yàn)中培養(yǎng)基制備的注意事項(xiàng)
培養(yǎng)基的作用是為微生物提供生長和繁殖所需的營養(yǎng)物質(zhì)和環(huán)境條件。培養(yǎng)基的質(zhì)量直接關(guān)系到檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性，因此對于微生物檢驗(yàn)而言，培養(yǎng)基的質(zhì)量控制尤為重要。培養(yǎng)基的主要作用有兩方面：①提供微生物生長所需的營養(yǎng)物質(zhì)；②培養(yǎng)基具有選擇性和差異性，可以選擇特定類型的細(xì)菌或真菌進(jìn)行培養(yǎng)，并區(qū)分不同種類的微生物。因此，在微生物檢驗(yàn)中，必須對培養(yǎng)基進(jìn)行嚴(yán)格的質(zhì)量控制，只有優(yōu)質(zhì)的培養(yǎng)基才能為微生物檢驗(yàn)提供精準(zhǔn)、可靠的檢測結(jié)果。培養(yǎng)基的概述培養(yǎng)基是用于保證微生物繁殖、鑒定、保持活力的物質(zhì)，按照物理性質(zhì)可以分
2024
03-26

海馬神經(jīng)元細(xì)胞分離培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)
海馬神經(jīng)元細(xì)胞分離培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)1、儀器CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱，解剖鏡，眼科鑷，眼科剪2、動物新生鼠（SD大鼠）3、耗材DMEM/F12培養(yǎng)基、聚賴氨酸實(shí)驗(yàn)步驟：包被：培養(yǎng)前一天將培養(yǎng)板或培養(yǎng)瓶或皿用0.01%多聚賴氨酸包被過夜。第二天早上來吸除包被液在無菌超凈臺中自然晾干后放置于CO2細(xì)胞培養(yǎng)箱中備用。配制神經(jīng)元專用培養(yǎng)基（DMEM/F12培養(yǎng)基中添加1%谷氨酰胺，2%B27，1%雙抗）取腦：選取新生24h之內(nèi)的SD大鼠數(shù)只,雌雄不限,75%酒精全身消毒,斷頭處死,無菌條件下分層剪開頭皮,顱骨,用彎鑷?yán)_
2024
03-25

關(guān)于細(xì)胞劃痕法的詳細(xì)介紹
細(xì)胞劃痕(woundhealing）法是簡捷測定細(xì)胞遷移運(yùn)動和修復(fù)能力的方法。一、原理在體外培養(yǎng)皿或平板培養(yǎng)的單層貼壁細(xì)胞上，用微量槍頭或其它硬物在細(xì)胞生長的中央?yún)^(qū)域劃線，去除中央部分的細(xì)胞，然后繼續(xù)培養(yǎng)細(xì)胞至實(shí)驗(yàn)設(shè)定的時間，取出細(xì)胞培養(yǎng)板，在顯微鏡下觀察并拍照記錄特定位置細(xì)胞的生長遷移能力。通過不同分組之間的細(xì)胞對于劃痕區(qū)修復(fù)能力的不同，可以判斷各組細(xì)胞的遷移與修復(fù)能力的差別。二、步驟1、準(zhǔn)備：所有能滅菌的器械都要滅菌，直尺和marker筆在操作前紫外照射30min（超凈臺內(nèi)）2、流程：1.培
2024
03-25

長期和短期保藏菌種的方法介紹
菌種保藏是指保持微生物菌株的活力和遺傳性狀的技術(shù)。微生物在使用和傳代過程中容易發(fā)生污染、變異甚至死亡，因而常常造成菌種的衰退。菌種保藏的目的就是使菌株存活、不丟失、不污染雜菌、不發(fā)生或少發(fā)生變異，保持菌種原有的活性和各種特征。菌種保藏的基本原理是使微生物的生命活動處于半休眠狀態(tài)，也就是將微生物的新陳代謝作用限制在低范圍內(nèi)。菌種保藏的方法很多，但原理大同小異。首先要挑選優(yōu)良純種。利用微生物的孢子、芽孢及營養(yǎng)體；其次，根據(jù)其生理、生化性，人為創(chuàng)造低溫、干燥或缺氧等條件，抑制微生物的代謝作用，使其生命
2024
03-22

箱式電阻爐在使用時如何確保安全用電？
箱式電阻爐顧名思義，指形狀類似一個矩形箱體主要由爐體和控制箱兩大部分組成的設(shè)備，又稱馬弗爐、高溫馬弗爐,是一種通用的加熱設(shè)備。箱式電阻爐一般工作在自然氣氛條件下，多為內(nèi)加熱工作方式，采用耐火材料和保溫材料做爐襯。主要用于對工件進(jìn)行正火、退火、淬火等熱處理及其他加熱用途。箱式電阻爐和馬弗爐的區(qū)別在于：箱式電阻爐,的結(jié)構(gòu)如同一個電烤箱，只是體積大些，在1200度以下。因?yàn)榭煞藕芏嗉訜狍w，主要用于熱處理等生產(chǎn)，大型部件產(chǎn)品溫度試驗(yàn)等。馬弗爐，通常做成桶狀，大多數(shù)采用高溫材料和加熱器件，最高溫度可達(dá)到2
2024
03-21

