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上海一研生物科技有限公司
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菌種培養(yǎng)凝集反應(yīng)技術(shù)分析2017/04/25
菌種培養(yǎng)顆粒性抗原(細(xì)菌、紅細(xì)胞等)與相應(yīng)抗體結(jié)合,在電解質(zhì)參與下所形成的肉眼可見(jiàn)的凝集現(xiàn)象,稱為凝集反應(yīng)(Agglutinationreaction)。其中的抗原稱為凝集原,抗體稱為凝集素。在該反應(yīng)中,因?yàn)閱挝惑w積抗體量大,做定量實(shí)驗(yàn)時(shí),應(yīng)稀釋抗體。1)直接凝集反應(yīng)顆粒性抗原與相應(yīng)抗體直接結(jié)合所出現(xiàn)的反應(yīng),稱為直接凝集反應(yīng)(Directagglutionreaction)。a.玻片凝集法。是一種常規(guī)的定性試驗(yàn)方法。原理是用已知抗體來(lái)檢測(cè)未知抗原。常用于鑒定菌種、血型。如將含有痢疾桿菌抗體的血清
優(yōu)良的光合細(xì)菌菌種和產(chǎn)品的外觀質(zhì)量辨別2017/04/20
1、ATCC菌種外觀上看比較均勻,基本無(wú)上下分層。相反,市場(chǎng)上有許多光合細(xì)菌是上下分層的,上層比較清淡,下層則比較深厚,上層顏色淺,下層顏色深,zui底層可能還會(huì)有一層黑黑的沉淀。而的光合細(xì)菌菌種和產(chǎn)品,上下都是比較均勻的,沒(méi)有較明顯的分層,顏色比較均勻,外觀看起來(lái)也悅目。(當(dāng)然,除了培養(yǎng)基溶解時(shí),會(huì)與硬水中的重金屬離子反應(yīng)產(chǎn)生的絮裝沉淀除外)這種上下無(wú)分層,顏色均勻,不是靠加懸浮劑,或增稠劑而造成的,而是自然培養(yǎng)出來(lái)的,不加任何修飾而成的。少數(shù)地方,由于水質(zhì)的原因,可能會(huì)產(chǎn)生稍稍的差別。2、沒(méi)
選擇微生物菌種的方法2017/04/18
1、微生物菌種選擇動(dòng)物消化道微生物具有多樣性和特異性,不同動(dòng)物種類對(duì)菌種的要求不同,同一菌株用于不同動(dòng)物,產(chǎn)生的效果差異也較大。使用時(shí)一定要掌握菌種的特性和功效,選擇不當(dāng)起不到應(yīng)有效果,反而會(huì)破壞原有菌群,甚至引發(fā)疾病2、微生物菌種應(yīng)用時(shí)間微生物制劑應(yīng)用要從子畜開(kāi)始使用,以保證有益菌優(yōu)先定植。因?yàn)橹苿┻M(jìn)入體內(nèi)后要有一段時(shí)間進(jìn)行微生物菌群調(diào)整才能定植下來(lái)。一般認(rèn)為,乳酸菌類在各種動(dòng)物的各階段添加均較好,芽孢桿菌類在生長(zhǎng)期添加較好,在幼齡期可以添加;曲霉菌類在幼齡期,水產(chǎn)動(dòng)物全期不必添加;酵母菌類在
分析大腸桿菌的傳統(tǒng)檢測(cè)法2017/04/13
