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體外培養(yǎng)的細(xì)胞系差異和分化2017/01/21: 體外培養(yǎng)的細(xì)胞系差異和分化1、差異：細(xì)胞系離體后，失去了神經(jīng)體液的調(diào)節(jié)和細(xì)胞間的相互影響，生活在缺乏動(dòng)態(tài)平衡的相對(duì)穩(wěn)定環(huán)境中，日久天長(zhǎng)，易發(fā)生如下變化：分化現(xiàn)象減弱；形態(tài)功能趨于單一化或生存一定時(shí)間后衰退死亡；或發(fā)生轉(zhuǎn)化獲得不死性，變成可無(wú)限生長(zhǎng)的連續(xù)細(xì)胞系或惡性細(xì)胞系。因此，培養(yǎng)中的細(xì)胞可視為一種在特定的條件下的細(xì)胞群體，它們既保持著與體內(nèi)細(xì)胞相同的基本結(jié)構(gòu)和功能，也有一些不同于體內(nèi)細(xì)胞的性狀。實(shí)際上從細(xì)胞一旦被置于體外培養(yǎng)后，這種差異就開(kāi)始發(fā)生了。雖然體外細(xì)胞與機(jī)體細(xì)胞存有差異，但并未失去研

選購(gòu)細(xì)胞株需要考慮哪幾個(gè)因素2017/01/19: 選購(gòu)細(xì)胞株需要考慮哪幾個(gè)因素1、細(xì)胞株的生物等級(jí)，由于有些細(xì)胞株及菌株屬于管制品，所以從國(guó)外購(gòu)貨比較麻煩。2、報(bào)關(guān)時(shí)盡量提供比較充足的證明材料，以免擔(dān)擱時(shí)間而導(dǎo)致干冰揮發(fā)完細(xì)胞株死亡，甚至于被退回給發(fā)貨人。選購(gòu)細(xì)胞株注意事項(xiàng)3、在購(gòu)買國(guó)外細(xì)胞株時(shí)，需交待國(guó)外加比較多的干冰一般在13公斤以上，采用比較密封的泡沫盒加套紙箱。4、如果通過(guò)國(guó)外細(xì)胞株在國(guó)內(nèi)的代理商購(gòu)買的話，合同中需注明以下一些內(nèi)容：1）.明確的到貨時(shí)間，這個(gè)時(shí)間需注明的是工作日，還是普通日。2）.在接到細(xì)胞株后，要求供應(yīng)公司的人員現(xiàn)場(chǎng)參

原代細(xì)胞生物學(xué)從哪幾個(gè)方面學(xué)習(xí)2017/01/17: 原代細(xì)胞生物學(xué)從哪幾個(gè)方面學(xué)習(xí)*、認(rèn)識(shí)原代細(xì)胞生物學(xué)課程的重要性，正如原子是物理性質(zhì)的zui小單位，分子是化學(xué)性質(zhì)的zui小單位，細(xì)胞是生命的基本單位。50年代以來(lái)諾貝爾生理與醫(yī)學(xué)獎(jiǎng)大都授予了從事細(xì)胞生物學(xué)研究的科學(xué)家，可見(jiàn)細(xì)胞生物學(xué)的重要性。如果你將來(lái)打算從事生物學(xué)相關(guān)的工作，學(xué)好細(xì)胞生物學(xué)能加深你對(duì)生命的理解。第二、明確細(xì)胞生物學(xué)的研究?jī)?nèi)容，即：結(jié)構(gòu)、功能、生活史。生物的結(jié)構(gòu)與功能是相適應(yīng)的，每一種結(jié)構(gòu)都有特定的功能，每一種功能的實(shí)現(xiàn)都需要特定的物質(zhì)基礎(chǔ)。如肌肉可以收縮、那么動(dòng)力是誰(shuí)提供的、

