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上海一研生物科技有限公司
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兔子端粒酶(TE)ELISA試劑盒操作步驟及保存方法2019/07/31
兔子端粒酶(TE)ELISA試劑盒操作步驟1、編號(hào):將樣品對(duì)應(yīng)微孔按序編號(hào),每板應(yīng)設(shè)陰性對(duì)照2孔、陽(yáng)性對(duì)照2孔、空白對(duì)照1孔(空白對(duì)照孔不加樣品及酶標(biāo)試劑,其余各步操作相同)。2、加樣:分別在陰、陽(yáng)性對(duì)照孔中加入陰性對(duì)照、陽(yáng)性對(duì)照50μl。然后在待測(cè)樣品孔先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測(cè)樣品10μl。加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻。3、溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。4、配液:將20倍濃縮洗滌液加蒸餾水至600ml后備用。5、洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體
人類白細(xì)胞抗原G(HLA-G)ELISA試劑盒幾項(xiàng)問(wèn)題解析2019/07/24
人類白細(xì)胞抗原G(HLA-G)ELISA試劑盒問(wèn)題解析:1.試劑的選擇:選擇優(yōu)良試劑大家都是知道的,但是在檢測(cè)之前還應(yīng)該提前半個(gè)小時(shí)將試劑拿到常溫下進(jìn)行解凍。2.加樣中可能遇到的問(wèn)題:在做血清或是血漿用于檢測(cè)試劑的時(shí)候,會(huì)碰到血清血漿不好分離的情況,這個(gè)時(shí)候的解決辦法是先放在常溫中1到2小時(shí),然后在進(jìn)行離心處理3.洗板時(shí)容易造成誤差:因?yàn)橄窗迨侨斯は吹模耘袛嗍裁磿r(shí)候洗干凈了也是人為判斷的,這個(gè)時(shí)候帶有主觀色彩,所以多清洗幾次,還有就是在洗的時(shí)候孔與孔之間的液體容易交叉流動(dòng)4.顯色問(wèn)題:使用了
豬皮質(zhì)酮/腎上腺酮(CORT)ELISA試劑盒操作步驟注意事項(xiàng)2019/07/17
豬皮質(zhì)酮/腎上腺酮(CORT)ELISA試劑盒操作步驟注意事項(xiàng):1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶析出,稀釋時(shí)可在水浴中加溫助溶,洗滌時(shí)不影響結(jié)果。3.各步加樣均應(yīng)使用加樣器,并經(jīng)常校對(duì)其準(zhǔn)確性,以避免試驗(yàn)誤差。一次加樣時(shí)間控制在5分鐘內(nèi),如標(biāo)本數(shù)量多,推薦使排槍加樣。4.請(qǐng)每次測(cè)定的同時(shí)做標(biāo)準(zhǔn)曲線,做復(fù)孔。如標(biāo)本中待測(cè)物質(zhì)含量過(guò)高(樣本OD值于標(biāo)準(zhǔn)品孔*孔的OD值),請(qǐng)先用樣品稀釋液稀釋一定
小鼠補(bǔ)體蛋白4(C4)ELISA試劑盒操作注意事項(xiàng)及處理要求2019/07/10
小鼠補(bǔ)體蛋白4(C4)ELISA試劑盒操作注意事項(xiàng):(1)試劑應(yīng)按標(biāo)簽說(shuō)明書儲(chǔ)存,使用前恢復(fù)到室溫。稀稀過(guò)后的標(biāo)準(zhǔn)品應(yīng)丟棄,不可保存。(2)實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回包裝袋中,密封保存,以免變質(zhì)。(3)不用的其它試劑應(yīng)包裝好或蓋好。不同批號(hào)的試劑不要混用。保質(zhì)前使用。(4)使用一次性的吸頭以免交叉污染,吸取終止液和底物A、B液時(shí),避免使用帶金屬部分的加樣器。(5)使用干凈的塑料容器配置洗滌液。使用前充分混勻試劑盒里的各種成份及樣品。(6)洗滌酶標(biāo)板時(shí)應(yīng)充分拍干,不要將吸水紙直接放入酶標(biāo)反應(yīng)孔中吸
