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上海研生實(shí)業(yè)有限公司
中級(jí)會(huì)員 | 第10年
腫瘤細(xì)胞損傷修復(fù)能力2017/11/28
腫瘤細(xì)胞的DNA損傷修復(fù)能力是決定其基因組穩(wěn)定性的重要因素。在所有類型的DNA損傷中,DNA雙鏈斷裂是zui為嚴(yán)重的一種。因此細(xì)胞進(jìn)化出了兩條修復(fù)通路:非同源末端連接(NonhomologousEndJoing,NHEJ)和同源重組(HomologousRecombination,HR)來修復(fù)這類DNA損傷。在這項(xiàng)研究中,研究人員利用年輕和年老組小鼠的皮膚細(xì)胞誘導(dǎo)成iPS細(xì)胞系,發(fā)現(xiàn)年老組iPS細(xì)胞的基因組穩(wěn)定性下降,NHEJ修復(fù)能力下降,但HR修復(fù)能力不變。在對(duì)NHEJ通路各組分的檢測(cè)中發(fā)現(xiàn)與
細(xì)胞系命運(yùn)轉(zhuǎn)化2017/11/23
細(xì)胞系知曉組蛋白H3第27位賴氨酸*基化(H3K27me3)是一類非常重要的組蛋白修飾,通過抑制基因表達(dá),在X染色體失活,胚胎發(fā)育和疾病的發(fā)生均發(fā)揮作用。H3K27me3的形成是由多梳蛋白抑制復(fù)合物2(PRC2)介導(dǎo)的。PRC2的核心組分是EED、SUZ12、EZH1和EZH2,其中EZH1和EZH2具有H3K27甲基轉(zhuǎn)移酶的功能。PRC2和它修飾的H3K27me3已被證明在小鼠胚胎發(fā)育過程中發(fā)揮關(guān)鍵作用,但它們?cè)诩?xì)胞命運(yùn)轉(zhuǎn)變過程的作用機(jī)制,尤其是介導(dǎo)人胚胎干細(xì)胞多能性與分化過程中的作用尚不清楚
原代細(xì)胞的質(zhì)量要求2017/11/21
原代細(xì)胞隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展和生活水平的不斷提高對(duì)生物醫(yī)藥產(chǎn)品的質(zhì)量要求也越來越高,所以對(duì)制備工藝中所涉及到的各種原材料的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)要求也越來越高,特別是對(duì)用于細(xì)胞培養(yǎng)基中的主要天然成份――牛血清的質(zhì)量要求也不斷提高。牛血清包括胎牛血清、新生牛血清和成牛血清。對(duì)牛血清的質(zhì)量要求:Gibco和Sigma二家主要的美國(guó)牛血清供應(yīng)商的牛血清都已進(jìn)入到我國(guó)市場(chǎng),他們對(duì)其質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)要求都極為嚴(yán)格,從血清來源到產(chǎn)品質(zhì)量都有明確規(guī)定。1)血清來源:可從世界各國(guó)收集胎牛血清,但是必須符合他的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)和美國(guó)農(nóng)業(yè)部進(jìn)口要
有益的原代細(xì)胞起源2017/11/16
研究人員發(fā)現(xiàn),有益的原代細(xì)胞起源于胚胎心臟,而有害的巨噬細(xì)胞則起源于骨髓,可以通過它們是否在其表面表達(dá)一個(gè)稱為CCR2的蛋白質(zhì),來區(qū)分它們。研究表明,沒有CCR2的巨噬細(xì)胞起源于心臟;具有CCR2的巨噬細(xì)胞則來自于骨髓。研究人員想知道,一種抑制CCR2蛋白質(zhì)的化合物,是否會(huì)阻斷骨髓的巨噬細(xì)胞進(jìn)入心臟?“當(dāng)我們這樣做時(shí),我們發(fā)現(xiàn),來自骨髓的巨噬細(xì)胞并沒有進(jìn)入心臟。起源于心臟的巨噬細(xì)胞則繼續(xù)存在。我們看到,這些受損成人心臟中,炎癥減少,氧化性損傷減少,修復(fù)得以改進(jìn)。我們還看到了新血管的生長(zhǎng)。通過阻斷
