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2017
03-102017
03-082017
03-072017
03-01Western Blot實(shí)驗(yàn)問答集錦之蛋白marker篇
WesternBlot(WB)即蛋白免疫印跡實(shí)驗(yàn)。是將蛋白樣本通過聚丙烯酰胺電泳按分子量大小分離,再轉(zhuǎn)移到雜交膜(blot)上,然后通過一抗/二抗復(fù)合物對靶蛋白進(jìn)行特異性檢測的方法。WB是進(jìn)行蛋白質(zhì)分析zui流行和成熟的技術(shù)之一。本篇討論WesternBlot實(shí)驗(yàn)中關(guān)于蛋白marker的常見問題分析,有助于成功完成WB。1.蛋白marker為什么跑的條帶不清楚?答:首先確認(rèn)膠的濃度、PH值,離子強(qiáng)度是不是正常,這些都會(huì)影響條帶的質(zhì)量。其次確定電泳液的PH、離子強(qiáng)度是否正確,如甘氨酸濃度太低時(shí),蛋2017
02-27愛必信Annexin V-FITC&PI 凋亡檢測試劑盒介紹
AnnexinV-FITC&PI凋亡檢測試劑盒●凋亡簡介細(xì)胞死亡有兩種不同的方式:凋亡和壞死。在正常組織中,不需要的細(xì)胞可以發(fā)生主動(dòng)而自發(fā)的死亡,這種細(xì)胞的程序性死亡也被稱為細(xì)胞凋亡。與壞死不同,細(xì)胞凋亡不伴炎癥反應(yīng),細(xì)胞被快速清除而不影響組織的整體功能,是真核細(xì)胞死亡zui常見的形式。兩者可根據(jù)死亡細(xì)胞的形態(tài)、生物化學(xué)改變等的不同而加以鑒別。細(xì)胞凋亡在調(diào)控細(xì)胞數(shù)量上發(fā)揮與增值相反的作用,和分化、增值協(xié)調(diào)作用,保持機(jī)體正常生存和動(dòng)態(tài)平衡*的兩個(gè)方面。正常的細(xì)胞凋亡在許多生理過程中包括免疫系統(tǒng)成熟2017
02-24牛血清白蛋白BSA在WB實(shí)驗(yàn)中的應(yīng)用
牛血清白蛋白(BSA)在生化實(shí)驗(yàn)中有廣泛的應(yīng)用,例如在WB實(shí)驗(yàn)中加入BSA,通過提高溶液中蛋白質(zhì)的濃度,對酶起保護(hù)作用。防止酶的分解和非特異性吸附,能減輕有些酶的變性,減輕不利環(huán)境因素如加熱,表面張力及化學(xué)因素引起的變性的。具體的WB實(shí)驗(yàn)操作和BSA在實(shí)驗(yàn)中的應(yīng)用愛必信分享如下:一.蛋白質(zhì)的樣品制備:取心肌組織50mg,待組織塊自行溶解,用濾紙吸去其表面水分,將組織塊放入玻璃勻漿器球狀部位,用組織剪盡量將其剪碎,將剪碎的心肌組織放入玻璃勻漿器的桿狀部,按1mlRIPA+10ulPMSF/100m2017
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