原代細(xì)胞HEPES緩沖液的使用方法及配制2017/01/12: 原代細(xì)胞HEPES緩沖液的使用方法及配制(1)HEPES可按所需的濃度直接加入到配制的培養(yǎng)液中，再過(guò)濾除菌。每1000ml培養(yǎng)液中加入2.38克HEPES，待溶后用lNNaOH調(diào)pH至7.2，濾過(guò)除菌后使用。原代細(xì)胞此時(shí)HEPES的使用濃度為10mmol/L。(2)亦可配成100x貯存液(lmol/L)，使用前取99ml培養(yǎng)液加入lml貯存液，zui終應(yīng)用濃度仍為10mmol/L。lmol/L(100x)HEPES貯存液配制方法：取23.8gHEPES溶于90ml雙蒸水中，用lNNaOH調(diào)pH至

培養(yǎng)細(xì)胞無(wú)菌操作注意事項(xiàng)2017/01/10: 培養(yǎng)原代細(xì)胞無(wú)菌操作注意事項(xiàng)1、操作原代細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)時(shí)，動(dòng)作要準(zhǔn)確敏捷，但又不必太快，以防空氣流動(dòng)，增加污染機(jī)會(huì)。不能用手觸及已消毒器皿，如已接觸，要用火焰燒灼消毒或取備品更換。為拿取方便，工作臺(tái)面上的用品要有合理的布局，原則上應(yīng)是右手使用的東西放置在右側(cè)，左手用品在左側(cè)，酒精燈置于中央。工作由始至終要保持一定順序性，組織或細(xì)胞在未做處理之前，勿過(guò)早暴露在空氣中。同樣，培養(yǎng)液在未用前，手或相對(duì)較臟的物品不能經(jīng)過(guò)開(kāi)放的瓶口上方，瓶口zui易污染，加液時(shí)如吸管尖碰到瓶口，則應(yīng)將吸管丟掉。2、操作野消

細(xì)胞系活性檢測(cè)方法之乳酸脫氫酶（LDH）釋放法2017/01/05: 細(xì)胞系活性檢測(cè)方法之乳酸脫氫酶（LDH）釋放法LDH是活細(xì)胞漿內(nèi)酶，當(dāng)細(xì)胞損傷，細(xì)胞膜通透性變化時(shí)，會(huì)將LDH釋放到培養(yǎng)液中。因此培養(yǎng)液中該酶的活性與被裂解的細(xì)胞系數(shù)量成正比。由LDH催化的酶促反應(yīng)在催化乳酸生成丙酮酸的過(guò)程中使氧化型輔酶I（NAD）變成還原型輔酶I（NADH+H），后者再通過(guò)遞氫體一吩嗪二甲酯硫酸鹽（PMS）還原碘硝基氯化四氯唑（INT），INT接受氫離子被還原成紫紅色的化合物，酶標(biāo)儀檢測(cè)其OD值。與結(jié)晶紫染色法和MTT比色法進(jìn)行靈敏度、重復(fù)性和相關(guān)性比較，該法簡(jiǎn)便，靈敏度高，

原代細(xì)胞取材的基本要求和注意事項(xiàng)2017/01/03: 原代細(xì)胞取材的基本要求和注意事項(xiàng)人和動(dòng)物細(xì)胞的取材是原代細(xì)胞培養(yǎng)成功的首要條件，是進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng)的*步，若取材不當(dāng)，將會(huì)直接影響細(xì)胞的體外培養(yǎng)，現(xiàn)將取材的基本要求和注意事項(xiàng)敘述如下：一、取材的基本要求（1）取材要注意新鮮和保鮮新鮮組織易于培養(yǎng)成功，取材時(shí)應(yīng)盡量在4~6h內(nèi)能制作成細(xì)胞，盡快入箱培養(yǎng)，若不能即時(shí)培養(yǎng)，應(yīng)將組織浸泡于培養(yǎng)液內(nèi)，于4℃存放。若組織塊較大，應(yīng)在清除表面血、壞死組織、脂肪和結(jié)締組織后，切碎于培養(yǎng)液內(nèi)4℃存放，但時(shí)間不能超過(guò)24h。對(duì)于已切碎的組織或血液、淋巴組織應(yīng)加入含10%

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