細(xì)胞株與核質(zhì)體2017/11/14
每個(gè)細(xì)菌細(xì)胞株約含5000~50000個(gè)核糖體,部分附著在細(xì)胞膜內(nèi)側(cè),大部分游離于細(xì)胞質(zhì)中。細(xì)菌核糖體的沉降系數(shù)為70S,由大亞單位(50S)與小亞單位(30S)組成,大亞單位含有23SrRNA,5SrRNA與30多種蛋白質(zhì),小亞單位含有16SrRNA與20多種蛋白質(zhì)。30S的小亞單位對(duì)四環(huán)素與鏈霉素很敏感,50S的大亞單位對(duì)紅霉素與氯霉素很敏感。胞質(zhì)顆粒是細(xì)胞質(zhì)中的顆粒,起暫時(shí)貯存營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的作用,包括多糖、脂類、多磷酸鹽等。細(xì)菌核區(qū)DNA以外的,可進(jìn)行自主復(fù)制的遺傳因子,稱為質(zhì)粒(plasmi
腫瘤細(xì)胞因子歷史2017/11/09
腫瘤細(xì)胞因子的研究淵源始于50年代的干擾素研究和60年代的集落刺激因子研究,由于基因工程技術(shù)的迅速發(fā)展,使細(xì)胞因子研究發(fā)生了突破性的進(jìn)展。在80--90年代相繼克隆出一大批細(xì)胞因子,細(xì)胞因子的化學(xué)本質(zhì)是多肽,從信息傳遞的角度,細(xì)胞因子是生物體內(nèi)一類重要的*信使分子,是細(xì)胞內(nèi)基因表達(dá)的產(chǎn)物。在自然狀態(tài)下,細(xì)胞因子受體(cytokinereceptor,CK-R)主要以膜結(jié)合細(xì)胞因子受體(membrane-boundcytokinereceptor,mCK-R)和存在于血清等體液中可溶性細(xì)胞因子受體
養(yǎng)原代細(xì)胞需要注意的細(xì)節(jié)有哪些?2017/11/07
養(yǎng)原代細(xì)胞可謂是個(gè)精細(xì)活,從事養(yǎng)細(xì)胞的人都知道養(yǎng)細(xì)胞的時(shí)候一旦不注意,就很容易造成細(xì)胞污染,所以想要養(yǎng)好細(xì)胞除了小心謹(jǐn)慎以外,還要提前做好準(zhǔn)備:細(xì)胞培養(yǎng)前的準(zhǔn)備1)在帶上手套開始細(xì)胞培養(yǎng)之前,先檢查一下移液管和瓶子的數(shù)量是否充足,以免在開始實(shí)驗(yàn)后再次出入操作臺(tái),這樣可以降低細(xì)胞污染的風(fēng)險(xiǎn)。2)細(xì)胞培養(yǎng)基也應(yīng)先預(yù)熱,選擇只預(yù)熱部分培養(yǎng)基而非整瓶加熱,不但可以節(jié)約實(shí)驗(yàn)時(shí)間,而且可以避免因反復(fù)加熱培養(yǎng)基而造成的蛋白質(zhì)降解。3)結(jié)束操作后,別忘了培養(yǎng)基對(duì)光敏感,應(yīng)盡可能避光保存。細(xì)胞培養(yǎng)的定期檢查1)定
原代細(xì)胞判斷之形態(tài)學(xué)觀察法2017/11/02
原代細(xì)胞成活率,判斷之形態(tài)學(xué)觀察法:1、細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)顆?;蚩张?。2、細(xì)胞內(nèi)如果出現(xiàn)顆粒物質(zhì),表明細(xì)胞處于非健康狀態(tài)。3、同樣,細(xì)胞內(nèi)出現(xiàn)空泡也說明細(xì)胞處于非健康狀態(tài)。細(xì)胞喪失雙折射性:如果發(fā)生在單層細(xì)胞:一個(gè)具有雙折射性的正常細(xì)胞逐步失去這一特征(相差顯微鏡下細(xì)胞邊緣成暈環(huán)),則提示該細(xì)胞已經(jīng)死亡,即zui終干枯死亡。如果發(fā)生在懸浮細(xì)胞:正常懸浮細(xì)胞清晰透明,如胞內(nèi)出現(xiàn)顆?;蜃儨啙岜砻骷?xì)胞受損,甚至死亡。怎樣去除死細(xì)胞?單層培養(yǎng)的細(xì)胞死亡后,一般會(huì)漂浮起來,因此不需要特殊處理。而懸浮細(xì)胞或原代培養(yǎng)
