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2022
12-06

基因的編輯調(diào)控技術(shù)—轉(zhuǎn)染，您了解多少？
轉(zhuǎn)染——是將外源基因如DNA、RNA導(dǎo)入真核細(xì)胞的技術(shù)。是真核細(xì)胞在一定條件下主動(dòng)或被動(dòng)導(dǎo)入外源基因而獲得新的表型的過程。隨著分子生物學(xué)和細(xì)胞生物學(xué)研究的不斷發(fā)展，轉(zhuǎn)染已經(jīng)成為研究和控制真核細(xì)胞基因功能的常規(guī)工具。在研究基因功能、基因表達(dá)調(diào)控、突變分析和蛋白質(zhì)生產(chǎn)等領(lǐng)域中，轉(zhuǎn)染技術(shù)的應(yīng)用越來越廣泛。圖1轉(zhuǎn)染轉(zhuǎn)染的分類根據(jù)外源性基因在真核細(xì)胞中表達(dá)時(shí)間的長短我們可將轉(zhuǎn)染技術(shù)可分為瞬時(shí)轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染兩種。在瞬時(shí)轉(zhuǎn)染的細(xì)胞中，外源基因得以表達(dá)但它們并不會(huì)整合到細(xì)胞的基因組中，也就不會(huì)被復(fù)制，適用的核酸
2022
12-01

細(xì)胞培養(yǎng)的步驟有哪些
細(xì)胞培養(yǎng)也叫細(xì)胞克隆技術(shù)，在生物學(xué)中的正規(guī)名詞為細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)。不論對(duì)于整個(gè)生物工程技術(shù)，還是其中之一的生物克隆技術(shù)來說，細(xì)胞培養(yǎng)都是一個(gè)不可少的過程，細(xì)胞培養(yǎng)本身就是細(xì)胞的大規(guī)?？寺?。細(xì)胞培養(yǎng)的步驟1、復(fù)蘇細(xì)胞復(fù)蘇的原則：快速融化必須將凍存在-196℃液氮中的細(xì)胞快速融化至37℃，使細(xì)胞外凍存時(shí)的冰晶迅速融化，避免冰晶緩慢融化時(shí)進(jìn)入細(xì)胞形成再結(jié)晶，對(duì)細(xì)胞造成損害。實(shí)驗(yàn)前準(zhǔn)備將水浴鍋提前預(yù)熱至37℃。細(xì)胞實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行常規(guī)消毒，用75%酒精擦拭紫外線照射40min的超凈工作臺(tái)臺(tái)面，保證無菌。在超凈工作
2022
12-01

分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)小儀器推薦——熱蓋金屬浴
熱蓋金屬?。≧JY-100）產(chǎn)品介紹熱蓋金屬浴是采用微電腦控制的金屬浴，比常規(guī)恒溫金屬浴控溫精度更高，同時(shí)其熱蓋功能可避免反應(yīng)液中蒸發(fā)的水汽在管蓋上凝結(jié)，其外形美觀，體積小巧，結(jié)構(gòu)緊湊。產(chǎn)品特點(diǎn)（1）自定義熱蓋開關(guān)狀態(tài)，客戶根據(jù)需要可以打開或者關(guān)閉熱蓋加熱功能（2）*半導(dǎo)體制冷技術(shù)和PID溫控技術(shù)，使整體性能達(dá)到一個(gè)新高度（3）5英寸高清彩色觸摸屏，精致的UI界面，設(shè)置方便快捷產(chǎn)品應(yīng)用常用于分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)，如酶切、膠回收、逆轉(zhuǎn)率、蛋白質(zhì)變性、融化瓊脂糖、核酸擴(kuò)增檢測預(yù)反應(yīng)等，以及其它實(shí)驗(yàn)的樣本保
2022
11-30