大鼠雄激素受體(AR)ELISA試劑盒問(wèn)題解析2019/06/26
大鼠雄激素受體(AR)ELISA試劑盒問(wèn)題解析:1.試劑的選擇:選擇優(yōu)良試劑大家都是知道的,但是在檢測(cè)之前還應(yīng)該提前半個(gè)小時(shí)將試劑拿到常溫下進(jìn)行解凍。2.加樣中可能遇到的問(wèn)題:在做血清或是血漿用于檢測(cè)試劑的時(shí)候,會(huì)碰到血清血漿不好分離的情況,這個(gè)時(shí)候的解決辦法是先放在常溫中1到2小時(shí),然后在進(jìn)行離心處理3.洗板時(shí)容易造成誤差:因?yàn)橄窗迨侨斯は吹?,所以判斷什么時(shí)候洗干凈了也是人為判斷的,這個(gè)時(shí)候帶有主觀色彩,所以多清洗幾次,還有就是在洗的時(shí)候孔與孔之間的液體容易交叉流動(dòng)4.顯色問(wèn)題:使用了過(guò)期的顯
雞β內(nèi)酰胺酶(β-lactamase)ELISA試劑盒幾點(diǎn)注意事項(xiàng)2019/06/19
雞β內(nèi)酰胺酶(β-lactamase)ELISA試劑盒說(shuō)明書選用注意:1.根據(jù)可能影響試劑盒質(zhì)量的因素,從固相材料的來(lái)源、包被抗體或抗原的性質(zhì)、顯色底物、測(cè)定模式這幾個(gè)方面來(lái)判斷該試劑盒是否符合要求效期。2.同行對(duì)有關(guān)試劑盒的使用效果:①個(gè)別的使用效果;②綜合的使用評(píng)價(jià)。雞β內(nèi)酰胺酶(β-lactamase)ELISA試劑盒說(shuō)明書的注意事項(xiàng):1.實(shí)驗(yàn)操作中必須使用一次性吸頭,避免交叉污染。2.加樣:加樣時(shí),要控制加樣速度,避免孔與后一孔間的時(shí)間間隔過(guò)大,否則將會(huì)導(dǎo)致不同的預(yù)孵育時(shí)間,從而影響實(shí)驗(yàn)
猴β淀粉樣蛋白142(Aβ142)ELISA試劑盒問(wèn)題解析2019/06/12
猴β淀粉樣蛋白142(Aβ142)ELISA試劑盒問(wèn)題解析:1.試劑的選擇:選擇優(yōu)良試劑大家都是知道的,但是在檢測(cè)之前還應(yīng)該提前半個(gè)小時(shí)將試劑拿到常溫下進(jìn)行解凍。2.加樣中可能遇到的問(wèn)題:在做血清或是血漿用于檢測(cè)試劑的時(shí)候,會(huì)碰到血清血漿不好分離的情況,這個(gè)時(shí)候的解決辦法是先放在常溫中1到2小時(shí),然后在進(jìn)行離心處理3.洗板時(shí)容易造成誤差:因?yàn)橄窗迨侨斯は吹?,所以判斷什么時(shí)候洗干凈了也是人為判斷的,這個(gè)時(shí)候帶有主觀色彩,所以多清洗幾次,還有就是在洗的時(shí)候孔與孔之間的液體容易交叉流動(dòng)4.顯色問(wèn)題:使
大鼠ELISA試劑盒制備的詳細(xì)步驟及質(zhì)量注意2019/06/05
大鼠ELISA試劑盒制備的詳細(xì)步驟:1)、抗原表位的計(jì)算機(jī)挑選;2)、抗原的制備;3)、血清的采集;4)、間接ELISA方法的樹(shù)立;5)、間接ELISA方法的敏感性和特異性驗(yàn)證;6)、試劑盒的穩(wěn)定性驗(yàn)證;ELISA試劑盒質(zhì)量,您需注意:一、合理安排檢丈量,避免反響板過(guò)多形成洗板等待時(shí)間長(zhǎng)。二、顯色劑盡量在臨用前配制,堅(jiān)持不biguo期顯色劑,肉眼可見(jiàn)淺藍(lán)色的TMB顯色劑不必。三、加樣時(shí)保持顯色劑不外流,A、B液應(yīng)避免接觸金屬器械,加終止液時(shí)應(yīng)避免產(chǎn)生氣泡。四、加酶試劑后用吸水紙?jiān)诿笜?biāo)板表面輕拭吸
引物是決定PCR 結(jié)果的關(guān)鍵,下列原則有助于引物的合理設(shè)計(jì)2019/05/28
PCR技術(shù)具有操作簡(jiǎn)便、省時(shí)、靈敏度高特異性強(qiáng)和對(duì)原始材料質(zhì)量要求低等優(yōu)點(diǎn),但由于所用的TaqDNA聚合酶缺乏5'—3'核酶外切酶活性,不能糾正反應(yīng)中發(fā)生的錯(cuò)誤核苷酸摻入,估計(jì)每9000個(gè)核苷酸會(huì)導(dǎo)致一個(gè)摻入錯(cuò)誤,不過(guò)InnisM·A發(fā)現(xiàn),錯(cuò)誤摻入的堿基有終止鏈延伸的作用傾向,使得錯(cuò)誤不會(huì)擴(kuò)大。PCR技術(shù)應(yīng)用廣泛,不可能有這樣一套條件滿足所有的實(shí)驗(yàn),但本實(shí)驗(yàn)所介紹的方法可適應(yīng)于大多數(shù)DNA擴(kuò)增反應(yīng),即使有的不適應(yīng),至少也確定了一個(gè)共同的起點(diǎn),在此基礎(chǔ)上可以作多種變化。不過(guò)下列因素在實(shí)驗(yàn)應(yīng)用時(shí)應(yīng)予
