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青島捷世康生物科技有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第12年
氨基酸的分離與鑒定—雙向?qū)游龇?/a>2016/06/13
氨基酸的分離與鑒定——雙向?qū)游龇康囊螅?)、學(xué)習(xí)雙向紙層析的原理。(2)、掌握紙層析法分離混合氨基酸的操作方法。實(shí)驗(yàn)原理紙層析是以濾紙作支持物,用一定的溶劑系統(tǒng)展開,使混合樣品達(dá)到分析的層析方法。其一般操作是將樣品溶解在適當(dāng)溶劑中,點(diǎn)樣在濾紙的一端,再選用適當(dāng)?shù)娜軇┫到y(tǒng),從點(diǎn)樣的一端通過毛細(xì)現(xiàn)象向另一端展開,展開完畢,取出濾紙晾干或烘干,再以適當(dāng)?shù)娘@色劑或紫外燈、熒光燈下觀察其圖譜。樣品經(jīng)展開后某一物質(zhì)在紙層析譜上的位置常用比移植Rf來表示。Rf=原點(diǎn)至紙層析斑點(diǎn)中心點(diǎn)的距離→原點(diǎn)至溶劑前沿
考馬斯亮藍(lán)G-250法測(cè)定蛋白質(zhì)含量2016/05/30
考馬斯亮藍(lán)G-250法測(cè)定蛋白質(zhì)含量一、目的學(xué)習(xí)和掌握考馬斯亮藍(lán)G-250測(cè)定蛋白質(zhì)含量的原理和方法。二、原理考馬斯亮藍(lán)G-250(CoomassiebrilliantblueG-250)法測(cè)定蛋白質(zhì)含量屬于染料結(jié)合法??捡R斯亮藍(lán)G-250在游離狀態(tài)下呈紅色,zui大光吸收在465nm;當(dāng)它與蛋白質(zhì)結(jié)合后變?yōu)榍嗌?,該結(jié)合物在595nm波長(zhǎng)下有zui大光吸收。在一定蛋白質(zhì)濃度范圍內(nèi)(0~1000ug/mL),其光吸收值與蛋白質(zhì)含量成正比,因此可用于蛋白質(zhì)的定量測(cè)定。蛋白質(zhì)于考馬斯亮藍(lán)G-250結(jié)合
兔ELISA試劑盒的原理是怎樣的?2016/05/26
一般細(xì)胞因子的檢測(cè),都是采用常規(guī)的夾心法ELISA檢測(cè),由于因子分子量比力大,一般10幾個(gè)KD左右,很容易找到兩個(gè)或多個(gè)抗原表位。而小分子很難找到兩個(gè)不通的表位,也就決定了包被抗體和檢測(cè)抗體無法同時(shí)結(jié)合小分子并固相化。解決方案便是酶標(biāo)板上包被二抗,每個(gè)孔加入一定量的酶標(biāo)的小分子,然后加樣品,再加不帶標(biāo)志的檢測(cè)抗體,顯色底物。樣品的目標(biāo)小分子的含量越高,吸光度越低。病原體抗原的定性與定量,評(píng)估自己制備的血清抗體的效價(jià)等。兔ELISA試劑盒中封閉液的作用是讓不相關(guān)的蛋白占據(jù)微孔板中潛在的結(jié)合位點(diǎn)。這
呂氏堿性美藍(lán)染色液2016/05/23
呂氏堿性美藍(lán)染色液產(chǎn)品簡(jiǎn)介:亞甲基藍(lán)(Methyleneblue)又稱美藍(lán)、次甲基藍(lán)、次甲藍(lán)等,含水亞甲基藍(lán)的分子式為C16H24ClN3O3S,分子量為373.9,CAS號(hào)為7220-79-3。活細(xì)胞具有新陳代謝作用,從而使活細(xì)胞內(nèi)有較強(qiáng)的還原能力,能使美藍(lán)從藍(lán)色的氧化型變?yōu)闊o色的還原型。因此活細(xì)胞內(nèi)的美藍(lán)呈無色,死細(xì)胞或衰老的細(xì)胞還原能力極弱或消失,被美藍(lán)染成藍(lán)色或淡藍(lán)色。呂氏堿性美藍(lán)染色液常用于酵母菌的染色,不但可以觀察酵母菌的形態(tài),還可以區(qū)分活細(xì)胞和死細(xì)胞。因其容易氧化,染色結(jié)果不宜長(zhǎng)久