類器官傳代培養(yǎng)全流程及答疑解惑
準(zhǔn)備工作1.儀器設(shè)備CO2培養(yǎng)箱、雙人單面超凈臺(tái)、倒置顯微鏡、臺(tái)式冷凍離心機(jī)、水浴鍋、水浴搖床，醫(yī)用冰箱、-80°冰箱、移液器（一套）。2.試劑耗材小腸類器官培養(yǎng)基、小腸類器官緩沖液、類器官傳代消化液、硫酸慶大霉素、雙抗、基質(zhì)膠、60mm細(xì)胞培養(yǎng)皿、15ml離心管、1.5mlEP管若干、4度冰盒。操作流程1.類器官操作流程之——樣本準(zhǔn)備（1）移液器吸去培養(yǎng)基，每孔添加1-2ml4℃類器官緩沖液B放置2min。（2）移液搶輕柔吹打基質(zhì)膠，收集在15ml離心管中，4℃靜置10min。（每6-8孔為一
2022
11-29

Attention please，****正在入侵大腦！
SARS-CoV-2病毒肺炎（CoronaVirusDisease2019）自19年底爆發(fā)距今已有近四年的時(shí)間，依舊沒有被克服，科學(xué)家們一直致力于SARS-CoV-2的研究，雖然（SARS-CoV-2）被認(rèn)為主要是一種呼吸系統(tǒng)疾病，但臨床上發(fā)現(xiàn)有部分新冠患者出現(xiàn)意識(shí)障礙、癲癇、感覺障礙和其他神經(jīng)系統(tǒng)癥狀，因此科學(xué)家們判斷SARS-CoV-2有可能也會(huì)攻擊大腦。2021年3月，耶魯大學(xué)AlkikoIwasaki團(tuán)隊(duì)利用人類大腦類器官，ACE2轉(zhuǎn)基因SARS-CoV-2模型小鼠，以及臨床分析等手段，
2022
11-27

正確處理樣本是保證ELISA檢測正確性和準(zhǔn)確性重要步驟
通常我們用ELISA來檢測的樣本是有多種類型的，如血清、血漿、尿液、細(xì)胞培養(yǎng)上清或組織勻漿液等，不同類型的檢測樣本前期的處理方法是不一樣的。正確的處理樣本是保證ELISA檢測的正確性和準(zhǔn)確性的第一步。1.血清血清是常用于ELISA檢測的一類樣本，處理也比較簡單。用無熱原、無內(nèi)毒素的試管或離心管采集血液標(biāo)本，將試管或離心管室溫放置2小時(shí)或4℃一個(gè)晚上，使血清析出。（最好將試管或離心管傾斜放置，使液面橫截面增大，能使血清更大程度的析出）。4℃1000×g離心20分鐘，仔細(xì)收集上清。建議將血清分裝多份
2022
11-22

雞胚提取物是細(xì)胞生長過程中所需的重要營養(yǎng)物質(zhì)之一
雞胚提取物是從生長9-12天的雞胚中提取的,用于組織培養(yǎng)中的生長因子補(bǔ)充成分。雞胚提取物是一種優(yōu)質(zhì)蛋白質(zhì),蛋白質(zhì)含量高,氨基酸模式與人體的氨基酸模式一致,具有豐富的礦物元素和維生素,具有很高的營養(yǎng)價(jià)值。這使得它不但具有補(bǔ)充這些營養(yǎng)素的作用,而且,還可能有一些保健功能。已有實(shí)驗(yàn)證明,雞胚提取物能有效地,提高低硒小鼠的GPX活性,清除過氧化物產(chǎn)物MDA。有文獻(xiàn)提出雞胚提取物還具有。該產(chǎn)品制備經(jīng)無菌過濾(0.2μm),以10毫升凍干小瓶的形式提供。請(qǐng)注意,凍干產(chǎn)品無法保證無菌,重構(gòu)后應(yīng)通過無菌一次性過
2022
11-21

組織病理一站式解決方案
病理學(xué)是研究人體疾病發(fā)生的原因、發(fā)生機(jī)制、發(fā)展規(guī)律以及疾病過程中機(jī)體的形態(tài)結(jié)構(gòu)、功能代謝變化和病變轉(zhuǎn)歸的一門基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)科學(xué)。在科學(xué)研究中，對(duì)病理的研究能夠幫助分析和闡明。①病因?qū)W，即疾病發(fā)生的原因，包括內(nèi)因、外因及其相互關(guān)系；②發(fā)病學(xué)，即在病因作用下導(dǎo)致疾病發(fā)生、發(fā)展的具體環(huán)節(jié)、機(jī)制和過程；③病理變化或病變，即在疾病發(fā)生發(fā)展過程中，機(jī)體的功能代謝和形態(tài)結(jié)構(gòu)變化以及這些變化與臨床表現(xiàn)（癥狀和體征）之間的關(guān)系——臨床病理聯(lián)系；④疾病的轉(zhuǎn)歸和結(jié)局。組織學(xué)觀察是將病變組織制成厚約數(shù)微米的切片，經(jīng)不同方法染
2022
11-17

