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上海研生實(shí)業(yè)有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第10年
拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱα(TopoⅡα)免疫組化試劑盒實(shí)驗(yàn)操作洗板方法2021/06/24
拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅱα(TopoⅡα)免疫組化試劑盒實(shí)驗(yàn)操作洗板方法:1.手工洗板方法:吸去(不可觸及板壁)或甩掉酶標(biāo)板內(nèi)的液體;在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上鋪墊幾層吸水紙,酶標(biāo)板朝下用力拍幾次;將推薦的洗滌緩沖液至少0.4ml注入孔內(nèi),浸泡1-2分鐘,根據(jù)需要,重復(fù)此過(guò)程數(shù)次。2.自動(dòng)洗板:如果有自動(dòng)洗板機(jī),應(yīng)在熟練使用后再用到正式實(shí)驗(yàn)過(guò)程中。說(shuō)明1.在儲(chǔ)存及孵育過(guò)程中避免將試劑暴露在強(qiáng)光中。所有試劑瓶蓋須蓋緊以防止蒸發(fā)和污染,試劑避免受到微生物的污染,因?yàn)榈鞍姿饷傅母蓴_將導(dǎo)致出現(xiàn)錯(cuò)誤的結(jié)果。2.濃洗滌液會(huì)有鹽析出,
小鼠肺腺癌低轉(zhuǎn)移細(xì)胞(綠色熒光蛋白標(biāo)記)注意事項(xiàng)2021/06/23
小鼠肺腺癌低轉(zhuǎn)移細(xì)胞(綠色熒光蛋白標(biāo)記)注意事項(xiàng):1.收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請(qǐng)及時(shí)和我們。2.仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū),了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等。3.用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落,將細(xì)胞置于培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)過(guò)夜,隔天再取出觀察。此時(shí)多數(shù)細(xì)胞均會(huì)貼壁,若細(xì)胞仍不能貼壁請(qǐng)用臺(tái)盼藍(lán)染色測(cè)定細(xì)胞活力,如果證實(shí)細(xì)胞活力正常,請(qǐng)將細(xì)胞離心后用新鮮培養(yǎng)基再次貼
鼠疫桿菌(YP)核酸檢測(cè)試劑盒使用方法2021/06/21
鼠疫桿菌(YP)核酸檢測(cè)試劑盒使用方法:一、稀釋標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品(以10E2-10E7拷貝/μL這6個(gè)10倍稀釋度為例)。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。1.標(biāo)記6個(gè)離心管,分別為7,6,5,4,3,2。2.用帶芯槍頭分別加入45μL熒光PCR模板稀釋液,*用帶芯槍頭,下同)。3.在7號(hào)管中加入5μL陽(yáng)性對(duì)照(濃度為1×10E8拷貝/μL,試劑盒提供),充分震蕩1分鐘,得1×10E7拷貝/μL的標(biāo)準(zhǔn)曲線樣品。放冰上待用。4.換槍頭
貓支原體PCR檢測(cè)試劑盒的評(píng)估幾個(gè)步驟2021/06/17
貓支原體PCR檢測(cè)試劑盒的評(píng)估有以下幾個(gè)步驟:⑴確定開(kāi)展該項(xiàng)目的必要性;⑵了解該項(xiàng)目現(xiàn)有的檢測(cè)方法和原理;⑶在了解試劑的組成基礎(chǔ)上選擇多家試劑盒進(jìn)行比較,判斷標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)選參考方法或參考物質(zhì),其次為臨床的滿意度及機(jī)構(gòu)的報(bào)告如各級(jí)室間質(zhì)量評(píng)價(jià)、CDC報(bào)告等;⑷定期對(duì)檢測(cè)結(jié)果進(jìn)行追蹤反饋直至終認(rèn)可該試劑。2.試劑的準(zhǔn)備不同批次的ELISA試劑在制作過(guò)程中很難保證質(zhì)量*一致,即使是通過(guò)批批檢的項(xiàng)目其檢測(cè)結(jié)果也存在差異,因此必須選擇和訂購(gòu)長(zhǎng)批號(hào)的試劑,并保證保存條件。嚴(yán)格執(zhí)行這一標(biāo)準(zhǔn)可以避免因試劑批號(hào)改變而重
刺玫果對(duì)照品的管理方法2021/06/10
