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細(xì)胞實(shí)驗(yàn)中如何預(yù)防真菌污染?2021/09/24
1、你若隨便穿戴,我便生死相依你進(jìn)細(xì)胞房時(shí)不換鞋,不戴口罩,不戴手套,雖然感覺(jué)呼吸暢快全身輕松,但其實(shí)是進(jìn)細(xì)胞房的最大忌諱!有更嚴(yán)格的細(xì)胞房連帽子都要戴上。這么隨便的就把我?guī)нM(jìn)去見(jiàn)你的細(xì)胞,難怪她會(huì)被你氣死,換鞋就不說(shuō)了,你應(yīng)該也知道有真菌吧。但你根本不能保證你口腔支原體是不是會(huì)污染細(xì)胞,每當(dāng)你興高采烈地給你的細(xì)胞哈一口氣送溫暖的時(shí)候,細(xì)胞就……狗帶了。不戴手套,根本就清除不掉你手上的細(xì)菌真菌,要不你試試拿火燎一下你的手,焦了才算把我除干凈。2、你想用紫外和酒精擺脫我,卻也無(wú)法斬?cái)辔覍?duì)你的情絲雖
一抗體與二抗體的區(qū)別你知道嗎2021/09/23
第一抗體就是平常所說(shuō)的抗體,即能和抗原特異性結(jié)合。第二抗體是能和抗體結(jié)合的,即抗體的抗體。主要用于檢測(cè)抗體的存在。一抗是針對(duì)抗原的抗體,二抗是針對(duì)一抗的抗體。即抗體也可以充當(dāng)抗原刺激機(jī)體產(chǎn)生抗體。也就是說(shuō),抗原進(jìn)入機(jī)體刺激機(jī)體免疫系統(tǒng)產(chǎn)生免疫應(yīng)答,由B細(xì)胞可以產(chǎn)生與相應(yīng)抗原發(fā)生特異性結(jié)合的特殊蛋白質(zhì)。一抗二抗都是一種可以特異結(jié)合別的物質(zhì)的基團(tuán),而且一抗可以至少結(jié)合兩種其他基團(tuán)(底物和二抗)。一抗:可以特異結(jié)合底物,就是識(shí)別出我們想要檢測(cè)的東西。一抗和底物結(jié)合與否用肉眼是看不出來(lái)的。二抗:可以和一
瓊脂糖凝膠電泳注意事項(xiàng)及操作流程2021/09/23
凝膠電泳操作注意事項(xiàng):1.緩沖系統(tǒng):在沒(méi)有離子存在時(shí),電導(dǎo)率最小,DNA不遷移,或遷移極慢,在高離子強(qiáng)度的緩沖液中,電導(dǎo)很高并產(chǎn)熱,可能導(dǎo)致DNA變性,因此應(yīng)注意緩沖液的使用是否正確。長(zhǎng)時(shí)間高壓電泳時(shí),常更新緩沖液或在兩槽間進(jìn)行緩沖液的循環(huán)是可取的。2.瓊脂糖:不同廠家、不同批號(hào)的瓊脂糖,其雜質(zhì)含量不同,影響DNA的遷移及熒光背景的強(qiáng)度,應(yīng)有選擇地使用。3.凝膠的制備:凝膠中所加緩沖液應(yīng)與電泳槽中的相一致,溶解的凝膠應(yīng)及時(shí)倒入板中,避免倒入前凝固結(jié)塊。倒入板中的凝膠應(yīng)避免出現(xiàn)氣泡,影響電泳結(jié)果。
如何搞定干細(xì)胞的低溫保存?2021/09/23