科學(xué)培養(yǎng)指南——類器官
類器官簡介類器官（Organoids）指利用成體干細(xì)胞或多能干細(xì)胞進(jìn)行體外三維（3D）培養(yǎng)而形成的具有一定空間結(jié)構(gòu)的組織類似物。盡管類器官并不是真正意義上的人體器官，但能在結(jié)構(gòu)和功能上模擬真實(shí)器官，能夠模擬體內(nèi)組織結(jié)構(gòu)及功能并能夠長期穩(wěn)定傳代培養(yǎng)。類器官的種類類器官的發(fā)展史早在20世紀(jì)80年代，“organoid”一詞就已經(jīng)提出,1907年，美國貝克羅萊那大學(xué)教授威爾遜發(fā)現(xiàn)通過機(jī)械分離的海綿細(xì)胞可以重新聚集并自組織成為新的具有正常功能的海綿有機(jī)體，是未來類器官技術(shù)發(fā)展的源頭。威爾遜的研究證明了成
2022
11-17

類器官原代培養(yǎng)全流程
準(zhǔn)備工作1.儀器設(shè)備CO2培養(yǎng)箱、雙人單面超凈臺(tái)、倒置顯微鏡、臺(tái)式冷凍離心機(jī)、水浴鍋、水浴搖床，醫(yī)用冰箱、-80°冰箱、移液器（一套）、眼科剪、眼科鑷。2.試劑耗材小腸類器官培養(yǎng)基，小腸類器官消化液，小腸組織保存液，小腸類器官緩沖液，硫酸慶大霉素，雙抗，組織固定液，基質(zhì)膠，60mm細(xì)胞培養(yǎng)皿，100μm濾篩，15ml離心管，1.5mlEP管若干，4度冰盒，眼科剪刀，眼科鑷。操作流程1.類器官操作流程之——樣本準(zhǔn)備（1）將組織放入含有器官保存液的取樣瓶中，4℃從醫(yī)院/實(shí)驗(yàn)室取回。（2）將取樣瓶消毒
2022
11-17

助力核酸藥物開發(fā)“黑馬”—環(huán)狀RNA
一、環(huán)狀RNA的研究背景針對(duì)性的mRNA疫苗在多種疫苗類型中脫穎而出。與此同時(shí)，諸如自復(fù)制mRNA和circRNA等新型技術(shù)路線也逐漸走入大眾視野，隨著資本的大量涌入，circRNA技術(shù)迅速發(fā)展起來。環(huán)狀RNA（circRNA）是一類特殊的非編碼RNA分子，circRNA分子呈封閉環(huán)狀結(jié)構(gòu)，不受RNA外切酶影響，表達(dá)更穩(wěn)定，不易降解。circRNA不具有5'末端帽子和3'末端poly(A)尾巴，通過外顯子環(huán)化或內(nèi)含子環(huán)化，將3'和5'末端連接起來形成完整的環(huán)形結(jié)構(gòu)，避免被核酸外切酶降解，因而比線
2022
11-04

你知道細(xì)胞裂解有哪些方式嗎
細(xì)胞裂解是改變細(xì)胞通透性和活性的重要實(shí)驗(yàn)方法。主要分為化學(xué)法和機(jī)械法，前者比較溫和，后者雖然產(chǎn)量高，但反應(yīng)更劇烈，很有可能造成細(xì)胞中的DNA斷裂。這兩種方法(包括SDS和溶菌酶處理等)提取純化DNA中常用的方法。機(jī)械裂解可以更均一的裂解細(xì)胞，同化學(xué)裂解相比，機(jī)械處理具有更高的裂解效率和更低的選擇性。機(jī)械處理可以更劇烈和全面的裂解細(xì)胞，但也會(huì)造成DNA的斷裂。一、機(jī)械裂解法主要有以下兩種：1.熱休克，既反復(fù)凍溶法，是一種常用的機(jī)械裂解方式比，通常由冷凍和解凍兩部分組成。原理：由于細(xì)胞內(nèi)冰粒形成和剩
2022
10-27