ATP 含量試劑盒說明書2016/05/03
ATP含量試劑盒說明書測(cè)定意義:ATP廣泛存在于動(dòng)物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,是生物能量通貨,能荷是描述細(xì)胞能量代謝狀態(tài)的主要參數(shù)。測(cè)定ATP含量并且計(jì)算能荷,能夠反映能量代謝狀態(tài)。測(cè)定原理:ATP在254nm下有吸收峰,可以利用液相色譜法測(cè)定其含量。需自備的實(shí)驗(yàn)用品:液相色譜儀、低速離心機(jī)、溶劑抽濾裝置、針頭式過濾器(水系,50個(gè),0.22μm)、濾膜(水系和有機(jī)系各1個(gè),0.45μm)、C18柱(4.6×150mm)、可調(diào)式移液器、樣品瓶(50個(gè),2mL)、甲醇(色譜級(jí),300mL)和蒸餾
谷胺酰胺合成酶試劑盒說明書2016/05/03
谷胺酰胺合成酶(Glutaminesynthetase,GS)試劑盒說明書分光光度法50管/24樣測(cè)定意義GS(EC6.3.1.2)主要存在于植物中,是生物體內(nèi)氨同化的關(guān)鍵酶之一,催化銨離子和谷氨酸合成谷氨酰胺,不僅可以防止過多的銨離子對(duì)生物有毒性,而且谷氨酰胺也是氨的主要儲(chǔ)存和運(yùn)輸形式。測(cè)定原理GS在ATP和Mg2+存在下,催化銨離子和谷氨酸合成谷氨酰胺;谷氨酰胺進(jìn)一步轉(zhuǎn)化為γ─谷氨?;惲u肟酸,在酸性條件下與鐵形成紅色的絡(luò)合物;該絡(luò)合物在540nm處有zui大吸收峰,可用分光光度計(jì)測(cè)定。所需
10%氫氧化鉀說明書2016/04/18
10%氫氧化鉀說明書產(chǎn)品簡(jiǎn)介:10%氫氧化鉀可以溶解上皮細(xì)胞、紅細(xì)胞、白細(xì)胞等,但不能溶解真菌、孢子菌和菌絲(含假菌絲)。產(chǎn)品組成:產(chǎn)品名稱規(guī)格storage10%氫氧化鉀100mlRT使用說明書1份操作步驟(僅供參考):取清潔玻片一張,滴加生理鹽水3—4滴。將陰道拭子在生理鹽水中涂抹適度。發(fā)現(xiàn)可以真菌孢子或菌絲(含假菌絲)時(shí)滴加10%氫氧化鉀3-4滴,混勻,在顯微鏡下觀察。結(jié)果判定:形狀符合且不被10%氫氧化鉀溶解者即為真菌。儲(chǔ)存:2-25℃,相對(duì)濕度40-75%,避光。有效期:12個(gè)月有效。
核固紅染色液(0.2%)2016/04/12
核固紅染色液(0.2%)產(chǎn)品簡(jiǎn)介:核固紅(Nuclearfastred)又稱細(xì)胞核堅(jiān)牢紅,分子式為C14H8NNaO7S,分子量為357.27,CAS號(hào)為6409-77-42,微紅至深棕色粉末,溶于乙醇和水。核固紅染色液(0.2%)是由核固紅、氧化劑組成,常用于細(xì)胞核染色。產(chǎn)品組成:產(chǎn)品100mlStorageNuclearfastredstain(0.2%)100mlRT避光使用說明書1份操作步驟(僅供參考):1、根據(jù)實(shí)驗(yàn)具體要求操作。2、一般復(fù)染細(xì)胞核時(shí)間控制在5~10min。染色結(jié)果:細(xì)胞
總鐵結(jié)合力(TIBC)檢測(cè)試劑盒(亞鐵嗪比色法)2016/03/15