在過(guò)去十年里,多-能干細(xì)胞成為了多個(gè)領(lǐng)域的實(shí)用工具,幫助人們探索發(fā)育生物學(xué)、研究疾病病理和開(kāi)發(fā)細(xì)胞療法。不論你用干細(xì)胞做什么研究,都離不開(kāi)低溫保存。冷凍可以保存珍貴的干細(xì)胞資源,不過(guò)冷凍干細(xì)胞可不像冷凍已分化細(xì)胞那么簡(jiǎn)單。我們不能簡(jiǎn)單沿用普通細(xì)胞的冷凍試劑和方案??茖W(xué)家們一開(kāi)始對(duì)人胚胎干細(xì)胞進(jìn)行操作時(shí)發(fā)現(xiàn),一次凍融循環(huán)之后只有5%的細(xì)胞還具有多-能性。這是因?yàn)閴毫l件會(huì)促使細(xì)胞發(fā)生分化,如果保存的干細(xì)胞發(fā)生了隨機(jī)分化,就沒(méi)有價(jià)值了。另外,冷凍還會(huì)激活一個(gè)程序性死亡通路,而且在絕大多數(shù)情況下添加凋
細(xì)胞復(fù)蘇的原則:慢凍速融2021/09/23
必須將凍存在-196℃液氮中的細(xì)胞快速融化至37℃,使細(xì)胞外凍存時(shí)的冰晶迅速融化,避免冰晶緩慢融化時(shí)進(jìn)入細(xì)胞形成再結(jié)晶,對(duì)細(xì)胞造成損害。細(xì)胞復(fù)蘇步驟一.實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:將水浴鍋預(yù)熱至37℃。細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行常規(guī)消毒,用75%酒精擦拭并且使用紫外線照射40min的超凈工作臺(tái)臺(tái)面。在超凈工作臺(tái)中按次序擺放好消過(guò)毒的離心管、吸管、培養(yǎng)瓶等。二.取出凍存管:根據(jù)細(xì)胞凍存記錄按標(biāo)簽找到所需細(xì)胞的編號(hào)。從液氮罐中取出細(xì)胞盒,取出所需的細(xì)胞,同時(shí)核對(duì)管外的編號(hào)。三.迅速解凍:迅速將凍存管投入到已經(jīng)預(yù)熱的水浴鍋中解凍
常見(jiàn)實(shí)驗(yàn)室化學(xué)品存儲(chǔ)方式了解一下2021/09/22
凡具有爆炸、易燃、毒害、腐蝕等危險(xiǎn)物質(zhì)在運(yùn)輸、裝卸、儲(chǔ)存、保管過(guò)程中,在一定條件下能引起燃燒、爆炸,導(dǎo)致人身傷亡和財(cái)產(chǎn)損失等事故的化學(xué)物品,統(tǒng)稱為危險(xiǎn)化學(xué)品,通常分為:yi燃類(lèi)、劇du類(lèi)、強(qiáng)腐蝕類(lèi)、易爆類(lèi)、強(qiáng)氧化劑類(lèi)。各大類(lèi)的危化品如何安全存儲(chǔ)成為實(shí)驗(yàn)室安全管理中的重中之重。?;反鎯?chǔ)管理1、危險(xiǎn)化學(xué)品分類(lèi)隔離存放,做到專場(chǎng)專庫(kù)、定點(diǎn)定位定置分區(qū),專人管理,專車(chē)專運(yùn)。2、包裝物、容器由政府管理部門(mén)審查合格的專業(yè)生產(chǎn)企業(yè)定點(diǎn)生產(chǎn),并經(jīng)國(guó)務(wù)院質(zhì)檢部門(mén)認(rèn)可的專業(yè)檢測(cè)、檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)檢測(cè)、檢驗(yàn)合格,且包裝外形
消除檢測(cè)或?qū)嶒?yàn)過(guò)程中的系統(tǒng)誤差方法2021/09/22