1.菌種培養(yǎng)多管發(fā)酵法(MTF,Multiple-tubefermentation)多管發(fā)酵法是根據(jù)大腸菌群能發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣的特征,檢測(cè)水樣中大腸菌群的方法。多管發(fā)酵的大腸菌群陽(yáng)性,如果在44.5℃的培養(yǎng)基上進(jìn)行24h的培養(yǎng),能釋放出熒光產(chǎn)物而使培養(yǎng)基在紫外光源的照射下呈現(xiàn)熒光反應(yīng),此種方法即可檢測(cè)出樣本中是否含有大腸桿菌,具體步驟:取一定量水樣于乳糖蛋白胨培養(yǎng)液中進(jìn)行初發(fā)酵實(shí)驗(yàn)(推測(cè)實(shí)驗(yàn)),再進(jìn)行平板分離(證實(shí)實(shí)驗(yàn))復(fù)發(fā)酵實(shí)驗(yàn)鑒定(完成實(shí)驗(yàn))。根據(jù)各稀釋度發(fā)酵的管數(shù)查zui可能數(shù)(mostp
菌種培養(yǎng)在細(xì)節(jié)上該注意哪些問(wèn)題2017/04/11
1、菌種培養(yǎng)環(huán)境菌種提倡清潔,菌房事先應(yīng)消毒處理,采用2種以上方法交叉消毒,避免雜菌產(chǎn)生抗藥性。出現(xiàn)雜菌的菌袋應(yīng)及時(shí)隔離處理,嚴(yán)重的必須及時(shí)遠(yuǎn)扔深埋,不能在場(chǎng)地堆積。2、原料選擇經(jīng)濟(jì)實(shí)用、來(lái)源廣泛的原料,已霉變、腐爛的原料不要采用。培養(yǎng)料中各種物質(zhì)的配制比例要適當(dāng),特別是要有適宜的碳氮比。對(duì)不同種類的食用菌菌種應(yīng)選擇適宜的pH值。培養(yǎng)料的含水量要合適,拌料要均勻,配好料及時(shí)分裝。3、滅菌滅菌是菌神的關(guān)鍵,滅菌要*。常壓蒸汽滅菌注意滅菌倉(cāng)內(nèi)不能有死角;高壓蒸汽滅菌排放冷空氣要*,防止產(chǎn)生假壓,影響
食品衛(wèi)生微生物滅菌處理2017/04/06
(1)菌生物菌種干熱滅菌法:此法適應(yīng)于在干熱情況下,不損壞、不變質(zhì)、不蒸發(fā)的物品、較常用于玻璃器皿、金屬制品、陶瓷制品等的滅菌。①器械器皿應(yīng)清洗后再干烤,以防附著在表面的污物炭化。②滅菌時(shí)安放物品不能過(guò)擠,不要直接接觸底和箱壁,物品之間留有空隙。③菌時(shí)將箱門關(guān)緊,接上電源,先將排氣孔打開(kāi)約30min,排除滅菌器中的冷空氣,溫度升至160℃調(diào)節(jié)指示燈,維持1.5–2h。④滅菌完畢后或溫度升溫過(guò)程中,須在60℃以下才能打開(kāi)箱門。(2)手提式高壓鍋或立式壓力蒸氣滅菌器的使用應(yīng)按下列步驟進(jìn)行:①手提式高
硝酸鹽還原實(shí)驗(yàn)中操作說(shuō)明2017/04/01
(1)微生物菌種原理:硝酸鹽還原反應(yīng)包括兩個(gè)過(guò)程:一是在合成代謝過(guò)程中,硝酸鹽還原為亞硝酸鹽和氨,再由氨轉(zhuǎn)化為氨基酸和細(xì)胞內(nèi)其它含氮化合物;二是在分解代謝過(guò)程中,硝酸鹽或亞硝酸鹽代替氧作為呼吸酶系統(tǒng)中的終末受氫體。硝酸鹽還原過(guò)程可因細(xì)菌不同而異。有的細(xì)菌僅使硝酸鹽還原為亞硝酸鹽,如大腸埃希菌等;有的細(xì)菌可使其還原為亞硝酸鹽和離子態(tài)的銨;有的細(xì)菌能使硝酸鹽或亞硝酸鹽還原為氮,如假單胞菌;有的細(xì)菌還可以將其還原產(chǎn)物在合成性代謝中*利用。(2)實(shí)驗(yàn)方法:微生物菌種將待檢菌接種于硝酸鹽培養(yǎng)基(內(nèi)含小倒管
菌種培養(yǎng)采取哪些措施防止衰退2017/03/30