NLRP3在肺部炎癥及大鼠肺纖維化形成密切相關(guān)2019/05/22
肺纖維化是間質(zhì)性肺炎中*常見(jiàn)的一種,高發(fā)于老年人群,以胸膜下肺基底部分布為主,HRCT上可表現(xiàn)為數(shù)量不等、范圍有限的磨玻璃影及網(wǎng)格影[1]。近年來(lái)研究發(fā)現(xiàn),肺組織損傷可導(dǎo)致組織蛋白酶及ROS大量釋放,誘導(dǎo)炎癥小體(NLRP3)高表達(dá),參與慢性炎癥形成。本實(shí)驗(yàn)采用大鼠氣管滴注博來(lái)霉素制作肺纖維化模型,探討NLRP3在博來(lái)霉素致大鼠肺纖維化中的表達(dá)及作用機(jī)制。1資料與方法1.1一般資料健康清潔級(jí)Wistar大鼠60只(雌雄各半),6周齡,體重180~220g,由哈爾濱醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)部提供。主要試
ELISA實(shí)驗(yàn)正面解析血清學(xué)反應(yīng)的幾項(xiàng)特點(diǎn)2019/05/15
大鼠ELISA試劑盒實(shí)驗(yàn)正面解析血清學(xué)反應(yīng)的特點(diǎn)原理:抗原和相應(yīng)抗體之間在一定條件下可發(fā)生免疫學(xué)反應(yīng)。在體外,抗體主要存在于血清中,因此抗原和抗體之間發(fā)生特異性結(jié)合的反應(yīng)又稱為血清學(xué)反應(yīng)(一)血清學(xué)反應(yīng)的一般特點(diǎn)1、抗原抗體的結(jié)合具有特異性在血清學(xué)反應(yīng)中,只有抗原(或抗體)和相應(yīng)的抗體(或抗原)才能結(jié)合。2、抗原抗體是分子表面的結(jié)合抗原抗體發(fā)生結(jié)合后,復(fù)合物相當(dāng)穩(wěn)定,但是有可逆性。經(jīng)分離后重新得到的抗原或抗體的性質(zhì)仍不改變。3、抗原抗體按一定的分子比例結(jié)合只有在分子比例合適時(shí)才會(huì)出現(xiàn)可見(jiàn)反應(yīng)。若
ELISA試劑盒基本實(shí)驗(yàn)原理介紹(初級(jí))2019/05/08
ELISA試劑盒基本原理介紹(初級(jí))實(shí)驗(yàn)原理用于免疫酶技術(shù)的酶有很多,如過(guò)氧化物酶,堿性磷酸酯酶,β-D-半乳糖苷酶,葡萄糖氧化酶,碳酸酐酶,乙酰膽堿酯酶,6-磷酸葡萄糖脫氧酶等。常用于ELISA法的酶有辣根過(guò)氧化物酶,堿性磷酸酯酶等,其中尤以辣根過(guò)氧化物酶為多。由于酶摧化的是氧化還原反應(yīng),在呈色后須立刻測(cè)定,否則空氣中的氧化作用使顏色加深,無(wú)法準(zhǔn)確地定量。辣根過(guò)氧化物酶(HRP)是一種糖蛋白,每個(gè)分子含有一個(gè)氯化血紅素(protonhemin)區(qū)作輔基。酶的濃度和純度常以輔基的含量表示。氯化血
大鼠細(xì)胞凋亡相關(guān)因子(Bcl-2)試劑盒操作程序總結(jié)2019/04/29
大鼠細(xì)胞凋亡相關(guān)因子(Bcl-2)試劑盒操作程序總結(jié):計(jì)算以標(biāo)準(zhǔn)物的濃度為橫坐標(biāo),OD值為縱坐標(biāo),在坐標(biāo)紙上繪出標(biāo)準(zhǔn)曲線,根據(jù)樣品的OD值由標(biāo)準(zhǔn)曲線查出相應(yīng)的濃度;再乘以稀釋倍數(shù);或用標(biāo)準(zhǔn)物的濃度與OD值計(jì)算出標(biāo)準(zhǔn)曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計(jì)算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數(shù),即為樣品的實(shí)際濃度。大鼠細(xì)胞凋亡相關(guān)因子(Bcl-2)試劑盒注意事項(xiàng)1.試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應(yīng)在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標(biāo)包被板開(kāi)封后如未用完,板條應(yīng)裝入密封袋中保存。2.濃洗滌液可能會(huì)有結(jié)晶