從產(chǎn)生誤差的根源上消除系統(tǒng)誤差在測(cè)定之前,要求檢測(cè)人員在檢測(cè)過(guò)程中可能產(chǎn)生的系統(tǒng)誤差進(jìn)行認(rèn)真的分析,必須盡可能預(yù)見(jiàn)一切可能產(chǎn)生系統(tǒng)誤差的來(lái)源,并設(shè)法消除或盡量減弱其影響。例如,測(cè)量前對(duì)儀器本身性能進(jìn)行檢查,使儀器的環(huán)境條件和安裝位置符合檢驗(yàn)技術(shù)要求的規(guī)定;對(duì)儀器在使用前進(jìn)行正確的調(diào)整;嚴(yán)格檢查和分析測(cè)量方法是否正確等來(lái)消除儀器、檢測(cè)方法、環(huán)境等因素而產(chǎn)生的系統(tǒng)誤差;為防止因儀器長(zhǎng)-期使用而使其精度降低,及時(shí)送計(jì)量部門(mén)進(jìn)行周期檢定。用校正方法來(lái)消除系統(tǒng)誤差這種方法是對(duì)取測(cè)量用的滴定管、移液管、容量
分析方法無(wú)法重現(xiàn)?遠(yuǎn)慕幫您解惑!2021/09/22
文獻(xiàn)分析方法無(wú)法重現(xiàn)主要有以下幾個(gè)原因:1,測(cè)試環(huán)境因素;2,關(guān)鍵試劑;3,儀器設(shè)備影響;4,檢測(cè)參數(shù)差異;5,操作人員水平;6,供試品性質(zhì)不同。(一)測(cè)試環(huán)境因素測(cè)試環(huán)境主要有溫度、濕度、震動(dòng)等方面。最為常見(jiàn)的實(shí)例就是一些校正因子,南北方往往做出來(lái)的結(jié)果不同。當(dāng)然這些影響需要結(jié)合我們供試品性質(zhì)具體分析了,找出關(guān)鍵影響因素。(二)關(guān)鍵試劑目前市場(chǎng)上試劑的質(zhì)量參差不齊,不同品牌的試劑同一條件做出來(lái)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果不同,這種案例太多了。例如很多進(jìn)口試劑做液相方法走出來(lái)的干擾峰少。(三)儀器設(shè)備影響不同儀器
實(shí)驗(yàn)室離心機(jī)清洗與維護(hù)原則!2021/09/22
離心機(jī)是實(shí)驗(yàn)室的精密儀器,因此需要好好的維護(hù),在每次實(shí)驗(yàn)過(guò)后都會(huì)出現(xiàn)清洗的情況,平時(shí)也會(huì)出現(xiàn)維護(hù)的情況,下面的一下基本的原則與要求。離心機(jī)洗要求在離心機(jī)內(nèi)腔,設(shè)置多個(gè)清洗頭或清洗管,離心機(jī)可在不開(kāi)蓋或運(yùn)轉(zhuǎn)過(guò)程中對(duì)離心機(jī)內(nèi)部進(jìn)行清洗。重點(diǎn)有以下幾個(gè)部位:(1)轉(zhuǎn)鼓底面及軸承座部位的清洗;(2)攔液板表面及轉(zhuǎn)鼓筒體外表面;(3)轉(zhuǎn)鼓筒體內(nèi)表面;(4)翻蓋內(nèi)表面及進(jìn)料、刮刀等裝置表面;(5)外殼內(nèi)表面。離心機(jī)維護(hù)規(guī)則1.一次規(guī)則當(dāng)系統(tǒng)出了故障,你可以試探性地改變某些狀態(tài),一次可以改變一個(gè)參數(shù)。做一些簡(jiǎn)
純水,純化水,超純水有什么區(qū)別?2021/09/18