腫瘤細(xì)胞內(nèi)膜系統(tǒng)的跨膜分子運(yùn)輸2017/10/31
腫瘤細(xì)胞是執(zhí)行生命功能的基本單位,各種生物分子在脂膜包被的區(qū)域內(nèi)有序協(xié)調(diào)地行使功能,從而構(gòu)成了生物活動(dòng)的基礎(chǔ).脂分子層不僅具有隔絕內(nèi)外形成微環(huán)境的屏障作用,而且還通過受控的跨膜物質(zhì)運(yùn)輸與信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)而發(fā)揮交通樞紐的功能,實(shí)現(xiàn)了膜內(nèi)外物質(zhì)與信息交換的精細(xì)調(diào)節(jié).除此之外,脂分子層由于其形成的疏水環(huán)境還為大量的脂溶性生物小分子的合成與代謝提供了加工場(chǎng)所.細(xì)胞內(nèi)膜系統(tǒng)的物質(zhì)運(yùn)輸是一個(gè)高度受控的復(fù)雜物流網(wǎng)絡(luò),所運(yùn)輸?shù)牡孜锖w了無機(jī)小分子、有機(jī)小分子和生物大分子等眾多物質(zhì),其運(yùn)輸效率和調(diào)節(jié)機(jī)制與細(xì)胞發(fā)揮正常功能
細(xì)胞系誘導(dǎo)分化的心肌細(xì)胞2017/10/26
細(xì)胞系在一定環(huán)境下可自發(fā)分化為自發(fā)節(jié)律收縮的心肌細(xì)胞,zui常用的方法為懸滴培養(yǎng)聚合形成擬胚體法。從結(jié)構(gòu)形態(tài)上看,人胚胎干細(xì)胞誘導(dǎo)分化的心肌細(xì)胞(humanembryonicstemcellsderivedcardiomyocytes,hESC-CM)早期階段(誘導(dǎo)后20~40d),在相差顯微鏡下觀察細(xì)胞呈圓形、較小(直徑131±32μm、面積480±32μm2,P隨著心肌細(xì)胞的逐漸成熟,中期階段(誘導(dǎo)后40~80d),肌小節(jié)結(jié)構(gòu)逐步完善,心肌細(xì)胞的收縮機(jī)制變得更有組織性,細(xì)胞形態(tài)更趨向于成人形
原代細(xì)胞也能引起心力衰竭2017/10/19
原代細(xì)胞心肌炎發(fā)生在感染已經(jīng)到達(dá)心臟時(shí)。在感染期間,身體的免疫系統(tǒng)產(chǎn)生抗病細(xì)胞-但是在心臟炎癥中,這些細(xì)胞進(jìn)入心臟并且可以損害其肌肉。該病癥不經(jīng)常診斷;很少引起嚴(yán)重的癥狀,并且檢測(cè)它需要心臟活檢-中度風(fēng)險(xiǎn)的侵入性程序。在一些情況下,心肌炎進(jìn)展為炎性擴(kuò)張型心肌?。―CMi)-其中心臟的肌肉擴(kuò)張,變?nèi)?,并且不能再適當(dāng)?shù)乇醚牟“Y。在美國(guó),DCMi是年輕成年人心力衰竭的主要原因之一,每百萬美國(guó)成年人的患病率為300至400名患者。由來自約翰·霍普金斯大學(xué)醫(yī)學(xué)院的DanielaCihakova博士領(lǐng)導(dǎo)的
研究發(fā)現(xiàn)此蛋白可調(diào)節(jié)原代細(xì)胞衰老2017/10/17
近日,據(jù)了解在原代細(xì)胞一項(xiàng)新的研究中,來自美國(guó)斯克里普斯研究所(TSRI)的研究人員發(fā)現(xiàn)一種新的蛋白微調(diào)參與衰老的細(xì)胞時(shí)鐘。這種新的蛋白被稱作TZAP,結(jié)合到染色體的末端上,決定著端粒(保護(hù)染色體末端的DNA片段)的長(zhǎng)度。理解端粒長(zhǎng)度是至關(guān)重要的,這是因?yàn)槎肆TO(shè)定著體內(nèi)細(xì)胞的壽命,決定著衰老和癌癥發(fā)病率等關(guān)鍵性的過程。論文通信作者、TSRI副教授ErosLazzeriniDenchi說,“端粒代表著一個(gè)細(xì)胞的時(shí)鐘。你出生時(shí)具有某種長(zhǎng)度的端粒。細(xì)胞每分裂一次,它就丟失一小部分端粒。一旦端粒變得太短
