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腫瘤細胞植促進青光眼的組織再生2017/09/12

腫瘤細胞中的造血和間充質(zhì)成分有助于受損器官的修復(fù)，因此常用于急性病的治療，但很少用于慢性病的治療。Renaud等人嘗試用間充質(zhì)干細胞治療慢性青光眼。在研究中，他們用激光誘發(fā)了一個開角型青光眼模型，去評估骨髓細胞的治療潛能和組織修復(fù)的機制；然后用激光誘發(fā)的方式將效應(yīng)細胞導(dǎo)入受損組織，研究激光誘發(fā)的效果。加拿大RenaudManuguerra-Gagne等學(xué)者日前公布關(guān)于干細胞治療青光眼的研究成果：在青光眼模型中移植入間充質(zhì)干細胞，通過激光誘發(fā)的旁分泌因子分泌和祖細胞增殖可以促進青光眼的組織再生。該

用細胞系外顯子組測序研究腎細胞癌2017/09/07

細胞系在這項研究中，研究人員利用單細胞外顯子組測序，發(fā)現(xiàn)CD133+RCC細胞有CSC特性，并可能來源于癌細胞，而不是正常腎細胞。KCP、LOC440040和LOC440563突變是新的腎腫瘤干細胞驅(qū)動基因。LOC440563編碼一個RNA結(jié)合蛋白，其屬于不均一核糖核蛋白（hnRNPs）。它影響前mRNA的加工、代謝和運輸。LOC440563在結(jié)腸癌中是顯著突變的；然而，這些基因突變不同于我們在RCC腫瘤干細胞中所確定的?？紤]到hnRNP家族對DNA損傷修復(fù)的貢獻，很可能LOC440563突變通

腫瘤細胞研究獲新突破2017/09/05

腫瘤細胞研究指明了一種生物標記物，其能夠用來分離進而修復(fù)受損眼睛的干細胞，這些干細胞位于角膜和眼白交界處的角膜緣上。與此同時，描述了一種培養(yǎng)角膜緣干細胞的方法。這些研究結(jié)果都將有助于改善角膜疾病的治療。角膜緣干細胞（LSC）的發(fā)現(xiàn)，是近幾十年來zui重要的進展之一。在世界范圍內(nèi)，由于發(fā)炎、遺傳疾病或者燒傷所導(dǎo)致的LSC缺失，是一個主要的失明原因。移植健康組織往往是病患們*的治療選項，可是如果LSC不夠多，移植就會失敗。而且，盡管LSC已是目前*的角膜上皮的成體干細胞，其相關(guān)理論基礎(chǔ)與臨床研究也發(fā)

解析原代細胞的基本特征2017/08/31

原代細胞是原始且未特化的細胞，它是未充分分化、具有再生各種組織器官的潛在功能。干細胞存在所有多細胞組織里，能經(jīng)由有絲分裂與分化來分裂成多種的特化細胞，而且可以利用自我更新來提供更多干細胞。干細胞主要具有以下三個特征：(一)細胞的更新干細胞能通過有絲分裂產(chǎn)生子代干細胞。干細胞的分裂過程與普通的體細胞有所不同。高等動物的成體干細胞通過不對稱分裂產(chǎn)生非對稱的細胞決定子分割，使得一部分子代獲得維持干細胞狀態(tài)所必需的信息而成為子代干細胞，另外一部分子代細胞則不得不走向分化。也就是說，一個干細胞的后代中，只

蛋白可促進原代細胞擴散2017/08/29

近日，原代細胞一項研究論文中，來自卑爾根大學(xué)等機構(gòu)的研究人員通過研究發(fā)現(xiàn)了一種可以幫助癌細胞擴散的特殊蛋白。研究者指出，腫瘤中的細胞都不相同，其中一些維持好的本性，但另外一些卻總會惹事兒，比如不斷惡化或者開始擴散到其它器官中等，目前研究人員很難預(yù)測哪些細胞會變得具有侵襲性。盡管如此，通過對動物組織進行體外實驗分離侵襲性的癌細胞，來自卑爾根大學(xué)等機構(gòu)的科學(xué)家們就發(fā)現(xiàn)了一種名為PITPNC1的特殊蛋白質(zhì)或許可以幫助癌細胞擴散并具有侵襲性。研究者NilsHalberg說道，在結(jié)腸、乳腺和皮膚癌中擴散的