純水,純化水,超純水的區(qū)別如下:1、制造工藝的的難易程度不同。純水的制作工藝是經(jīng)過(guò)反滲透、蒸餾等方法制得的。純化水是用水經(jīng)蒸餾法、離子交換法、反滲透法或其他適宜方法制備得到的制藥用水。超純水是在純水的基礎(chǔ)上經(jīng)過(guò)光氧化技術(shù)、精處理和拋光處理等一系列復(fù)雜的純化技術(shù)制得的。這樣的水是一般工藝很難達(dá)到的程度,理論上可以采用二級(jí)反滲透再經(jīng)過(guò)串聯(lián)的混合型交換樹(shù)脂柱對(duì)二次反滲水進(jìn)行處理,但是交換樹(shù)脂的再生不便,質(zhì)量難以保證。2、重金屬、細(xì)菌、微粒數(shù)等指標(biāo)也大不相同。純水雜質(zhì)含量是ppm級(jí),而超純水為ppb級(jí),
配制溶液時(shí)怎么正確使用容量瓶?2021/09/18
配制溶液時(shí)怎么使用容量瓶?下面一起來(lái)了解一下!(1)使用前檢查瓶塞處是否漏水。向容量瓶?jī)?nèi)加少量水,塞好瓶塞,用食指頂住瓶塞,用另一只手的五指托住瓶底,把瓶倒立過(guò)來(lái),如不漏水,正立,把瓶塞旋轉(zhuǎn)180度后塞緊,再倒立若不漏水,方可使用。(2)把準(zhǔn)確稱量好的固體溶質(zhì)放在燒杯中,用少量溶劑溶解。然后把溶液沿玻璃棒轉(zhuǎn)移到容量瓶里。為保證溶質(zhì)能全部轉(zhuǎn)移到容量瓶中,要用溶劑多次洗滌燒杯,并把洗滌溶液全部轉(zhuǎn)移到容量瓶里(見(jiàn)圖a)。(3)向容量瓶?jī)?nèi)加入的液體液面離標(biāo)線1~2厘米左右時(shí),應(yīng)改用滴管小心滴加,最后使液
mRNA的分離操作和技巧(收藏)2021/09/18
與rRNA和tRNA不同的是,哺乳動(dòng)物細(xì)胞的絕大部分mRNA在其3'端均有一poly(A)尾,因此可以用oligo(dT)-纖維素親和層析法從大量的細(xì)胞RNA中分離mRNAdmonds等,1971;AtLeder,1972)。在構(gòu)建cDNA文庫(kù)時(shí),必須經(jīng)上述純化步驟制備mRNA模板。進(jìn)行Northern雜交或Sl核酸酶作用圖分析時(shí),與總RNA相比,采用poly(A)+RNA能獲得更為滿意的結(jié)果。可以按照Gilham(1964)所述方法制備Oligo(dT)-纖維素,也可以買(mǎi)現(xiàn)成的產(chǎn)品。1)用0.
微生物細(xì)胞的顯微直接計(jì)數(shù)法2021/09/18
(一)實(shí)驗(yàn)?zāi)康牧私庋蛴?jì)數(shù)板的構(gòu)造、計(jì)數(shù)原理和計(jì)數(shù)方法,用顯微鏡直接測(cè)定微生物總細(xì)胞數(shù)。(二)實(shí)驗(yàn)原理測(cè)定微生物細(xì)胞數(shù)量的方法很多,通常采用的有顯微直接計(jì)數(shù)法和稀釋平板計(jì)數(shù)法。直接計(jì)數(shù)法適用于各種單細(xì)胞菌體的純培養(yǎng)懸浮液,如有雜菌或雜質(zhì),則難于直接測(cè)定。菌體較大的酵母菌或霉菌孢子可采用血球計(jì)數(shù)板,一般細(xì)菌則采用彼得羅夫·霍澤(PetrofHausser)細(xì)菌計(jì)數(shù)板。兩種計(jì)數(shù)板的原理和部件相同、只是細(xì)菌計(jì)數(shù)板較薄,可以使用油鏡觀察。而血球計(jì)數(shù)板較厚,不能使用油鏡,計(jì)數(shù)板下部的細(xì)菌難于區(qū)分。血球汁數(shù)
干貨來(lái)襲,超全標(biāo)準(zhǔn)溶液相關(guān)知識(shí)!2021/09/18