ELISA試劑盒點(diǎn)評(píng)的幾個(gè)步驟2019/04/24
ELISA試劑盒在試劑的挑選免疫檢測(cè)的原理均基于抗原抗體反應(yīng)。因?yàn)樵摲磻?yīng)過(guò)程受多種因素的影響,如普遍存在基質(zhì)效應(yīng)、穿插反應(yīng)等,因此檢測(cè)成果難以溯源,不同辦法、不同試劑之間乃至同一試劑不同批號(hào)間成果均缺乏可比性。試劑質(zhì)量在很大程度上決議了檢測(cè)的水平,因此在引進(jìn)新項(xiàng)目之前有必要對(duì)試劑進(jìn)行嚴(yán)厲的點(diǎn)評(píng)。ELISA試劑盒的點(diǎn)評(píng)有以下幾個(gè)步驟:1)斷定展開(kāi)該項(xiàng)意圖必要性2)了解該項(xiàng)目現(xiàn)有的檢測(cè)辦法和原理3)在了解試劑的組成基礎(chǔ)上挑選多家試劑盒進(jìn)行比較4)判別規(guī)范參閱辦法或參閱物質(zhì)5)機(jī)構(gòu)的陳述如各級(jí)室間質(zhì)量
人彈性蛋白酶(Elastase)ELISA試劑盒操作步驟2019/04/17
人彈性蛋白酶(Elastase)ELISA試劑盒操作步驟1.標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋:本試劑盒提供原倍標(biāo)準(zhǔn)品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進(jìn)行稀釋。16U/L5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液8U/L4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的5號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液4U/L3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的4號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2U/L2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的3號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液1U/L1號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品150μl的2號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入150μl標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液2.加樣:分別設(shè)空白孔(空白
測(cè)試原理和血紅蛋白測(cè)試機(jī)構(gòu)的組成2019/04/12
而根據(jù)測(cè)試原理和血紅蛋白測(cè)試機(jī)構(gòu)的組成,影響血紅蛋白測(cè)試的有一些主要因素,1、液路系統(tǒng)液路系統(tǒng)包括進(jìn)液管、輸液管、泵管、電磁泵(或蠕動(dòng)泵)及供電電路等部件。進(jìn)液管臟、堵、裂隙會(huì)影響進(jìn)液量,或吸入氣泡,嚴(yán)重影響測(cè)量。這時(shí)要清潔沖洗,除去堵塞,有裂隙漏氣要更換進(jìn)液管。輸液管、泵管,主要是臟和堵或老化。臟堵要認(rèn)真沖洗。對(duì)泵管,因?yàn)閿D壓和摩擦容易發(fā)生粘連,或老化,嚴(yán)重的甚至磨破而漏氣,所以對(duì)泵管要及時(shí)檢查。損壞要及時(shí)更換。電磁泵(或蠕動(dòng)泵)的故障主要是轉(zhuǎn)動(dòng)不靈活,卡死不轉(zhuǎn)動(dòng),或供電電路故障。轉(zhuǎn)動(dòng)不靈活或
elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)中培養(yǎng)基配置的基本過(guò)程2019/04/04
elisa試劑盒實(shí)驗(yàn)中培養(yǎng)基配置的基本過(guò)程1.配制溶液向容器內(nèi)加入所需水量的一部分,按照培養(yǎng)基的配方,稱取各種原料,依次加入使其溶解,zui后補(bǔ)足所需水分。對(duì)蛋白胨、肉膏等物質(zhì),需加熱溶解,加熱過(guò)程所蒸發(fā)的水分,應(yīng)在全部原料溶解后加水補(bǔ)足。配制固體培養(yǎng)基時(shí),先將上述已配好的液體培養(yǎng)基煮沸,再將稱好的瓊脂加入,繼續(xù)加熱至*融化。并不斷攪拌,以免瓊脂糊底燒焦。2.調(diào)節(jié)pH值用pH試紙(或pH電位計(jì)、氫離子濃度比色計(jì))測(cè)試培養(yǎng)基的pH值,如不符合需要,可用10%HCl或10%NaOH進(jìn)行調(diào)節(jié),直到調(diào)節(jié)
定量分析抗體的常用方法有擴(kuò)散法、酶聯(lián)免疫吸附法和火箭免疫電泳法2019/03/27
近幾年也將其應(yīng)用到食品領(lǐng)域中來(lái)檢測(cè)某些食品中的生理活性物質(zhì)。一、基本概念1、免疫:籠統(tǒng)地概括起來(lái),免疫就是人和動(dòng)物機(jī)體防御、排除外來(lái)物質(zhì)(異物)進(jìn)人體內(nèi),同時(shí)識(shí)別和清除體內(nèi)死亡、變性物質(zhì)和平定體內(nèi)叛亂分子突變細(xì)胞,以保護(hù)和穩(wěn)定自身的防護(hù)機(jī)制。2、抗原:抗原是指那些能夠誘導(dǎo)機(jī)體的免疫系統(tǒng)發(fā)生免疫應(yīng)答,產(chǎn)生抗體和致敏效應(yīng)淋巴細(xì)胞,并在體內(nèi)外與之特異性結(jié)合,發(fā)生免疫反應(yīng)的物質(zhì)。3、抗體:是能與相應(yīng)的抗原專一性結(jié)合的蛋白質(zhì)分子,和機(jī)體其他生物大分子一樣是細(xì)胞的產(chǎn)物,分泌到體液中或表現(xiàn)在細(xì)胞表面上。4、抗
酶標(biāo)記抗體的質(zhì)量主要取決哪些呢2019/03/21
酶標(biāo)記物包括酶標(biāo)記抗原、酶標(biāo)記抗體和酶標(biāo)記SPA等。酶標(biāo)記物質(zhì)量的好壞直接關(guān)系到免疫酶技術(shù)的成功與否,因此被稱為關(guān)鍵的試劑。酶標(biāo)記物中常用的是酶標(biāo)記抗體,它是將酶與特異性抗體經(jīng)適當(dāng)方法連接而成。酶標(biāo)記抗體的質(zhì)量主要取決于純度好、活性強(qiáng)及親和力高的酶和抗體,其次要有良好的制備方法。目前,高質(zhì)量的酶(如辣根過(guò)氧化物酶,簡(jiǎn)稱HRP)國(guó)內(nèi)已有商品供應(yīng)。高質(zhì)量的抗體則可通過(guò)提取純化而獲得。在制備方法上,宜選用產(chǎn)率高、不影響結(jié)合物的活性和不混雜干擾性物質(zhì)且操作簡(jiǎn)便易行的方法。注意事項(xiàng)1.在具備高質(zhì)量HRP的
菌種培養(yǎng)的重要性2019/03/14
“菌種培養(yǎng)通過(guò)冷凍技術(shù)處理后,細(xì)菌就會(huì)處于休眠狀態(tài)。如果要活化使用,則需通過(guò)相應(yīng)的培養(yǎng)液進(jìn)行活化,才能恢復(fù)活性?!毙劣袢A以格氏嗜鹽堿桿菌為例說(shuō),復(fù)活菌種所需的營(yíng)養(yǎng)為:20%的氯化鈉,酪蛋白、氨基酸、pH值為9等,在適宜的溫度和培養(yǎng)基中,這些沉睡的細(xì)菌便會(huì)被重新喚醒。“我們選擇的菌種,一般要有潛在應(yīng)用價(jià)值和豐富的生物多樣性?,F(xiàn)在,越來(lái)越多的微生物被喚醒,并在各個(gè)領(lǐng)域一顯身手。”辛玉華說(shuō)。菌保中心保藏的微生物是經(jīng)過(guò)幾代人長(zhǎng)期且持續(xù)累積來(lái)的,只有時(shí)間才能體現(xiàn)微生物資源保藏的價(jià)值。菌種保藏有雙重“保險(xiǎn)”
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