細(xì)胞系有望”返老還童“2017/10/12
細(xì)胞系未來有一天,每個(gè)人都將成為自身健康的“庇佑者”,不論是衰老、創(chuàng)傷或者疾病,造成組織的缺損和傷害,都可以取自身的體細(xì)胞作為“種子”,讓其重新“逆轉(zhuǎn)”成多能干細(xì)胞,并進(jìn)一步分化為心臟、神經(jīng)、胰島、肝臟、腎臟等多種類型細(xì)胞,甚至組織器官,zui終實(shí)現(xiàn)“生命再造”的夢(mèng)想。如今,在邁向這一夢(mèng)想的階梯上,一個(gè)被稱為“細(xì)胞核重編程”的醫(yī)學(xué)理論成為新的基石和里程碑。“所謂細(xì)胞核重編程,就是將已經(jīng)分化了的成年體細(xì)胞進(jìn)行誘導(dǎo),讓其重新回到發(fā)育早期多能性干細(xì)胞狀態(tài),重新獲得發(fā)育成各種類型細(xì)胞的能力。通俗來講,就
細(xì)胞株培養(yǎng)技術(shù)的分享2017/10/10
細(xì)胞株的傳代培養(yǎng)方法:1、材料準(zhǔn)備及實(shí)驗(yàn)步驟儀器:CO2培養(yǎng)箱、倒置顯微鏡、安全柜材料:Corning細(xì)胞培養(yǎng)瓶、試管、移液管、巴士德吸管、廢液缸、75%酒精棉球、酒精燈、培養(yǎng)的細(xì)胞。試劑:培養(yǎng)基RPMI1640(Corning10-040-CVR)、胎牛血清、0.25%胰蛋白酶、Hanks液(Corning21-020-CVR)。實(shí)驗(yàn)步驟:①入無菌室之前用肥皂洗手,再用75%的酒精擦拭消毒雙手;②倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞形態(tài),確定細(xì)胞是否傳代及細(xì)胞需要稀釋的倍數(shù)。將培養(yǎng)用液37℃下預(yù)熱。③超凈臺(tái)臺(tái)
原代細(xì)胞污染的來源2017/09/30
凡混入原代細(xì)胞培養(yǎng)環(huán)境中對(duì)細(xì)胞生存有害的成分和造成細(xì)胞不純的異物都應(yīng)視為污染,細(xì)胞污染不能*被消除,但能減少其發(fā)生的頻率和后果的嚴(yán)重性。細(xì)胞污染根據(jù)污染源主要可以分為物理性,化學(xué)性和生物性污染。物理性污染的來源、危害及預(yù)防:物理性污染常常被人們所忽視或被籠統(tǒng)地歸為化學(xué)性污染。物理性污染通過影響細(xì)胞培養(yǎng)體系中的生化成分,從而影響細(xì)胞的代謝。培養(yǎng)環(huán)境中的物理因素,如溫度、放射線、振動(dòng)、輻射(紫外線或熒光)會(huì)對(duì)細(xì)胞產(chǎn)生影響。細(xì)胞、培養(yǎng)液或其它培養(yǎng)試劑暴露于放射線、輻射或過冷過熱的溫度中,可以引起細(xì)胞代
腫瘤細(xì)胞生命四階段全部可見2017/09/28
腫瘤細(xì)胞的生命是一個(gè)持續(xù)更新、持續(xù)從頭開始的過程。從它的母細(xì)胞分裂開始,到它的子細(xì)胞形成或細(xì)胞自身死亡結(jié)束。而細(xì)胞周期就是指從一次細(xì)胞分裂形成子細(xì)胞開始,到下一次細(xì)胞分裂形成子細(xì)胞為止所經(jīng)歷的過程。細(xì)胞在這種前期、生長(zhǎng)、DNA復(fù)制和分裂等階段間循環(huán)。一直以來,區(qū)分細(xì)胞這4個(gè)階段并非易事,因?yàn)橐瑫r(shí)對(duì)來自許多不同報(bào)告蛋白(作為報(bào)告基因的蛋白)的信號(hào)進(jìn)行成像,在技術(shù)上是非常困難的。為了克服這一限制,美國(guó)斯坦福大學(xué)研究人員邁克爾·林及其同事,此次開發(fā)了一種名為mMaroon1的熒光蛋白,其熒光位于可見
腫瘤細(xì)胞死亡的具體原因介紹2017/09/26