實(shí)驗(yàn)室溶液制備是準(zhǔn)確進(jìn)行各類(lèi)實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ),今天,和大家一起學(xué)習(xí)了解一下標(biāo)準(zhǔn)溶液相關(guān)配制知識(shí)。標(biāo)準(zhǔn)溶液就是已確定其主體物質(zhì)濃度或其他量值的溶液。不同的情況需使用不同的標(biāo)準(zhǔn)溶液,可千萬(wàn)別一概而論。1.配制和標(biāo)定方法(1)直接配制法基準(zhǔn)物→干燥處理→分析天平稱量→溶于純水→轉(zhuǎn)入容量瓶(已校正)→純水稀釋至刻度→搖勻。(2)標(biāo)定法標(biāo)定:①非基準(zhǔn)物質(zhì)先配置成近似(略高)所需濃度溶液;②再用基準(zhǔn)物質(zhì)測(cè)定其準(zhǔn)確濃度,這一操作稱為標(biāo)定。三種方法:包括直接滴定法、間接滴定法、比較法。2.能用于直接配制或標(biāo)定標(biāo)準(zhǔn)滴定
遠(yuǎn)慕生物分享一些實(shí)用的實(shí)驗(yàn)小技巧!2021/09/17
實(shí)驗(yàn)室的操作技巧有很多,但往往不容易被熟記,想要信手拈來(lái),卻是非常不容易的。所以今天整理了一些我們?cè)趯?shí)驗(yàn)室常用的實(shí)驗(yàn)小技巧,供大家參考學(xué)習(xí),用前人的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)加上自己的頓悟,那么你就離超高水平實(shí)驗(yàn)猿不遠(yuǎn)了。常見(jiàn)化學(xué)藥品的貯存硝酸固碘硝酸銀,低溫避光棕色瓶。液溴氨水易揮發(fā),陰涼保存要密封。白磷存放需冷水,鉀鈉鈣鋇煤油中。堿瓶需用橡皮塞,塑鉛存放氟化氫。易變質(zhì)藥放時(shí)短,易燃易爆避火源。實(shí)驗(yàn)室中干燥劑,蠟封保存心坦然。解釋:1.硝酸固碘硝酸銀,低溫避光棕色瓶:意思是說(shuō)硝酸、固體碘和硝酸銀都屬于受熱見(jiàn)光易
實(shí)驗(yàn)室溫濕度怎么控制?科研人了解下!2021/09/17
在實(shí)驗(yàn)室的監(jiān)控項(xiàng)目中,不同實(shí)驗(yàn)室對(duì)溫濕度都有要求,大部分實(shí)驗(yàn)都是在明確的溫濕度環(huán)境中展開(kāi)。在醫(yī)藥、生化、儀器校準(zhǔn)、農(nóng)業(yè)、建筑與電器等領(lǐng)域中,實(shí)驗(yàn)室環(huán)境條件直接影響著各種實(shí)驗(yàn)或檢測(cè)結(jié)果,每項(xiàng)實(shí)驗(yàn)的進(jìn)行都需要精確可靠的監(jiān)測(cè)儀器提供準(zhǔn)確的環(huán)境參數(shù)數(shù)據(jù)。實(shí)驗(yàn)室要求適宜的溫度和濕度。室內(nèi)的小氣候,包括氣溫、濕度和氣流速度等,對(duì)在實(shí)驗(yàn)室工作的人員和儀器設(shè)備有影響。夏季的適宜溫度應(yīng)是18~28℃,冬季為16~20℃,濕度最好在30%(冬季)~70%(夏季)之間。除了特殊實(shí)驗(yàn)室外,溫濕度對(duì)大多數(shù)理化實(shí)驗(yàn)影響不大
實(shí)驗(yàn)中可能遇到的12種水?。▽?shí)驗(yàn)人必看)2021/09/17