什么事是分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)常用的儀器設(shè)備？
在分子水平上研究生命現(xiàn)象的科學(xué)。通過研究生物大分子(核酸、蛋白質(zhì))的結(jié)構(gòu)、功能和生物合成等方面來闡明各種生命現(xiàn)象的本質(zhì)。研究內(nèi)容包括各種生命過程。比如光合作用、發(fā)育的分子機(jī)制、神經(jīng)活動的機(jī)理、癌的發(fā)生等。分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)包含了生物大分子制備和分析常用技術(shù)、蛋白質(zhì)與核酸的提取與分離、PCR技術(shù)、分子雜交與印跡技術(shù)、分子克隆技術(shù)、外源基因轉(zhuǎn)移技術(shù)、蛋白質(zhì)表達(dá)技術(shù)、分子標(biāo)記技術(shù)、分子改造技術(shù)、測序及人工合成技術(shù)、基因組學(xué)技術(shù)、蛋白質(zhì)組學(xué)技術(shù)、生物芯片技術(shù)、生物信息學(xué)技術(shù)、RNA研究技術(shù)等。分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)
2024
03-21

高溫馬弗爐快灰分和慢灰分的區(qū)別
快灰分和慢灰分是煤炭分析中的兩個術(shù)語，它們描述了煤炭在加熱時失去可燃成分的過程。這一過程通常在一個被稱為灰分analyzer的設(shè)備中進(jìn)行，該設(shè)備按照規(guī)定的加熱速率對煤炭樣品進(jìn)行加熱。快灰分（Quickash）：快灰分是指在高溫馬弗爐較快的加熱速度下進(jìn)行的灰分測定。這種方法適用于測定煤炭中的揮發(fā)分，因?yàn)榭旎曳挚梢愿玫啬M實(shí)際燃燒過程中煤炭中可燃成分的釋放速度?？旎曳滞ǔＴ谳^高的溫度（例如850°C或更高）下進(jìn)行，以加速可燃成分的釋放。慢灰分（Slowash）：慢灰分則是高溫馬弗爐在較慢的加熱速度
2024
03-19

用生化培養(yǎng)箱做免疫熒光實(shí)驗(yàn)
用生化培養(yǎng)箱做免疫熒光實(shí)驗(yàn)的流程如下：1、細(xì)胞準(zhǔn)備（1）取出生長狀態(tài)良好的細(xì)胞，棄培養(yǎng)基，消化重懸細(xì)胞。（2）將24孔圓形爬片放入24孔板的孔中。（3）根據(jù)細(xì)胞生長特性取適量細(xì)胞于已鋪爬片的24孔板中，放入37℃生化培養(yǎng)箱培養(yǎng)。2、固定（1）取出細(xì)胞，棄去培養(yǎng)基，用PBS洗細(xì)胞3次。（2）每孔加入1mL的4%多聚甲醛，室溫固定10-20min，棄去多聚甲醛；（3）加入1mL的PBS清洗細(xì)胞，重復(fù)兩次。3、通透（1）每孔加入1mL的0.5%Triton-X100，室溫10min，棄去Triton-
2024
03-18

電熱恒溫培養(yǎng)箱做菌落總數(shù)實(shí)驗(yàn)
電熱恒溫培養(yǎng)箱是一種常用的實(shí)驗(yàn)室設(shè)備，用于微生物的培養(yǎng)、保存和計數(shù)等實(shí)驗(yàn)。在菌落總數(shù)實(shí)驗(yàn)中，電熱恒溫培養(yǎng)箱主要用于菌落的培養(yǎng)和計數(shù)。以下是使用電熱恒溫培養(yǎng)箱進(jìn)行菌落總數(shù)實(shí)驗(yàn)的基本步驟：樣品處理：首先，需要從樣品中分離出微生物。這通常涉及到樣品的稀釋和分散。涂布平板：將處理好的樣品涂布到適合的培養(yǎng)基上，通常使用固體培養(yǎng)基，如牛肉膏蛋白胨瓊脂平板。放入培養(yǎng)箱：將涂布好的平板放入電熱恒溫培養(yǎng)箱中。根據(jù)微生物的生長特性，選擇合適的溫度進(jìn)行培養(yǎng)。通常，細(xì)菌在30-37℃的溫度下生長最佳，而真菌則在25℃左
2024
03-18

高溫馬弗爐煅燒六氯化鎢來制備三氧化鎢的流程
高溫馬弗爐煅燒六氯化鎢制備三氧化鎢的流程如下：準(zhǔn)備原料：首先，我們需要準(zhǔn)備六氯化鎢（WCl6）作為原料。六氯化鎢是一種無色或淡黃色的晶體，具有較高的熔點(diǎn)（約175°C）和沸點(diǎn)（約197°C）。裝爐：將六氯化鎢放入高溫馬弗爐中。馬弗爐是一種用于高溫加熱的爐子，具有良好的保溫性能，可以控制溫度。煅燒：啟動馬弗爐，將溫度逐漸升至550°C。在煅燒過程中，六氯化鎢在高溫下發(fā)生熱分解，生成三氧化鎢（WO3）和氯化氫（HCl）氣體。煅燒過程中，需要保持馬弗爐的蓋子關(guān)閉，以防止氣體泄漏。冷卻：煅燒完成后，關(guān)閉

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