原代細胞培養(yǎng)技術(shù)及hanks液的配制2017/08/24

細胞生物學(xué)生物大實驗的時候有關(guān)動物細胞培養(yǎng)的大實驗，在這里詳細介紹了細胞培養(yǎng)中各種器皿的清晰和滅菌、培養(yǎng)基的配制、hanks液/d-hanks液等試劑的配制、細胞的傳代培養(yǎng)及其凍存與復(fù)蘇方法與操作步驟。原代細胞培養(yǎng)是用無菌操作的方法將動物體內(nèi)的組織(或器官)取出，模擬動物體內(nèi)的生理條件，在體外進行培養(yǎng).使其不斷地生長、繁殖，人們借以觀察細胞的生長、繁殖、細胞分化以及細胞衰老等過程的生命現(xiàn)象。細胞培養(yǎng)的突出優(yōu)點，一是便于研究各種物理、化學(xué)等外界因素對細胞生長發(fā)育和分化等的影響;二是細胞培養(yǎng)便于人們

原代細胞的基本結(jié)構(gòu)及作用？2017/08/22

與其他系統(tǒng)一樣，原代細胞同樣有邊界，有分工合作的若干組分，有信息中心對細胞的代謝和遺傳進行調(diào)控。細胞的結(jié)構(gòu)復(fù)雜而精巧，各種結(jié)構(gòu)組分配合協(xié)調(diào)，使生命活動能夠在變化的環(huán)境中自我調(diào)控、高度有序地進行。1.細胞壁（CellWall）【動物細胞沒有】位于植物細胞的zui外層,是一層透明的薄壁。它主要是由纖維素和果膠組成的，孔隙較大，物質(zhì)分子可以自由透過。細胞壁對細胞起著支持和保護的作用。2.細胞膜（CellMembrane)細胞壁的內(nèi)側(cè)緊貼著一層極薄的膜，叫做細胞膜。這層由蛋白質(zhì)分子和磷脂雙層分子組成的薄

原代細胞治療可緩解眼壓降低青光眼2017/08/17

研究人員將新生原代細胞注射到青光眼小鼠模型的眼內(nèi)，發(fā)現(xiàn)新細胞的流入能夠幫助小梁網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)再生，該結(jié)構(gòu)是眼部的一個排水管道能夠幫助避免出現(xiàn)液體累積，如果液體在眼睛里累積會使眼壓升高容易導(dǎo)致青光眼。這種疾病會損傷視神經(jīng)，可能導(dǎo)致失明。"我們認為用健康細胞替代損傷或缺失的小梁網(wǎng)狀細胞能夠重新恢復(fù)小梁網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的功能。"文章作者Kuehn在他們實驗室的上這樣寫道。相關(guān)研究結(jié)果發(fā)表在學(xué)術(shù)期刊PNAS上。這種方法的一個潛在優(yōu)勢就是利用病人自身皮膚細胞獲得誘導(dǎo)多能干細胞，這樣就能避開使用胎兒干細胞存在的倫理問題，

誘導(dǎo)性細胞系可以定向分化嗎2017/08/15

日本學(xué)者山中伸彌將oct4、Sox2、Klf4、c-myc四個基因插入到成體細胞系DNA中重編程細胞恢復(fù)到胚胎干細胞狀態(tài)，由此建立了iPS細胞。這些細胞可以向胚胎干細胞一樣，轉(zhuǎn)變?yōu)閹缀跛械慕M織類型。為此,山中伸彌在2011年獲得諾貝爾獎。雖然iPS細胞有潛力發(fā)育為任何組織器官，但如何誘導(dǎo)它們往正確的方向分化問題尚未解決。由中科院上海生命科學(xué)院/上海交大醫(yī)學(xué)院健康科學(xué)研究所金穎教授帶隊的關(guān)于“基于誘導(dǎo)多能干細胞技術(shù)的若干重大疾病模型與機理研究”的“973”科技部重大科學(xué)研究項目，就是希望能找到誘

原代細胞如何抵抗粘膜系統(tǒng)二次感染？2017/08/10

原代細胞是機體T淋巴細胞中的一個特殊亞群，它們在淋巴組織中的比例很低，但富集于上皮粘膜系統(tǒng)，比如皮膚，呼吸道，腸道以及道等等。這類細胞是T細胞分化過程中形成的細胞，在胚胎發(fā)育為新生個體的過程中會逐步地向各組織遷移。其中，TCR中保守的γ鏈對于γδT細胞的遷移以及功能的實現(xiàn)都十分關(guān)鍵。不過，新的證據(jù)表明γδT細胞的功能，主要是IL-17的表達，可能是在其離開胸腺的時候分化產(chǎn)生的，而γ鏈的表達與否并不重要。不管怎樣，于γδT細胞從我們出生開始就分布在各個表皮粘膜層中，從而能夠抵抗組織損傷以及外界的感