CHIR99021的實(shí)驗(yàn)參考方法介紹
CHIR99021（CHIR99021，CHIR99021）是氨基嘧啶衍生物，是一種高效的GSK-3α（IC50：10nm）和GSK-3β（IC50：6.7nm）抑制劑，CHIR-99021對(duì)GSK-3的選擇性比接近的同源物CDC2、ERK2以及其他蛋白激酶高500倍以上。CHIR-99021激活Wnt/β-catenin信號(hào)通路，誘導(dǎo)胚胎干細(xì)胞的心肌向分化。CHIR99021的實(shí)驗(yàn)參考方法介紹：一、激酶測定通過使用其His或Glu標(biāo)簽從SF9細(xì)胞中純化激酶。純化Glu標(biāo)記的蛋白質(zhì)，純化His標(biāo)
2022
10-21

生長因子是具有刺激細(xì)胞生長活性的細(xì)胞因子
生長因子是具有刺激細(xì)胞生長活性的細(xì)胞因子。一類通過與特異的、高親和的細(xì)胞膜受體結(jié)合，調(diào)節(jié)細(xì)胞生長與其他細(xì)胞功能等多效應(yīng)的多肽類物質(zhì)。存在于血小板和各種成體與胚胎組織及大多數(shù)培養(yǎng)細(xì)胞中，對(duì)不同種類細(xì)胞具有一定的專一性。通常培養(yǎng)細(xì)胞的生長需要多種生長因子順序的協(xié)調(diào)作用，腫瘤細(xì)胞具有不依賴生長因子的自主性生長的特點(diǎn)。生長因子廣泛用于中性粒細(xì)胞減少癥、白血病和再生障礙性貧血等疾病的治療。生長因子指在組織培養(yǎng)中，除了氨基酸、維生素、葡萄糖以及無機(jī)鹽等正常成分之外，其可以代替培養(yǎng)基血清高分子物質(zhì)從而促進(jìn)細(xì)胞
2022
10-12

選購胎牛血清你需要清楚哪些問題
血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物，其組成成份雖大部分已知，但還有一部分尚不清楚，且血清組成及含量常隨供血?jiǎng)游锏男詣e、年齡、生理?xiàng)l件和營養(yǎng)條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機(jī)物等，這些物質(zhì)對(duì)促進(jìn)細(xì)胞生長或抑制生長活性是達(dá)到生理平衡的。胎牛血清是母牛在懷孕五至八月齡胎時(shí)，將胎牛取出并進(jìn)行心臟穿刺取血。穿刺取血可很大程度的避免外界的污染。而新生牛血清是從剛出生到2周內(nèi)的新生牛靜脈采血。和新生牛血清相比，胎牛血清顯然產(chǎn)量低，成本高。應(yīng)如何為
2022
09-27

牛垂體提取物對(duì)離體培養(yǎng)的垂體腺瘤細(xì)胞增殖具有促進(jìn)作用
牛垂體提取物（BPE）是由牛腦垂體制備的提取物，有研究表明BPE具有明顯改善人垂體腺瘤細(xì)胞體外無血清培養(yǎng)條件的作用,對(duì)離體培養(yǎng)的垂體腺瘤細(xì)胞增殖具有促進(jìn)作用。常用作無血清細(xì)胞培養(yǎng)的生長補(bǔ)充劑，可促進(jìn)上皮細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞和黑色素細(xì)胞增殖，廣泛用作各種上皮細(xì)胞和黑色素細(xì)胞培養(yǎng)中的補(bǔ)充劑。此外，其具有抗氧化能力，可對(duì)抗過氧化氫誘導(dǎo)的細(xì)胞壞死，蛋白質(zhì)氧化，膜破碎和DNA損傷。BPE是無血清的促有絲分裂添加劑，含有天然生長因子的混合物，可與MCDB系列（MCDB170或MSDB154）或DMEM/Ham's
2022
09-14