刺玫果對(duì)照品的管理:(一)規(guī)范記錄:建立標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)臺(tái)帳,定期更新臺(tái)賬,明確責(zé)任主體,以便做到可以追本溯源;領(lǐng)用時(shí),記錄好領(lǐng)用時(shí)的名稱(chēng)、數(shù)量、時(shí)間、領(lǐng)用人、發(fā)放人等必要的信息;標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)應(yīng)在有效期內(nèi)使用,應(yīng)定期檢查標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的有效期,對(duì)于超限的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)要填寫(xiě)銷(xiāo)毀登記表;建立標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)檔案。(三)期間核查:有效期短、使用頻率高的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),要經(jīng)常性的核查;不常使用的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),在分析檢測(cè)之前核查即可;穩(wěn)定性好,還未開(kāi)封的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì),可延長(zhǎng)核查周期。(二)定期核查:對(duì)于標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的種類(lèi)、級(jí)別、介質(zhì)、濃度含量、有效期、
亞黃八疊球菌菌種鑒定方法2021/06/09
一、亞黃八疊球菌外觀直接觀察鑒定外觀菌種,菌絲濃白、粗壯、富有彈性,則生命力強(qiáng);如果菌種菌絲wei縮,干燥無(wú)色澤,或菌絲體自溶產(chǎn)生了多量紅褐色液體,則生活力已變?nèi)酰灰嗽儆?;木塊菌種如仍保持硬實(shí),則屬于生活力強(qiáng)的菌種,如若木塊變得軟化松散,則已老化,不宜使用。二、培養(yǎng)觀察鑒定對(duì)于分離、選育和引進(jìn)的菌種,通過(guò)培養(yǎng),觀察菌絲體對(duì)干、濕度和溫度等方面的適應(yīng)特性。如將菌絲體置于偏干、偏濕和干濕相宜的條件下培養(yǎng),若菌絲在前兩種條件下能良好生長(zhǎng),而在干濕相宜的條件下生長(zhǎng)*,則說(shuō)明是好菌種。三、液體培養(yǎng)鑒定配
豚鼠腎素(Renin)elisa檢測(cè)試劑盒樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備2021/06/07
豚鼠腎素(Renin)elisa檢測(cè)試劑盒樣本實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備:ELISA試劑盒液體樣本:包括血清、血漿、尿液、胸腹水、腦脊液、細(xì)胞培養(yǎng)上清等。(1)血清室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。(2)血漿:應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過(guò)程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。(3)尿液:用無(wú)菌管收集。離心20分
豬腸三葉因子ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中給檢測(cè)樣本加樣的步驟詳解2021/06/03
豬腸三葉因子ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)中給檢測(cè)樣本加樣的步驟詳解:1.細(xì)胞上清:前處理必須是細(xì)胞離心去除,每孔直接加100p1即可。如果濃度太高需稀釋時(shí),用標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液直接稀釋。2.腦脊液:前處理必須是細(xì)胞離心去除,每孔直接加100W1即可。如果濃度太高需稀釋時(shí),用標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液直接稀釋。3.血清血漿:加入50u山樣本分析緩沖液后加50u標(biāo)本如稀釋量大,請(qǐng)將樣本與樣本分析緩神液等量加入,不足部分用標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液補(bǔ)充至100u。①血清標(biāo)本應(yīng)是自然凝固后,取上清,避免在冰箱中凝固血液。②血漿標(biāo)本,推薦用EDT
雞卵黃免疫球蛋白(IgY)elisa試劑盒的存放以及注意事項(xiàng)2021/06/02
雞卵黃免疫球蛋白(IgY)elisa試劑盒的存放以及注意事項(xiàng):ELISA試劑盒收到后立即儲(chǔ)存于2-8℃下:效期見(jiàn)試劑盒標(biāo)簽;一切成分在2-8℃下可保存至有效期。運(yùn)用前:一切試劑平衡至室溫:不同批次的試劑不能交流運(yùn)用。1.停止液:1瓶:12ml:0.5M硫酸:儲(chǔ)存于2-8℃至有效期。2.胎球蛋白A示蹤抗體:1瓶:0.6ml:濃縮:HRP符號(hào)的抗人胎球蛋白A示蹤抗體溶于穩(wěn)定的蛋白基質(zhì)中;此試劑運(yùn)用前需用示蹤劑抗體稀釋液進(jìn)行稀釋?zhuān)粌?chǔ)存于2-8℃至有效期。3.包被板:96孔:包被了抗人胎球蛋白A抗體;微
Lebtospira elisa酶聯(lián)免疫試劑盒操作步驟2021/05/31