構(gòu)建人類原始原代細胞2017/08/08

這是*次成功將人類原代細胞編程至這樣的早期發(fā)育階段。這項研究有可能幫助找到有關(guān)一些生育問題病因的答案，生成關(guān)于胚胎發(fā)育zui早期的一些新見解，并有潛力在未來促使開發(fā)出新型的生殖技術(shù)。多年來研究人員一直試圖在培養(yǎng)皿中構(gòu)建出人類原始生殖細胞。原始生殖細胞生成于胚胎發(fā)育的zui初幾個星期里，此時受精卵中的胚胎干細胞開始分化為這一非?；A(chǔ)的細胞類型。一旦這些原始生殖細胞變?yōu)椤鼗毎?，它們會‘幾乎自發(fā)’地繼續(xù)朝著精子或卵子前體細胞發(fā)育。誘導(dǎo)多能干(iPS)細胞的誕生促使科學(xué)家們提出了一個新想法：在實驗

腫瘤細胞培養(yǎng)成纖維細胞排除法2017/08/03

腫瘤細胞刮除法：是用不銹鋼絲末端插有橡膠刮頭（用膠塞剪成三角形插以不銹鋼絲）、或裹少許脫脂棉制成，裝入試管中高壓滅菌后備用（也可用特制電熱燒灼器刮除）。刮除程序為：（1）標記：鏡下觀察，用不脫色筆在培養(yǎng)瓶皿的背面圈下生長腫瘤細胞的部位；（2）刮除：棄掉培養(yǎng)液，把無菌膠刮伸入瓶皿中，肉眼或顯微鏡窺視下，刮除無標記空間；（3）用Hanks液沖洗一兩次，洗除被刮掉的細胞；（4）注入培養(yǎng)液繼續(xù)培養(yǎng)，如發(fā)現(xiàn)仍有成纖維細胞殘留，可重復(fù)刮除至*除掉為止2．反復(fù)貼壁法：根據(jù)腫瘤細胞比成纖維細胞貼壁速度慢的特點，

正確復(fù)蘇原代細胞的方法2017/08/01

原代細胞凍存好了，接下來要注意什么問題呢?沒錯，就是記得到時間了，拿出來復(fù)蘇。那么，細胞復(fù)蘇的過程中又有哪些該注意的事項呢?細胞活力和形態(tài)檢查的作用何在?請看下文：活力檢查–千萬不要使用不健康的細胞，可能有污染，如果發(fā)現(xiàn)有污染毫不猶豫的丟棄!形態(tài)檢查–檢查細胞的固有形態(tài)和生長行為。凍存細胞：補充新的培養(yǎng)液–在您開始凍存細胞的前一天補充新的培養(yǎng)液。在細胞長至70%單層時收獲細胞，計數(shù)活細胞數(shù)，用凍存液調(diào)整細胞密度~5x106cells/ml(根據(jù)不同的細胞類型調(diào)整)凍存液–用凍存液洗細胞并用凍存液

如何使細胞培養(yǎng)物快速適應(yīng)無血清培養(yǎng)基？2017/07/27

許多原代細胞系容易適應(yīng)無血清培養(yǎng)基和無蛋白培養(yǎng)基，而對環(huán)境要求過高的其它細胞卻難以適應(yīng)變化，這就需要更為專業(yè)的方法來適應(yīng)變化。而根據(jù)細胞系的特性，有兩種方法可使細胞適應(yīng)無血清培養(yǎng)基。*種方法是連續(xù)適應(yīng)/循序隔絕法；另一種方法是直接適應(yīng)。一、連續(xù)適應(yīng)/循序隔絕法*種方法是連續(xù)適應(yīng)/循序隔絕法。通過一系列的血清還原步驟，使細胞適應(yīng)無血清培養(yǎng)基。這是優(yōu)先選用的方法，且不對細胞培養(yǎng)環(huán)境形成太過惡劣的變化。連續(xù)適應(yīng)/循序隔絕法——方法1使原培養(yǎng)基內(nèi)的細胞連續(xù)地經(jīng)過以下幾個階段：階段1：75%補加血清的培養(yǎng)

兔食管上皮細胞培養(yǎng)步驟2017/07/25

原代細胞實驗材料：1.大兔的正常食管組織2.6孔培養(yǎng)板：用多聚賴氨酸4℃包被過夜3.不含Ca2+和Mg2+的1×PBS，添加200000IU/L青霉素、200mg/L鏈霉素和200000U/L慶大霉素，pH7.44.手術(shù)刀、解剖剪、解剖鑷、眼科剪，眼科鑷實驗方法：1.處死大兔，取正常食管組織放入含雙抗的PBS（pH=7.2）中反復(fù)清洗3次，以洗去組織表面的血絲及粘液；2.小心的用眼科剪鑷將食管黏膜與黏膜下組織分離；3.分離出的粘膜組織用含雙抗的PBS（pH=7.2）反復(fù)沖洗若干次；4.將清洗后食