總鐵結(jié)合力(TIBC)檢測(cè)試劑盒(亞鐵嗪比色法)產(chǎn)品簡(jiǎn)介:鐵是人體必需微量元素,總含量約為3270mg。鐵分布較廣,有67.6%的鐵作為血紅蛋白分子的輔基分布于血紅蛋白中,參不鐵的運(yùn)輸;骨骼和肌紅蛋白中各存在2.59%和4.15%,儲(chǔ)存鐵約占25.37%血清中鐵均以三價(jià)鐵離子形式不轉(zhuǎn)鐵蛋白結(jié)合,因此測(cè)定血清鐵時(shí),首先需要Fe不轉(zhuǎn)鐵蛋白分離??傝F結(jié)合力(TIBC)是指血清中轉(zhuǎn)鐵蛋白能不鐵結(jié)合的總量Jisskang總鐵結(jié)合力(TIBC)檢測(cè)試劑盒(亞鐵嗪比色法)是采用分光光度法以亞鐵嗪為底物進(jìn)行總鐵
阿利新藍(lán)染色液2016/02/29
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:阿利新藍(lán)(Alcian)又稱愛先藍(lán)或阿爾辛藍(lán)等,是一種類銅鈦花青共軛染料,zui初用于紡織纖維染色。這種陽離子染料與酸性基團(tuán)結(jié)合,也即阿爾辛藍(lán)與組織內(nèi)含有的陰離子基團(tuán)如羧基和硫酸根形成不溶性復(fù)合物。阿利新藍(lán)由中央含銅的酞菁環(huán)與四個(gè)異硫脲基通過硫醚鍵相連而成,該異硫脲基呈中度堿性,使阿利新藍(lán)帶陽離子。pH值為2.5時(shí),組織內(nèi)的羧基電離,帶有一個(gè)負(fù)電荷,與阿利新藍(lán)中的陽離子形成鹽鍵,使帶有羧基的酸性黏液物質(zhì)(硫酸黏蛋白和唾液黏蛋白)染色。pH值為1.0時(shí),組織內(nèi)的硫酸根電離,帶有一個(gè)負(fù)電荷
酶切反應(yīng)注意事項(xiàng)2016/01/15
酶切反應(yīng)注意事項(xiàng)限制酶價(jià)格昂貴,操作時(shí)應(yīng)注意下列原則許多購得限制酶為濃縮液,通常1ul(約10單位)酶液足以在1小時(shí)內(nèi)切割10ugDNA。當(dāng)需要從觀眾取出少量酶液時(shí),可用一次性移液器吸頭稍稍接觸頁面,這樣可取出少至0.1ul的酶液。另一種方法是將一根孔徑很小的塑料管(Icm長(zhǎng))套在1ul的微量注射器上,然后吸取酶液。濃縮的酶液可在使用前1X反應(yīng)緩沖液稀釋,但絕不能用水稀釋,以免變性失活。限制酶在含50%甘油的緩沖液中,-20℃下可穩(wěn)定保存。在家酶反應(yīng)之前,反應(yīng)管中應(yīng)預(yù)先加入除了酶以外的所有其他試
硝基四氮唑藍(lán)染色法、結(jié)晶紫染色法、固紫染色法2015/12/30
硝基四氮唑藍(lán)染色法、結(jié)晶紫染色法、固紫染色法、及Ziehl-Nidlsen染色法硝基四氮唑藍(lán)染色法:感染引起細(xì)胞內(nèi)還原性輔酶I的活力增強(qiáng),在細(xì)胞內(nèi)酶的作用部位,導(dǎo)致無色的四氮唑藍(lán)(nitrobluetetrazoliuntest,NBT)被還原為不溶于水的藍(lán)色沉淀物。這種大塊狀藍(lán)色沉淀物僅見于成熟和幼稚的嗜中性粒細(xì)胞胞漿中。文獻(xiàn)報(bào)道在細(xì)菌和真菌感染時(shí),嗜中性粒細(xì)胞百分率升高(>12%),康復(fù)期恢復(fù)正常。而病毒和結(jié)合感染時(shí)大多陰性。NBT測(cè)定還可以作為疾病病程和抗生素療效指標(biāo)。1、操作步驟如下①將
國(guó)產(chǎn)elisa試劑盒的原理是怎樣的?2015/10/20