Lebtospiraelisa酶聯(lián)免疫試劑盒操作步驟:1.取出試劑盒,室溫(20-25℃)放置30分鐘。2.分組:取出96孔板,根據(jù)待測(cè)樣品數(shù)量加上標(biāo)準(zhǔn)品的數(shù)量決定所需的板條數(shù),把剩余的板條繼續(xù)冷藏處理。分別設(shè)標(biāo)準(zhǔn)品組(6個(gè)濃度)、空白孔、待測(cè)樣品組。注:為減少實(shí)驗(yàn)誤差,保證準(zhǔn)確性,建議設(shè)置復(fù)孔。3.加樣:依照標(biāo)準(zhǔn)品的順序分別加入100ul的標(biāo)準(zhǔn)品溶液于空白微孔中;空白對(duì)照孔加入100ul的蒸餾水;其余微孔中加入100ul的待測(cè)樣本。4.加酶標(biāo)溶液:標(biāo)準(zhǔn)品組、待測(cè)樣本組各孔中加入50ul的酶標(biāo)溶
小鼠印度刺猬因子(IHH)檢測(cè)試劑盒的間接法2021/05/27
小鼠印度刺猬因子(IHH)檢測(cè)試劑盒的間接法:1.用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1~10μg/ml,每孔加0.1ml,4℃過(guò)夜。2.次日洗滌3次。3.加一定稀釋的待檢樣品(未知抗體)0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時(shí),洗滌。(同時(shí)做空白、陰性及陽(yáng)性孔對(duì)照)于反應(yīng)孔中,加入新鮮稀釋的酶標(biāo)第二抗體(抗抗體)0.1ml,37℃孵育30-60分鐘,洗滌,最后一遍用DDW洗滌。4.加底物液顯色:于各反應(yīng)孔中加入臨時(shí)配制的TMB底物溶液0.1ml,37℃10~30分鐘。5.終止反應(yīng):于各反應(yīng)
鉛黃腸球菌探針?lè)晒舛縋CR檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟2021/05/26
鉛黃腸球菌探針?lè)晒舛縋CR檢測(cè)試劑盒實(shí)驗(yàn)步驟:①產(chǎn)品僅用于科研取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。②兩相分離每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動(dòng)劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無(wú)色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時(shí)加入的TRIZOL試劑的60%。③RNA沉淀將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無(wú)RNA酶的離心管中
貓傳染性腹膜炎病毒LAMP試劑盒操作流程2021/05/24
貓傳染性腹膜炎病毒LAMP試劑盒操作流程:1.整個(gè)檢測(cè)過(guò)程應(yīng)嚴(yán)格按照本說(shuō)明書(shū)要求分別在試劑準(zhǔn)備區(qū)、樣本處理區(qū)和PCR擴(kuò)增區(qū)進(jìn)行操作,各區(qū)實(shí)驗(yàn)服、儀器、耗材應(yīng)獨(dú)立使用,不能混用;實(shí)驗(yàn)用吸頭采用帶濾芯吸頭;樣本處理區(qū)應(yīng)配有生物安全柜,樣本處理在生物安全柜中進(jìn)行操作;三個(gè)區(qū)應(yīng)該配有紫外線殺菌裝置。2.為避免RNA降解,樣本處理過(guò)程應(yīng)在0-4℃條件下操作,且完成實(shí)驗(yàn)后立即上機(jī)檢測(cè);樣本處理過(guò)程中使用的器具耗材應(yīng)經(jīng)過(guò)無(wú)核酶處理。3.每次實(shí)驗(yàn)應(yīng)該設(shè)置陰、陽(yáng)性對(duì)照。4.試劑盒所有試劑在使用前應(yīng)該在常溫下充分融
丙酸桿菌通用探針?lè)晒舛縋CR檢測(cè)試劑盒準(zhǔn)備試劑與收集血樣2021/05/20
丙酸桿菌通用探針?lè)晒舛縋CR檢測(cè)試劑盒準(zhǔn)備試劑與收集血樣:雙重核酸試劑盒(熒光PCR法)1.收集標(biāo)本:血清、血漿(EDTA、檸檬酸鹽、肝素抗凝)、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、組織勻漿等盡早檢測(cè),2-8℃保存48小時(shí);更長(zhǎng)時(shí)間須冷凍(-20℃或-70℃)保存,避免反復(fù)凍融。2.標(biāo)準(zhǔn)品液配制:使用前加入0.5ml蒸餾水混勻,配成1200ng/ml的溶液。設(shè)標(biāo)準(zhǔn)管8管,管加標(biāo)本稀釋液900ul,第二至第八管加入標(biāo)本稀釋液500ul。在管中加入1200ng/ml的標(biāo)準(zhǔn)品溶液100ul混勻后用加樣器吸出500ul
太米阿米病毒PCR檢測(cè)試劑盒的實(shí)驗(yàn)步驟2021/05/19
太米阿米病毒PCR檢測(cè)試劑盒的實(shí)驗(yàn)步驟:一、準(zhǔn)備好試劑與儀器:磷酸鹽緩沖鹽水、熒光標(biāo)記的抗體溶液、緩沖甘油、搪瓷桶三只、有蓋搪瓷盒一只、熒光顯微鏡、玻片架、濾紙、37℃溫箱等。二、實(shí)驗(yàn)步驟1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待檢標(biāo)本片上,十分鐘后棄去,使標(biāo)本保持一定濕度。2.滴加適當(dāng)稀釋的熒光標(biāo)記的抗體溶液,使其*覆蓋標(biāo)本,置于有蓋搪瓷盒內(nèi),保溫一定時(shí)間以三十分鐘為參考。3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS沖洗后,再按順序過(guò)0.01mol/L,pH7.