腫瘤細胞培養(yǎng)方法2017/07/20

腫瘤細胞培養(yǎng)成功關(guān)鍵在于：取材、成纖維細胞的排除、選用適宜的培養(yǎng)液和培養(yǎng)底物等幾個方面。在具體培養(yǎng)方法方面，腫瘤細胞培養(yǎng)與正常組織細胞培養(yǎng)并無原則差別，初代培養(yǎng)應(yīng)用組織塊和消化培養(yǎng)法均可。1、取材：人腫瘤細胞來自外科手術(shù)或活檢瘤組織。取材部位非常重要，體積較大的腫瘤組織中有退變或壞死區(qū)，取材時盡量避免用退變組織，要挑選活力較好的部位。癌性轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)或胸腹水是好的培養(yǎng)材料。取材后宜盡快進行培養(yǎng)，如因故不能立即培養(yǎng)，可貯存于4℃中，但不宜栽過24小時。2、培養(yǎng)基：腫瘤細胞對培養(yǎng)基的要求不如正常細胞嚴

應(yīng)用細胞融合技術(shù)制備染色體2017/07/18

原代細胞實驗?zāi)康耐ㄟ^細胞融合技術(shù)，初步了解染色體提前凝集標本制備原理、方法及間期細胞三種時相的提前凝集染色體特點?！緦嶒炗闷贰恳?、材料人宮頸癌上皮細胞(HeLa細胞)二、器材和儀器顯微鏡、離心機、水浴箱、熱吹風(fēng)機、10ml刻度離心管、5(1/2)針頭注射器、試管架、染色槽、廢液缸、吸水紙、擦鏡紙、冰凍載玻片、香柏油瓶、記號筆、酒精燈。三、試劑50％PEG、Hanks液(pH7.4)、RPMI一1640培養(yǎng)基(含10％滅活小牛血清，pH7.4)10μg／ml秋水仙素，0.075mol／LKCl低滲

細胞培養(yǎng)過程中添加劑起到的作用2017/07/13

腫瘤細胞能量來源：谷氨酰胺L－谷氨酰胺是一種氨基酸，細胞的重要能量來源、參與蛋白質(zhì)的合成和核酸代謝。同時L-谷氨酰胺不穩(wěn)定，在中性的水溶液中會自發(fā)降解；降解產(chǎn)物對細胞有毒性（對干細胞，原代細胞影響尤其大）。能影響細胞活性、蛋白表達水平及糖基化模式等。那如何解決呢？方案有二：?選擇不含谷氨酰胺的培養(yǎng)基，自己添加?選擇穩(wěn)定的谷氨酰胺替代物經(jīng)過科學(xué)家不斷努力，終于找到了穩(wěn)定的谷氨酰胺替代物：glutaGRO。它有何方功能呢？原來，它是由L-丙氨酸和L-谷氨酰胺縮合形成的二肽，穩(wěn)定性高，可在室溫下保存，

細胞培養(yǎng)技術(shù)注意事項2017/07/11

1.原代細胞實驗進行前，無菌室及無菌操作臺(laminarflow)以紫外燈照射30-60分鐘滅菌，以70%ethanol擦拭無菌操作抬面，并開啟無菌操作臺風(fēng)扇運轉(zhuǎn)10分鐘后，才開始實驗操作。每次操作只處理一株細胞株，且即使培養(yǎng)基相同亦不共享培養(yǎng)基，以避免失誤混淆或細胞間污染。實驗完畢后，將實驗物品帶出工作臺，以70%ethanol擦拭無菌操作抬面。操作間隔應(yīng)讓無菌操作臺運轉(zhuǎn)10分鐘以上后，再進行下一個細胞株之操作。2.無菌操作工作區(qū)域應(yīng)保持清潔及寬敞，必要物品，例如試管架、吸管吸取器或吸管盒等

原代細胞復(fù)蘇技術(shù)2017/07/06

1.原代細胞凍存復(fù)蘇技術(shù)簡介在ELISPOT檢測的應(yīng)用中，往往需要用到凍存的淋巴細胞樣品作為檢測細胞。由于ELISPOT檢測的是細胞的免疫功能，不僅僅需要保持細胞的存活率，而且還要保證細胞的功能不發(fā)生變化。傳統(tǒng)的細胞凍存方法通常是為了保存細胞株，對細胞存活率的要求不高，更沒考慮保持細胞原有的免疫狀態(tài)，所以傳統(tǒng)的細胞凍存方法已經(jīng)不能滿足ELISPOT檢測的要求。參見圖7.1?？紤]到ELISPOT檢測的特殊性，荷蘭U-CyTech公司經(jīng)過精心的研究與反復(fù)的驗證，推出了Cryostar™凍存試劑盒，在