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體外培養(yǎng)的細胞系差異和分化2017/01/21
體外培養(yǎng)的細胞系差異和分化1、差異：細胞系離體后，失去了神經(jīng)體液的調(diào)節(jié)和細胞間的相互影響，生活在缺乏動態(tài)平衡的相對穩(wěn)定環(huán)境中，日久天長，易發(fā)生如下變化：分化現(xiàn)象減弱；形態(tài)功能趨于單一化或生存一定時間后衰退死亡；或發(fā)生轉(zhuǎn)化獲得不死性，變成可無限生長的連續(xù)細胞系或惡性細胞系。因此，培養(yǎng)中的細胞可視為一種在特定的條件下的細胞群體，它們既保持著與體內(nèi)細胞相同的基本結(jié)構(gòu)和功能，也有一些不同于體內(nèi)細胞的性狀。實際上從細胞一旦被置于體外培養(yǎng)后，這種差異就開始發(fā)生了。雖然體外細胞與機體細胞存有差異，但并未失去研
選購細胞株需要考慮哪幾個因素2017/01/19
選購細胞株需要考慮哪幾個因素1、細胞株的生物等級，由于有些細胞株及菌株屬于管制品，所以從國外購貨比較麻煩。2、報關時盡量提供比較充足的證明材料，以免擔擱時間而導致干冰揮發(fā)完細胞株死亡，甚至于被退回給發(fā)貨人。選購細胞株注意事項3、在購買國外細胞株時，需交待國外加比較多的干冰一般在13公斤以上，采用比較密封的泡沫盒加套紙箱。4、如果通過國外細胞株在國內(nèi)的代理商購買的話，合同中需注明以下一些內(nèi)容：1）.明確的到貨時間，這個時間需注明的是工作日，還是普通日。2）.在接到細胞株后，要求供應公司的人員現(xiàn)場參
原代細胞生物學從哪幾個方面學習2017/01/17
原代細胞生物學從哪幾個方面學習*、認識原代細胞生物學課程的重要性，正如原子是物理性質(zhì)的zui小單位，分子是化學性質(zhì)的zui小單位，細胞是生命的基本單位。50年代以來諾貝爾生理與醫(yī)學獎大都授予了從事細胞生物學研究的科學家，可見細胞生物學的重要性。如果你將來打算從事生物學相關的工作，學好細胞生物學能加深你對生命的理解。第二、明確細胞生物學的研究內(nèi)容，即：結(jié)構(gòu)、功能、生活史。生物的結(jié)構(gòu)與功能是相適應的，每一種結(jié)構(gòu)都有特定的功能，每一種功能的實現(xiàn)都需要特定的物質(zhì)基礎。如肌肉可以收縮、那么動力是誰提供的、
原代細胞HEPES緩沖液的使用方法及配制2017/01/12
原代細胞HEPES緩沖液的使用方法及配制(1)HEPES可按所需的濃度直接加入到配制的培養(yǎng)液中，再過濾除菌。每1000ml培養(yǎng)液中加入2.38克HEPES，待溶后用lNNaOH調(diào)pH至7.2，濾過除菌后使用。原代細胞此時HEPES的使用濃度為10mmol/L。(2)亦可配成100x貯存液(lmol/L)，使用前取99ml培養(yǎng)液加入lml貯存液，zui終應用濃度仍為10mmol/L。lmol/L(100x)HEPES貯存液配制方法：取23.8gHEPES溶于90ml雙蒸水中，用lNNaOH調(diào)pH至
培養(yǎng)細胞無菌操作注意事項2017/01/10
培養(yǎng)原代細胞無菌操作注意事項1、操作原代細胞進行培養(yǎng)時，動作要準確敏捷，但又不必太快，以防空氣流動，增加污染機會。不能用手觸及已消毒器皿，如已接觸，要用火焰燒灼消毒或取備品更換。為拿取方便，工作臺面上的用品要有合理的布局，原則上應是右手使用的東西放置在右側(cè)，左手用品在左側(cè)，酒精燈置于中央。工作由始至終要保持一定順序性，組織或細胞在未做處理之前，勿過早暴露在空氣中。同樣，培養(yǎng)液在未用前，手或相對較臟的物品不能經(jīng)過開放的瓶口上方，瓶口zui易污染，加液時如吸管尖碰到瓶口，則應將吸管丟掉。2、操作野消
細胞系活性檢測方法之乳酸脫氫酶（LDH）釋放法2017/01/05
細胞系活性檢測方法之乳酸脫氫酶（LDH）釋放法LDH是活細胞漿內(nèi)酶，當細胞損傷，細胞膜通透性變化時，會將LDH釋放到培養(yǎng)液中。因此培養(yǎng)液中該酶的活性與被裂解的細胞系數(shù)量成正比。由LDH催化的酶促反應在催化乳酸生成丙酮酸的過程中使氧化型輔酶I（NAD）變成還原型輔酶I（NADH+H），后者再通過遞氫體一吩嗪二甲酯硫酸鹽（PMS）還原碘硝基氯化四氯唑（INT），INT接受氫離子被還原成紫紅色的化合物，酶標儀檢測其OD值。與結(jié)晶紫染色法和MTT比色法進行靈敏度、重復性和相關性比較，該法簡便，靈敏度高，
原代細胞取材的基本要求和注意事項2017/01/03
原代細胞取材的基本要求和注意事項人和動物細胞的取材是原代細胞培養(yǎng)成功的首要條件，是進行細胞培養(yǎng)的*步，若取材不當，將會直接影響細胞的體外培養(yǎng)，現(xiàn)將取材的基本要求和注意事項敘述如下：一、取材的基本要求（1）取材要注意新鮮和保鮮新鮮組織易于培養(yǎng)成功，取材時應盡量在4~6h內(nèi)能制作成細胞，盡快入箱培養(yǎng)，若不能即時培養(yǎng)，應將組織浸泡于培養(yǎng)液內(nèi)，于4℃存放。若組織塊較大，應在清除表面血、壞死組織、脂肪和結(jié)締組織后，切碎于培養(yǎng)液內(nèi)4℃存放，但時間不能超過24h。對于已切碎的組織或血液、淋巴組織應加入含10%
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