在含有抑制劑的國(guó)產(chǎn)elisa試劑盒的培養(yǎng)基中生長(zhǎng)受到抑制,而當(dāng)外界提供苯丙氨酸環(huán)境時(shí),抑制作用解除,枯草桿菌即可恢復(fù)生長(zhǎng)且細(xì)菌生長(zhǎng)環(huán)的直徑與苯丙氨酸的含量呈正比。所以在制備好的培養(yǎng)基上,放上濾紙干血片,血中的苯丙氨酸會(huì)擴(kuò)散到周圍培養(yǎng)基中,被抑制的枯草桿菌即可恢復(fù)生長(zhǎng)。用被檢樣品的菌環(huán)直徑與標(biāo)準(zhǔn)品的菌環(huán)直徑相比,得出樣品中苯丙氨酸的含量。在正式測(cè)樣品前,依照實(shí)驗(yàn)步驟測(cè)定RMV各種標(biāo)準(zhǔn)濃度的A449nm值,以病毒標(biāo)準(zhǔn)濃度為橫坐標(biāo),A449nm值為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,由此可以測(cè)出RMV包被的濃度。國(guó)產(chǎn)
禽ELISAS試劑盒的原理是怎樣的?2015/10/14
禽ELISAS試劑盒的免疫測(cè)定技術(shù)的基礎(chǔ)在于抗原抗體之間的特異結(jié)合反應(yīng),所以任何的診斷試劑離不開的原料,如抗原抗體,酶等。以前用于免疫測(cè)定的抗原通常為各種純化抗原,而抗體則為純化抗原免疫動(dòng)物后獲得的多克隆抗體和使用雜交瘤技術(shù)得到的單克隆抗體,而抗原或抗體的標(biāo)記物如酶標(biāo)結(jié)合物則通過各種化學(xué)合成方法制備。近年來,隨著分子生物學(xué)的發(fā)展,使用基因工程方法制備各種特殊的抗原或抗體及其酶結(jié)合物等免疫測(cè)定試劑幾成為現(xiàn)實(shí)的新一代試劑,各種新型使用的測(cè)定方法也不斷出現(xiàn)。目前禽ELISAS試劑盒的方法已被廣泛應(yīng)用于
國(guó)產(chǎn)elisa試劑盒的注意事項(xiàng)有哪些?2015/09/28
國(guó)產(chǎn)elisa試劑盒在使用時(shí)需要將溶液在溶解過程中需不斷輕輕搖晃均勻,使溫度與成分均一,減少沉淀的發(fā)生,切勿直接將血清從-20度進(jìn)入37度解凍,這樣因溫度改變太大,容易造成蛋白質(zhì)凝集而出現(xiàn)沉淀。主要是血清中的脂蛋白變性及解凍后血清中纖維蛋白造成,這些絮狀物不會(huì)影響血清本身的質(zhì)量,可用離心3000rpm,5分鐘去除,也可不用處理,經(jīng)過熱處理過的血清,沉淀物的形成會(huì)顯著增多常誤認(rèn)為血清受污染,一般情況下,此小黑點(diǎn)不會(huì)影響細(xì)胞生長(zhǎng),但如果懷疑血清質(zhì)量,則應(yīng)立即停止使用,更換另一批號(hào)的血清。加熱過程中須
使用國(guó)產(chǎn)稀釋劑時(shí)要注意什么?2015/09/22
國(guó)產(chǎn)稀釋劑的種類有很多,例如噴碼機(jī)稀釋劑、油漆稀釋劑、涂料稀釋劑、松香水,硝基漆稀釋劑。用于不同的清洗目的與清洗對(duì)象的清洗劑,對(duì)于這些要求可以有所側(cè)重或取舍。清洗污垢的速度快,溶垢*。清洗劑自身對(duì)污垢有很強(qiáng)的反應(yīng)、分散或溶解清除能力,在有限的工期內(nèi),可較*地除去污垢,對(duì)清洗對(duì)象的損傷應(yīng)在生產(chǎn)許可的限度內(nèi),對(duì)金屬可能造成的腐蝕有相應(yīng)的抑制措施。國(guó)產(chǎn)稀釋劑便宜易得,并立足于國(guó)產(chǎn)化;清洗成本低,不造成過多的資源消耗。無色透明易燃易揮發(fā)的液體,能與多數(shù)有機(jī)溶劑混溶,具有良好的溶解性,良好的去油污能力和揮
禽ELISAS試劑盒的注意事項(xiàng)有哪些?2015/08/24