腫瘤細(xì)胞死亡是所有多細(xì)胞生物體必需的基本生理過程。在機(jī)體一生當(dāng)中,許多組織中的細(xì)胞都會(huì)發(fā)生自然死亡,新的細(xì)胞替換。細(xì)胞死亡和新細(xì)胞生成之間的適當(dāng)平衡是維系健康組織功能,機(jī)體損傷后修復(fù)的關(guān)鍵所在。如果細(xì)胞只增加不減少,那么就會(huì)導(dǎo)致腫瘤發(fā)展。另一方面,過多的細(xì)胞死亡也會(huì)導(dǎo)致組織損傷和疾病。正常來說我們的組織都是健康的,但是其中一些會(huì)發(fā)生炎癥和疾病,“是什么引發(fā)炎癥的呢?細(xì)胞程序性壞死(necroptosis)是否是炎癥的開關(guān),這種進(jìn)程如何調(diào)控的呢?”德國(guó)科隆大學(xué)遺傳學(xué)研究所教授ManolisPasp
原代細(xì)胞形態(tài)差異2017/09/21
根據(jù)原代細(xì)胞形態(tài),可將大多數(shù)培養(yǎng)的哺乳動(dòng)物細(xì)胞劃分為三大類?!舫衫w維(或成纖維細(xì)胞樣)細(xì)胞為雙極或多極細(xì)胞,呈細(xì)長(zhǎng)形。它們貼附在基質(zhì)上生長(zhǎng)。◆上皮樣細(xì)胞呈多角形,尺寸更為規(guī)則,貼附在基質(zhì)上呈散在斑片狀生長(zhǎng)?!袅馨湍讣?xì)胞樣細(xì)胞呈球形,通常懸浮生長(zhǎng),不貼附在基質(zhì)表面。除上述基本類型外,一些細(xì)胞還可顯示與其在供體中特殊功能相適應(yīng)的形態(tài)特征?!羯窠?jīng)元有多種形狀和大小,但是可以粗略地劃分為兩個(gè)基本形態(tài)類別。I型具有很長(zhǎng)的軸突,可長(zhǎng)距離傳遞信號(hào),II型則沒有軸突。典型的神經(jīng)元會(huì)從胞體部發(fā)出具有許多分支的細(xì)胞
原代細(xì)胞中的水2017/09/19
在活原代細(xì)胞中,水是含量zui多的化合物1.存在形式:自由水(約95%)和結(jié)合水(約4.5%)2.自由水:在細(xì)胞中可自由流動(dòng)功能:是細(xì)胞內(nèi)良好的溶劑;參與細(xì)胞的許多生物化學(xué)反應(yīng)為細(xì)胞提供液體環(huán)境;運(yùn)輸營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)和代謝廢物3.結(jié)合水:在細(xì)胞中通過氫鍵等與蛋白質(zhì)、糖類、核酸等物質(zhì)結(jié)合在一起。功能:是細(xì)胞結(jié)構(gòu)的重要組成成分4.自由水與結(jié)合水的比值與細(xì)胞的生命狀態(tài)自由水/結(jié)合水的值越高,細(xì)胞代謝越旺盛;值越低,抗逆性越強(qiáng)。5.不同種子的吸水性花生種子吸水性6.水與代謝的關(guān)系1.消耗水的代謝:光反應(yīng)有氧呼吸
腫瘤細(xì)胞培養(yǎng)誘導(dǎo)分化2017/09/14
腫瘤細(xì)胞是一類具有自我更新、高度增殖和多項(xiàng)分化潛能的細(xì)胞,理論上具有無限分裂能力,在特定條件下,可分化成特定組織。通常改變抑制ES細(xì)胞不分化狀態(tài)的培養(yǎng)條件,ES細(xì)胞就可以分化成多種細(xì)胞類型。ES細(xì)胞具有的這種能力在體外增殖并保持未分化狀態(tài)及其多向分化潛能的生物學(xué)特性,使其廣泛應(yīng)用于生物學(xué)研究的各個(gè)領(lǐng)域,它的潛在醫(yī)學(xué)應(yīng)用價(jià)值已成為世界范圍內(nèi)研究的熱點(diǎn)。目前,已報(bào)道的自ES細(xì)胞誘導(dǎo)分化的細(xì)胞主要包括胰島細(xì)胞、造血細(xì)胞、肝細(xì)胞、神經(jīng)細(xì)胞、脂肪細(xì)胞、心肌細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞、上皮細(xì)胞、成骨細(xì)胞、軟骨細(xì)胞和黑素
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