菌種培養(yǎng)選育菌種時(shí)所處理的細(xì)胞應(yīng)使用單核的,避免使用多核細(xì)胞;合理選擇誘變劑的種類和劑量或增加突變位點(diǎn),以減少分離回復(fù);在誘變處理后進(jìn)行充分的后培養(yǎng)及分離純化,以保證保藏菌種純萃。這些可有效的防止菌種的退化。選用合適的培養(yǎng)基有人發(fā)現(xiàn)用老苜蓿根汁培養(yǎng)基培養(yǎng)"5406"抗生菌--細(xì)黃鏈霉菌可以防止它的退化。在赤霉菌產(chǎn)生菌--藤倉(cāng)赤霉的培養(yǎng)基中,加入糖蜜、天門冬素、谷氨酰胺、5-核苷酸或甘露醇等物質(zhì)時(shí),也有防止菌種退化的效果。也有選取營(yíng)養(yǎng)相對(duì)貧乏的培養(yǎng)基做菌種保藏培養(yǎng)基,如培養(yǎng)基中適當(dāng)限制容易利用的糖
真菌的培養(yǎng)操作分析2017/03/28
ATCC菌種材料:菌種、沙保氏培養(yǎng)基、平皿、載玻片、蓋玻片。方法:1、ATCC菌種一般培養(yǎng):分別將新型隱球菌、白色念珠菌、絮狀表皮癬菌接種于沙保氏培養(yǎng)基,于22℃-28℃下培養(yǎng)(深部真菌可培養(yǎng)于37℃環(huán)境),一周后觀察菌落特征。真菌菌落在形態(tài)上可分為三大類:酵母型菌落:與細(xì)菌菌落相似,圓形、白色、邊緣整齊、表面光滑濕潤(rùn)。類酵母型菌落:同酵母型菌落,圓形、較大、白色,但菌落根部有假菌絲長(zhǎng)入培養(yǎng)基內(nèi)。絲狀菌落:是多細(xì)胞真菌的菌落形式。有許多疏松的菌絲體構(gòu)成,菌落呈棉絮狀、絨毛狀或粉末狀,菌落中央有皺
微生物菌種幾種方法簡(jiǎn)便、效果好的保存方法介紹2017/03/23
一、微生物菌種需要4℃冰箱保存1、液體石蠟保存法先將液體石蠟滅菌,然后放于37℃恒溫箱中,使水汽蒸發(fā)掉備用。再將需要保存的菌種在zui適宜的斜面培養(yǎng)基中培養(yǎng),用無(wú)菌吸管吸取已滅菌的液體石蠟,注入已長(zhǎng)好的斜面培養(yǎng)基上,用量以高出斜面頂端1cm為準(zhǔn)。試管需直立,置4℃或室溫下保存,一般無(wú)芽胞細(xì)菌可保存1年左右。2、蒸餾水保存法取滅菌蒸餾水6-7ml加于試管斜面上,用吸管研磨,洗下菌苔充分混勻,將此菌液分裝于滅菌的螺旋小瓶中,或用膠塞密封,置4℃保存可存活數(shù)年。3、高層半固體瓊脂石蠟保存法將需保存的菌
放線菌的代表種類形態(tài)和特點(diǎn)2017/03/21
1.微生物菌諾卡氏菌屬(Nocardia)形態(tài):營(yíng)養(yǎng)菌絲發(fā)育良好,具橫隔并斷裂成桿菌或類球菌。氣生菌絲有或無(wú)。(多數(shù)無(wú)氣絲)主要特點(diǎn):菌落小,細(xì)胞抗酸或部分抗酸。2.鏈霉菌屬(Streptomyces)形態(tài):基絲發(fā)育良好,多分枝,氣生菌絲分枝,氣生菌絲上有長(zhǎng)孢子絲鏈,孢子絲鏈直,波曲或螺旋形,孢子圓形,橢圓形或桿狀,表面光滑或有瘤狀物,刺突,毛發(fā)或鱗片狀物。主要特點(diǎn):許多鏈霉菌產(chǎn)生抗生素,如鏈霉素是由灰色鏈霉菌產(chǎn)生的。(Str.griseus)3.弗蘭克氏菌屬(Frankia)形態(tài):基內(nèi)菌絲有分
霉菌分類與鑒定分析2017/03/16