禽ELISAS試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中人白介素6水平。用純化的抗體包被微孔板,制成固相抗體,往包被單抗的微孔中依次加入白介素,再與HRP標(biāo)記的白介素抗體結(jié)合,形成抗體-抗原-酶標(biāo)抗體復(fù)合物,經(jīng)過*洗滌后加底物TMB顯色。TMB在HRP酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成zui終的黃色。顏色的深淺和樣品中的白介素呈正相關(guān)。用酶標(biāo)儀在450nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度,通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中的濃度。禽ELISAS試劑盒應(yīng)用雙抗體夾心法測(cè)定標(biāo)本中過氧化物酶水平。用純化的過氧化物酶抗體包被微孔板,
果蔬維生素C含量測(cè)定及其分析2015/08/20
果蔬維生素C含量測(cè)定及其分析維生素C是人類營(yíng)養(yǎng)中zui重要的維生素之一,缺少它時(shí)會(huì)產(chǎn)生壞血病,因此又稱為抗壞血酸(ascorbicacid)。它對(duì)物質(zhì)代謝的調(diào)節(jié)具有重要的作用。近年來,發(fā)現(xiàn)它還有增強(qiáng)機(jī)體對(duì)腫瘤的抵抗力,并對(duì)化學(xué)致癌物有阻斷作用。http://www.duoo135.com/st293606維生素C主要存在于新鮮水果及蔬菜中。水果中以獼猴桃含量zui多,在檸檬、橘子和橙子中含量也非常豐富。蔬菜以辣椒中的含量zui豐富,在番茄、甘藍(lán)、蘿卜、青菜中含量也十分豐富。野生植物以刺梨中的含量z
Elisa試劑盒需要遵循哪些要素?2015/08/17
抗原或抗體能吸附于固相載體表面,并保持其免疫學(xué)活性;抗原或抗體可通過共價(jià)鍵與酶連接形成酶結(jié)合物,而此種酶結(jié)合物仍能保持其免疫學(xué)和酶學(xué)活性;酶結(jié)合物與相應(yīng)抗原或抗體結(jié)合后,Elisa試劑盒可根據(jù)加入底物的顏色反應(yīng)來判定是否有免疫反應(yīng)的存在,而且顏色反應(yīng)的深淺是與標(biāo)本中相應(yīng)抗原或抗體的量成正比例的,可根據(jù)已知濃度的抗原或抗體的顏色反應(yīng)的深淺繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線并依此計(jì)算出未知樣品中抗體或抗原的濃度。Elisa試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封
培養(yǎng)細(xì)胞的生長(zhǎng)方式及類型2015/08/12
培養(yǎng)細(xì)胞的生長(zhǎng)方式及類型體外培養(yǎng)的細(xì)胞,按其生長(zhǎng)方式可分為貼附型和懸浮型兩大類。貼附生長(zhǎng)型細(xì)胞目前很多種細(xì)胞能在體外培養(yǎng)生長(zhǎng),包括正常細(xì)胞和腫瘤細(xì)胞。例如;成纖維細(xì)胞、骨骼組織(骨及軟骨)、心肌與平滑肌、肝、肺、腎、乳腺、皮膚、神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞、內(nèi)分泌細(xì)胞、黑色素細(xì)胞及各種腫瘤細(xì)胞等。這些細(xì)胞在活體體內(nèi)時(shí),各自具有其特殊的形態(tài);但處于體外培養(yǎng)狀態(tài)下的貼附生長(zhǎng)型細(xì)胞則常在形態(tài)上表現(xiàn)得比較單一化,失去其在體內(nèi)緣由的某些特征,病多反映處其胚層起源的形態(tài);但處于體外培養(yǎng)狀態(tài)下的貼附生長(zhǎng)型細(xì)胞則常在形態(tài)上表現(xiàn)
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