1.蒸餾水指天然水經(jīng)過(guò)蒸餾、冷凝等方法,以除去其中雜質(zhì)(雜質(zhì)分子或陰、陽(yáng)離子),得到的純水。而蒸餾水為軟水。2.硬水硬水分為暫時(shí)硬水(含碳酸氫鈣、碳酸氫鎂)和永jiu硬水(含硫酸鈣、硫酸鎂或氯化鈣、氯化鎂)。永jiu硬水是指溶有較多Ca2+、Mg2+的鹽酸鹽、硫酸鹽的水,用藥劑或陽(yáng)離子交換法可軟化。3.軟水水硬度的標(biāo)準(zhǔn):相當(dāng)于每升水含10毫克CaO為1度或1°。硬度8°以上為硬水,8°以下為軟水,30°以上為最硬水,自來(lái)水的硬度在25°以下。4.重水“重水”指由氘(D)和氧原子構(gòu)成的水,其分子式
樣品空白做不好是什么原因?樣品空白的意義2021/09/16
樣品空白作用:1、樣品空白可以抵消加入測(cè)試試劑前由于樣品自身存在的色度或濁度而引起的正誤差。2、在使用樣品空白對(duì)測(cè)試儀器進(jìn)行調(diào)零后,只有樣品與測(cè)試試劑發(fā)生反應(yīng)而產(chǎn)生的色度被測(cè)定了。由于樣品的背景色度和濁度往往各不相同,樣品空白經(jīng)常用來(lái)對(duì)儀器進(jìn)行調(diào)零。如:顯色反應(yīng),按照與顯色反應(yīng)相同的條件,取同樣量的樣品溶液,但不加顯色劑作為空白溶液,這適宜于樣品基體有色,顯色劑無(wú)色也不與樣品基體顯色的情況。如,用硫氰酸鹽測(cè)定鉬時(shí),通常以不加硫氰酸鹽(其它操作不變)作空白,以消除Cr3+,Ni2+,Cu2+等有色
微生物三點(diǎn)接種法了解一下!2021/09/16
接種是微生物技術(shù)中最基本的操作之一,接種技術(shù)在微生物的分離純化、生理生化等試驗(yàn)中都非常重要。由于接種的目的不同,所采用的接種方式也不同,接種可分成斜面接種、穿刺接種和三點(diǎn)接種等。選擇正確的接種方法,對(duì)于微生物的分離、純化、增殖和鑒別都有重要作用。因接種方法的不同,常常采用不同的接種工具,如接種環(huán)、接種針、移液管和涂布棒等。在接種過(guò)程中,必須進(jìn)行嚴(yán)格的無(wú)菌操作無(wú)菌操作一般是在無(wú)菌室或接種箱內(nèi)進(jìn)行,并靠近煤氣燈(或酒精燈,一般用酒精噴燈)的火焰操作。有條件的也可在超凈工作臺(tái)上操作。微生物三點(diǎn)接種法:
細(xì)胞培養(yǎng)箱的消毒滅菌方法2021/09/16
細(xì)胞培養(yǎng)箱是開(kāi)展免疫學(xué)、腫瘤學(xué)、遺傳學(xué)及生物工程所必須的關(guān)鍵設(shè)備,細(xì)胞培養(yǎng)箱廣泛應(yīng)用于細(xì)胞、組織培養(yǎng)和某些特殊微生物的培養(yǎng),常見(jiàn)于細(xì)胞動(dòng)力學(xué)研究、哺乳動(dòng)物細(xì)胞分泌物的收集、各種物理、化學(xué)因素的致癌或毒理效應(yīng)、抗原的研究和生產(chǎn)、培養(yǎng)雜交瘤細(xì)胞生產(chǎn)抗體、體外授精(IVF)、干細(xì)胞、組織工程、藥物篩選等研究領(lǐng)域。細(xì)胞培養(yǎng)箱的污染來(lái)源對(duì)于細(xì)胞來(lái)說(shuō),非常理想的培養(yǎng)環(huán)境同樣也適合這些污染物的生存,培養(yǎng)箱本身是不會(huì)辨別的,而細(xì)胞培養(yǎng)中大部分時(shí)間里細(xì)胞都是位于培養(yǎng)箱內(nèi),因此箱體內(nèi)能否抑菌或滅菌非常關(guān)鍵!細(xì)胞培養(yǎng)
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