關(guān)于Surfactin的工作原理介紹
Surfactin(表面活性素)由β-羥基脂肪酸與肽鏈以內(nèi)酯鍵結(jié)合而成。多數(shù)細(xì)菌代謝產(chǎn)生的表面活性素的肽鏈為七元肽，即分子中的肽鏈由7個(gè)α-氨基酸組成，再與帶有12~17個(gè)碳原子的β-羥基脂肪酸構(gòu)成一個(gè)大內(nèi)酯環(huán)，相對(duì)分子質(zhì)量(Mr)為1000左右。表面活性素可通過溶解和破壞細(xì)胞膜發(fā)揮抗菌作用，其與膜中的極性頭部和疏水?；溇上嗷プ饔?，高濃度時(shí)引起磷脂雙分子層高度不穩(wěn)定，中等濃度時(shí)在細(xì)胞膜中形成離子傳導(dǎo)孔與Ca2+結(jié)合，有助于膜滲透；其還可通過有機(jī)屏障驅(qū)動(dòng)其他單價(jià)和二價(jià)陽離子，導(dǎo)致cAMP磷酸二
2022
09-08

細(xì)胞污染的來源有哪些
細(xì)胞中如果污染細(xì)菌，最常見的有枯草桿菌等革蘭陽性菌以及大腸桿菌、假單孢菌等革蘭陰性菌，其中又以白色葡萄球菌較常見。培養(yǎng)細(xì)胞受細(xì)菌污染后，會(huì)很快出現(xiàn)培養(yǎng)液變混濁，pH改變。也有少數(shù)培養(yǎng)液肉眼觀察無多少改變，只能在鏡下發(fā)現(xiàn)菌體才知污染。所以，每天應(yīng)仔細(xì)觀察。污染后細(xì)胞發(fā)生病理改變，胞內(nèi)顆粒增多、增粗，最后變圓脫落死亡，造成實(shí)驗(yàn)失敗和細(xì)胞株(系)丟失。細(xì)胞污染的來源無菌觀念薄弱，穿戴不注意進(jìn)細(xì)胞房不換鞋，不戴口罩，不戴手套，是細(xì)胞房的大忌諱！有更嚴(yán)格的細(xì)胞房連帽子都要戴上。為什么呢？換鞋是為了隔離真菌
2022
08-10

你知道胎牛血清給血清實(shí)驗(yàn)提供了哪些好處嗎
血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復(fù)雜的混合物，其組成成份雖大部分已知，但還有一部分尚不清楚，且血清組成及含量常隨供血?jiǎng)游锏男詣e、年齡、生理?xiàng)l件和營養(yǎng)條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激素、無機(jī)物等，這些物質(zhì)對(duì)促進(jìn)細(xì)胞生長或抑制生長活性是達(dá)到生理平衡的。胎牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中常用的添加培養(yǎng)基。它營養(yǎng)豐富，大約含有三四百種不同成分，具有基礎(chǔ)培養(yǎng)基所不具備的營養(yǎng)因子。對(duì)于細(xì)胞培養(yǎng)而言，胎牛血清的重要性不言而喻。胎牛血清給細(xì)胞提供的益處主要體現(xiàn)在6個(gè)方面：1、提
2022
08-02

預(yù)制膠簡介
丙烯酰胺電泳簡介如圖，帶負(fù)電荷的蛋白，在電場的驅(qū)動(dòng)下，丙烯酰胺介質(zhì)為網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，小孔尺寸與生物大分子從電極負(fù)極向正極遷移。丙烯酰胺介質(zhì)為網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，小孔尺寸與生物大分子具有相似的結(jié)構(gòu)，電泳過程，分子量大的蛋白滯留在上方，小分子蛋白繼續(xù)遷移。從而分離不同分子量的蛋白。蛋白電泳中*的一環(huán)就是配膠，常規(guī)配膠往往需要耗費(fèi)數(shù)個(gè)小時(shí)的時(shí)間，還要面臨漏液、凝膠不均勻（微笑線）、氣泡（皺眉線）等等問題，甚至有時(shí)候?yàn)榱酥苽湟粔K膠以獲得一張好看的電泳圖片，要多耗費(fèi)幾天的時(shí)間；除了配制麻煩，原料試劑還有毒性，會(huì)對(duì)對(duì)配膠人

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