菌種培養(yǎng)是一些小型絲狀真菌的統(tǒng)稱,并不是分類學(xué)名詞,在分類學(xué)上分別屬于藻狀菌綱、子囊菌綱與半知菌類。霉菌菌體均是由分支或不分支的菌絲構(gòu)成的,許多菌絲交織在一起稱為菌絲體。霉菌的菌絲依據(jù)其形態(tài)構(gòu)造可分為無(wú)隔菌絲和有隔菌絲;依據(jù)其功能可分為營(yíng)養(yǎng)菌絲、氣生菌絲和繁殖菌絲;霉菌的繁殖主要靠形成各種各樣無(wú)性或有性孢子來(lái)完成。菌絲體的形態(tài)特征及抱子的形成方式與形態(tài)特征是霉菌分類與鑒定的重要依據(jù)。觀察霉菌時(shí),若用水做介質(zhì)制備其鏡檢標(biāo)本片,菌絲常因滲透作用而膨脹、變形,且孢子在水中容易分散,難以保持其自然著生狀
高壓蒸汽滅菌應(yīng)注意哪些方面2017/03/14
1.ATCC菌種塑料袋的選擇不同常壓蒸汽滅菌一般選用聚乙烯薄膜,而高壓蒸汽滅菌應(yīng)選用聚丙烯薄膜,厚度為5~6絲,過(guò)薄,耐壓和耐熱能力低,會(huì)影響成品率。聚乙烯薄膜不耐高壓,在1.2公斤/平方厘米高壓下會(huì)融化,不能使用。2.消毒壓力和溫度不能過(guò)高高壓蒸汽消毒壓力比較高,但由于培養(yǎng)基包裝大多使用塑料薄膜,消毒壓力不能超過(guò)1.4公斤/平方厘米,可以通過(guò)延長(zhǎng)消毒時(shí)間至2小時(shí)左右來(lái)達(dá)到消毒效果。消毒壓力和溫度過(guò)高,薄膜會(huì)出現(xiàn)融化或膨脹,產(chǎn)生裂縫、小洞,接種后易感染雜菌。3.消毒時(shí)間應(yīng)隨培養(yǎng)基質(zhì)不同而不同一般
空腸彎曲菌樣品處理和分離2017/03/09
菌種培養(yǎng)樣品處理1.空腸彎曲菌一般樣品取25g(mL)樣品(水果、蔬菜、水產(chǎn)品為50g)加入盛有225mLBolton肉湯的有濾網(wǎng)的均質(zhì)袋中(若為無(wú)濾網(wǎng)均質(zhì)袋可使用無(wú)菌紗布過(guò)濾),用拍擊式均質(zhì)器均質(zhì)1min~2min,經(jīng)濾網(wǎng)或無(wú)菌紗布過(guò)濾,將濾過(guò)液進(jìn)行培養(yǎng)。2.整禽等樣品用200mL0.1%的蛋白胨水中充分沖洗樣品的內(nèi)外部,并振蕩2min~3min,經(jīng)無(wú)菌紗布過(guò)濾至250mL離心管中,16000g離心15min后棄去上清,用10mL0.1%蛋白胨水懸浮沉淀,吸取3mL于100mLBolton肉湯
大型真菌菌種保藏的基本原則、方法及技術(shù)要求2017/03/07
ATCC菌種菌種保藏的原理是通過(guò)低溫、干燥、隔絕空氣和斷絕營(yíng)養(yǎng)等手段,以達(dá)到zui大限度地降低菌種的代謝強(qiáng)度,抑制菌絲的生長(zhǎng)和繁殖,使其生命活動(dòng)降低到極低的程度或處于休眠狀態(tài),從而延長(zhǎng)菌種的保藏時(shí)間。技術(shù)要求1不同菌種應(yīng)根據(jù)要求選擇適合的培養(yǎng)基進(jìn)行培養(yǎng)。2接種須無(wú)菌操作,避免雜菌污染。3定期檢查保藏期間要定期檢查保藏菌種的冰箱溫度和濕度;檢查保藏器皿的棉塞有無(wú)生霉現(xiàn)象,如發(fā)現(xiàn)異常則立即取出該管重新純化,經(jīng)培養(yǎng)后補(bǔ)上空缺;在低倍解剖鏡下抽樣檢查有無(wú)螨蟲(chóng)等害蟲(chóng),發(fā)現(xiàn)時(shí)須及時(shí)消除。方法與步驟1斜面低溫
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