小鼠核因子κB亞基p65親和肽ELISA試劑盒的存放以及注意事項(xiàng)2021/05/17
小鼠核因子κB亞基p65親和肽ELISA試劑盒的存放以及注意事項(xiàng):ELISA試劑盒收到后立即儲(chǔ)存于2-8℃下:效期見(jiàn)試劑盒標(biāo)簽;一切成分在2-8℃下可保存至有效期。運(yùn)用前:一切試劑平衡至室溫:不同批次的試劑不能交流運(yùn)用。1.停止液:1瓶:12ml:0.5M硫酸:儲(chǔ)存于2-8℃至有效期。2.胎球蛋白A示蹤抗體:1瓶:0.6ml:濃縮:HRP符號(hào)的抗人胎球蛋白A示蹤抗體溶于穩(wěn)定的蛋白基質(zhì)中;此試劑運(yùn)用前需用示蹤劑抗體稀釋液進(jìn)行稀釋?zhuān)粌?chǔ)存于2-8℃至有效期。3.包被板:96孔:包被了抗人胎球蛋白A抗體
馬內(nèi)菲青霉探針?lè)晒舛縋CR檢測(cè)試劑盒使用方法2021/05/13
馬內(nèi)菲青霉探針?lè)晒舛縋CR檢測(cè)試劑盒使用方法:一、樣品DNA的制備用自選方法提取細(xì)菌樣品DNA。注意:DNA純化方法是決定檢測(cè)靈敏度的關(guān)鍵因素。如果不能很好純化樣品DNA,后面的PCR再靈敏也不能提高整體檢測(cè)靈敏度。二、制備O157:H7標(biāo)準(zhǔn)曲線(以10-10E6這6個(gè)10倍稀釋度為例。由于標(biāo)準(zhǔn)品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨(dú)立的區(qū)域進(jìn)行,千萬(wàn)不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴(kuò)散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體病毒做陽(yáng)性對(duì)照,只提供沒(méi)有傳染性的、可以直接使用的D
CALD elisa酶聯(lián)免疫試劑盒的間接法步驟2021/05/10
CALDelisa酶聯(lián)免疫試劑盒的間接法步驟:(1)抗原包被:用包被液將PEDV抗原作1∶5稀釋包被反應(yīng)板,每孔100μl,同時(shí)設(shè)陰性細(xì)胞培養(yǎng)物對(duì)照孔,置4℃過(guò)夜。(2)洗滌:用洗滌液洗滌2次,每次2min,瀝干。(3)加入被檢血清:用保溫液將被檢血清作1∶100稀釋?zhuān)尤敕磻?yīng)板相鄰的兩個(gè)孔中,每孔100μl。同時(shí)作陰、陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)血清對(duì)照,置37℃孵育1h。(4)洗滌3次:方法同上。(5)加入酶結(jié)合物:用保溫液將酶結(jié)合物作1∶4000稀釋?zhuān)尤敕磻?yīng)孔中,每孔100μl,置37℃孵育1h。(6)洗滌
17-OHCS elisa酶聯(lián)免疫試劑盒操作注意事項(xiàng)2021/05/08
17-OHCSelisa酶聯(lián)免疫試劑盒操作注意事項(xiàng):1.試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書(shū)儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。2.實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。3.不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。4.使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。5.使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。6.洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸水。7.底物
SAA3 elisa酶聯(lián)免疫試劑盒反應(yīng)步驟2021/05/06
SAA3elisa酶聯(lián)免疫試劑盒反應(yīng)步驟(1)嚴(yán)格按照試劑說(shuō)明書(shū)進(jìn)行操作。操作前將試劑在室溫下平衡30~60min。(2)加樣后及時(shí)放人孵箱。標(biāo)本較多時(shí),要分批操作。按說(shuō)明步驟嚴(yán)格控制操作時(shí)間,防止孵育時(shí)間人為延長(zhǎng),導(dǎo)致非特異性結(jié)合緊附于反應(yīng)孔周?chē)?,難以清洗*。(3)封板溫育時(shí),各孔一定要封嚴(yán),防止陽(yáng)性標(biāo)本的液體蒸發(fā),產(chǎn)生周邊現(xiàn)象從而導(dǎo)致“花板"的出現(xiàn)。(4)用洗板機(jī)洗板時(shí),保證洗液注滿各孔,洗板針暢通,洗完板后在吸水紙(選擇干凈、無(wú)或少塵的吸水材料)上輕輕拍干:還要防止針口有纖維蛋白或異物,E
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